学术贴:关于microarray analysis样品,统计意义和实际上,哪种方法更好?# Biology - 生物学g*02012-01-05 08:011 楼实际情况是:我有6个样品(每组),可是只能送3个样品(每组)去做microarray。 是两两合并,6个合并成3个呢?还是随机选3个?所有的样品都已经预检测过,都没问题。
s*s2012-01-05 08:012 楼没做过array,就瞎说。统计上当然合并了好,实际上还是随便挑三个吧,否则MM里面还要墨迹半天【在 g****0 的大作中提到】: 实际情况是:: 我有6个样品(每组),可是只能送3个样品(每组)去做microarray。 是两两合并,6个: 合并成3个呢?还是随机选3个?: 所有的样品都已经预检测过,都没问题。
T*t2012-01-05 08:013 楼如果做mechanism 最好不要合并,用individual sample做,可以random选三个样本,这样发文章比较好;如果做biomarker research,可以合并。如果合并了,不管是合并两个也好,三个也好,都是pooled sample,没有区别【在 g****0 的大作中提到】: 实际情况是:: 我有6个样品(每组),可是只能送3个样品(每组)去做microarray。 是两两合并,6个: 合并成3个呢?还是随机选3个?: 所有的样品都已经预检测过,都没问题。
g*02012-01-05 08:014 楼请问为什么统计上合并会好?因为降低了variation吗?MM是什么?【在 s******s 的大作中提到】: 没做过array,就瞎说。统计上当然合并了好,实际上还是随便挑三个吧,: 否则MM里面还要墨迹半天
g*02012-01-05 08:015 楼是想找mechanism。 为什么用individual samples好?为什么对发文章好?因为好做统计吗?【在 T**********t 的大作中提到】: 如果做mechanism 最好不要合并,用individual sample做,可以random选三个样本,: 这样发文章比较好;如果做biomarker research,可以合并。: 如果合并了,不管是合并两个也好,三个也好,都是pooled sample,没有区别
T*t2012-01-05 08:016 楼如果是几个individual在一组,那么它们就是biological replicates生物之间存在biological variation(个体差异)如果你pool了,就看不到这样的差异这个问题你应该弄明白设计的实验的时候 应该有biological replicates和technique replicates【在 g****0 的大作中提到】: 是想找mechanism。 为什么用individual samples好?为什么对发文章好?因为好做统: 计吗?
K*42012-01-05 08:017 楼随机各选3个不要混合,不要忘记了要留些RNA作 realtime PCR. 这样就是 6 control,6 treatment。刚刚够吧。【在 g****0 的大作中提到】: 实际情况是:: 我有6个样品(每组),可是只能送3个样品(每组)去做microarray。 是两两合并,6个: 合并成3个呢?还是随机选3个?: 所有的样品都已经预检测过,都没问题。
c*g2012-01-05 08:018 楼没错。microarray技术已经很成熟了,technical variation都很小。如果你只能做三个,两两pool是最好的。这样也是biological replicates,只要pool和pool之间没有相同的个体。【在 g****0 的大作中提到】: 请问为什么统计上合并会好?因为降低了variation吗?: MM是什么?
g*02012-01-05 08:019 楼谢谢提醒,这些RNA样品是用realtime pcr检验过的(已知下游),所以已经留了cDNA了。【在 K**4 的大作中提到】: 随机各选3个: 不要混合,: 不要忘记了要留些RNA作 realtime PCR. 这样就是 6 control,6 treatment。刚刚够: 吧。
g*02012-01-05 08:0110 楼是的,我不打算作technical duplicates。【在 c*****g 的大作中提到】: 没错。: microarray技术已经很成熟了,technical variation都很小。如果你只能做三个,两: 两pool是最好的。这样也是biological replicates,只要pool和pool之间没有相同的: 个体。
c*g2012-01-05 08:0111 楼你听我的,两两pool。我可以肯定的说统计上,这个是比随机选三个更好的设计,你的统计power要大不少。原因就是你讲的,variation减小了。【在 g****0 的大作中提到】: 是的,我不打算作technical duplicates。
g*02012-01-05 08:0113 楼能否展开说说RNAseq?好在哪里?有推荐的公司吗?测6个样品(3X2组),要花多少钱?我听说不同的样品之间定量不好,是吗?【在 d***y 的大作中提到】: microarray sucks.用RNAseq吧