b*8
2 楼
最近一直在追《芈月传》。其实想来,芈月的一生,是一步步被现实逼出来的。她从开
始的单纯的女孩,变成了后来的太后,实在是让人不可思议,但大家从该剧中可以知道
,这并不是她自己所想的,而是被现实逼迫成最后的样子的。
谁不希望自己永远做个天真的孩子?谁愿意天天如针毡般坐在宣室殿上?我们都曾是那
个天真的芈月,最后几人成为了后来的她呢?芈月其实并不想成为太后,但现实让她带
着孩子走到了这一步。生活的改变,让一个女人知道了自己想要什么,芈月想要的就是
自己和儿子能活着,你说,知道自己想要什么的女人是不是很可怕?
同样做为女人,或者说你身边的女人,有没有目标?知不知道自己到底想要的是什么?
开始的时候我们总是天真的认为,自己想要的就应该得到,那是父母给我们的。真实我
们的力量太小,所以不可能事事都达到目标,就像芈月想与黄歇在一起,即使定下了私
奔的目标,但的能力太小也无法实现。而现在的你呢?经历了什么叫世事炎凉,是否知
道了自己想要的是什么了?
我们为什么会变得成熟?为什么会变得成现在的白骨精?这就是现实把我们改变。在芈
月身上让我知道自己想要什么的女人真的很可怕。版上的兄弟姐妹们,有同感吗?也来
论论你对芈月成长的感悟吧。
始的单纯的女孩,变成了后来的太后,实在是让人不可思议,但大家从该剧中可以知道
,这并不是她自己所想的,而是被现实逼迫成最后的样子的。
谁不希望自己永远做个天真的孩子?谁愿意天天如针毡般坐在宣室殿上?我们都曾是那
个天真的芈月,最后几人成为了后来的她呢?芈月其实并不想成为太后,但现实让她带
着孩子走到了这一步。生活的改变,让一个女人知道了自己想要什么,芈月想要的就是
自己和儿子能活着,你说,知道自己想要什么的女人是不是很可怕?
同样做为女人,或者说你身边的女人,有没有目标?知不知道自己到底想要的是什么?
开始的时候我们总是天真的认为,自己想要的就应该得到,那是父母给我们的。真实我
们的力量太小,所以不可能事事都达到目标,就像芈月想与黄歇在一起,即使定下了私
奔的目标,但的能力太小也无法实现。而现在的你呢?经历了什么叫世事炎凉,是否知
道了自己想要的是什么了?
我们为什么会变得成熟?为什么会变得成现在的白骨精?这就是现实把我们改变。在芈
月身上让我知道自己想要什么的女人真的很可怕。版上的兄弟姐妹们,有同感吗?也来
论论你对芈月成长的感悟吧。
m*n
3 楼
我的ipad 1可以待机1个月(wifi on),可是LD的iphone 4s只能待机4天。
差别为什么会这么大呢?
差别为什么会这么大呢?
w*r
4 楼
Cell经某drug treatment,跑SDS gel 发现目标蛋白shift到比原来小几个KD的位置。
现怀疑是此蛋白的phosphorylation或者glycosylation受到影响,所以想确定到底是哪
个过程被阻断。我想用phosphatase或者deglycosylation kit处理lysate,然后看是否
能重现shifted band。可是有可能dephosphorylation和deglycosylation都能得到与
drug处理后分子量类似的条带。有没有什么简单直接的方法能鉴定这个shift的条带?
希望板友们提供一些好的建议,万分感谢。
现怀疑是此蛋白的phosphorylation或者glycosylation受到影响,所以想确定到底是哪
个过程被阻断。我想用phosphatase或者deglycosylation kit处理lysate,然后看是否
能重现shifted band。可是有可能dephosphorylation和deglycosylation都能得到与
drug处理后分子量类似的条带。有没有什么简单直接的方法能鉴定这个shift的条带?
希望板友们提供一些好的建议,万分感谢。
s*3
6 楼
4S能待机四天牛大发了
b*y
7 楼
"用phosphatase或者deglycosylation kit处理lysate" is an easy method already.
W*7
9 楼
我觉得这个远没有你想像的“dephosphorylation和deglycosylation”那么简单,很多
修饰,或者构想改变都能引起shift。尤其你说有几个kD那么大的shift如果是
dephosphorylation的话这需要好多位点才能做到吧。
修饰,或者构想改变都能引起shift。尤其你说有几个kD那么大的shift如果是
dephosphorylation的话这需要好多位点才能做到吧。
W*7
11 楼
不过还是那句话,想做就得试,永远都没有简单的东西。。。
y*8
13 楼
IP first. The pan-phospho or glyco WB. Phosphatase and deglyco as controls.
Mass Spec would be the ultimate.
Mass Spec would be the ultimate.
b*y
15 楼
Phosphorylation causes protein running higher is not because of the extra
mass but because of the extra charge. It is common that one or two
phosphorylation sites can cause noticeable upper shift.
mass but because of the extra charge. It is common that one or two
phosphorylation sites can cause noticeable upper shift.
s*s
17 楼
做了再说。
btw, phos比较容易,glyco的东西很烦的。是多加了还是减少了,多位点
糖基化,都很复杂。想鉴定的看运气了
【在 w*******r 的大作中提到】
: Cell经某drug treatment,跑SDS gel 发现目标蛋白shift到比原来小几个KD的位置。
: 现怀疑是此蛋白的phosphorylation或者glycosylation受到影响,所以想确定到底是哪
: 个过程被阻断。我想用phosphatase或者deglycosylation kit处理lysate,然后看是否
: 能重现shifted band。可是有可能dephosphorylation和deglycosylation都能得到与
: drug处理后分子量类似的条带。有没有什么简单直接的方法能鉴定这个shift的条带?
: 希望板友们提供一些好的建议,万分感谢。
btw, phos比较容易,glyco的东西很烦的。是多加了还是减少了,多位点
糖基化,都很复杂。想鉴定的看运气了
【在 w*******r 的大作中提到】
: Cell经某drug treatment,跑SDS gel 发现目标蛋白shift到比原来小几个KD的位置。
: 现怀疑是此蛋白的phosphorylation或者glycosylation受到影响,所以想确定到底是哪
: 个过程被阻断。我想用phosphatase或者deglycosylation kit处理lysate,然后看是否
: 能重现shifted band。可是有可能dephosphorylation和deglycosylation都能得到与
: drug处理后分子量类似的条带。有没有什么简单直接的方法能鉴定这个shift的条带?
: 希望板友们提供一些好的建议,万分感谢。
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