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请教大家买来的细胞CHO复苏问题

请教大家买来的细胞CHO复苏问题# Biology - 生物学

d*82011-11-16 08:11

1 楼

对自己复苏细胞的步骤不放心，昨天来的细胞，先复苏了对照细胞系，今天还没有贴壁
。就想把实验用的细胞系暂时先在干冰和－70冰箱里保存两三天，然后根据对照细胞系再复苏。
不知道在－70度里能不能保存两三天？另外，必须离心，取出冻存液，还是直接加入培
养基也行？谢谢

k*n2011-11-16 08:11

2 楼

买来的细胞会附带说明书，照着说明书做就好了。别自己另外创新办法，给自己找麻烦
。一般照着说明书不会出问题的，出了问题找公司就好了。
其他的问题，如果你是用自己制备的冷冻细胞的话，在－80c放一两年没关系，再长了
就复苏率下降了。一般可以先快速解冻，加入培养基；或者解冻后离心，去掉溶液，再
加入新的培养基。都可以。取决于细胞系是否娇嫩。

j*x2011-11-16 08:11

3 楼

个人的经验，我手头的大部分普通细胞系（Hela，293/FT，BHK，HepG2，Huh7，vero，
CHO...）在-80度存半年以上，复苏效果会大大的打折扣，超过1年的，基本就惨不忍睹了

【在 k***n 的大作中提到】

: 买来的细胞会附带说明书，照着说明书做就好了。别自己另外创新办法，给自己找麻烦
: 。一般照着说明书不会出问题的，出了问题找公司就好了。
: 其他的问题，如果你是用自己制备的冷冻细胞的话，在－80c放一两年没关系，再长了
: 就复苏率下降了。一般可以先快速解冻，加入培养基；或者解冻后离心，去掉溶液，再
: 加入新的培养基。都可以。取决于细胞系是否娇嫩。