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有用doxycycline的吗？

有用doxycycline的吗？# Biology - 生物学

t*g2011-11-08 08:11

1 楼

在做inducible cell lines,要用到doxycycline，从我读到的一个protocol看
doxycycline好像很不稳定，freeze-thaw cycle不能超过７次，在medium里的half
life只有24小时；　那岂不是天天都要加新的？　请问你们是怎么用的？--- final
concentration? frequencing of adding to medium? storage condition？
谢谢！

n*w2011-11-08 08:11

2 楼

we use this in animals to induce cre expression, not cells...

b*82011-11-08 08:11

3 楼

我的做法，一次配一个高浓度的stock（eg. 100ug/ul）,然后分装若干管用锡纸包裹，
-70度冻存。同时多配几支working solution（1ug/ul），每支只分装10ul，避光保存
于-70度，以后每次用的时候取一支拿出来化冻，用完即弃。
我做肝癌细胞的，按照clontech公司网站上的建议，培养基中Dox终浓度在0.5~1.0ug/
ml时就能诱导靶基因很好的表达，更高或更低的浓度我没有试过。
换液的话，我一般每48小时换液一次，跟每天换液一次没有差别。
供参考。

t*g2011-11-08 08:11

4 楼

谢谢回复！那在-70C能放多久呢？

r*e2011-11-08 08:11

5 楼

我都是用1000x stock (2mg/ml)，反复冻融，放在-20度，没什么问题。这一般都是大大
过量的。

【在 t****g 的大作中提到】

: 在做inducible cell lines,要用到doxycycline，从我读到的一个protocol看
: doxycycline好像很不稳定，freeze-thaw cycle不能超过７次，在medium里的half
: life只有24小时；　那岂不是天天都要加新的？　请问你们是怎么用的？--- final
: concentration? frequencing of adding to medium? storage condition？
: 谢谢！