急问 两个关于荧光显微镜的问题，在线急等(三个包子)# Biology - 生物学
y*1
1 楼
看版上有人提过,是不是给那些FREIGHT FORWARDER 用的.
有点象BROKER'S LICENSE 吗? 我也做EXPORT,但是好象没有人提什么要LICENSE.
有点象BROKER'S LICENSE 吗? 我也做EXPORT,但是好象没有人提什么要LICENSE.
y*u
2 楼
向清蒸鲫鱼前进！
h*u
3 楼
刷的番茄1.28,今天用手机连地沟神由每30分钟掉一次线，用laptop还好，不过看传输
速度在10~54M之间不断变化，感觉还没有老的wrt54gl稳定。
如果不能改善只好上神由试试。
速度在10~54M之间不断变化，感觉还没有老的wrt54gl稳定。
如果不能改善只好上神由试试。
m*5
4 楼
1， 用imagin J设置scale bar for Zeiss observer.A1的各项参数在哪里找？ 很多牌
子的scale bar设置需要的参数在网上都能找到，就Zeiss的找不到
2，小弟用的红色荧光reporter是DsRed，在red channel下看很specific,形态很好，但
问题是在 blue和green channel下看也很明显。
后来问了管理员说这台显微镜的filter 就是不太行，听起来很安慰，但还是很难被
convince，想请教一下这个情况正常么？ (这个DsRed是knock-in到一个endogenous 启
动子下面的所以是弱信号，要不也不会这么纠结了)
子的scale bar设置需要的参数在网上都能找到，就Zeiss的找不到
2，小弟用的红色荧光reporter是DsRed，在red channel下看很specific,形态很好，但
问题是在 blue和green channel下看也很明显。
后来问了管理员说这台显微镜的filter 就是不太行，听起来很安慰，但还是很难被
convince，想请教一下这个情况正常么？ (这个DsRed是knock-in到一个endogenous 启
动子下面的所以是弱信号，要不也不会这么纠结了)
m*n
5 楼
涉及限制出口技术的敏感专业、敏感职位
【在 y**1 的大作中提到】
: 看版上有人提过,是不是给那些FREIGHT FORWARDER 用的.
: 有点象BROKER'S LICENSE 吗? 我也做EXPORT,但是好象没有人提什么要LICENSE.
P*o
6 楼
cong~
吃。。。
【在 y*********u 的大作中提到】
: 向清蒸鲫鱼前进！
吃。。。
【在 y*********u 的大作中提到】
: 向清蒸鲫鱼前进！
G*h
7 楼
偶就发现掉过一次线
以前那个 WL520U 一次都没掉过，真稳定
【在 h*******u 的大作中提到】
: 刷的番茄1.28,今天用手机连地沟神由每30分钟掉一次线，用laptop还好，不过看传输
: 速度在10~54M之间不断变化，感觉还没有老的wrt54gl稳定。
: 如果不能改善只好上神由试试。
以前那个 WL520U 一次都没掉过，真稳定
【在 h*******u 的大作中提到】
: 刷的番茄1.28,今天用手机连地沟神由每30分钟掉一次线，用laptop还好，不过看传输
: 速度在10~54M之间不断变化，感觉还没有老的wrt54gl稳定。
: 如果不能改善只好上神由试试。
m*5
8 楼
急问啊………………………………………………
Y*H
9 楼
酱油打起来
l*l
10 楼
e3000也就贵20刀，稳如泰山，折腾这垃圾干吗阿
a*x
11 楼
第一个问题，可以用ZEN或者LSM读原始数据加Scale bar。如果用其他软件，根据像素
数目和显微镜参数也可以做。
第二个问题，怀疑光路设置有问题。比如选反射镜的时候可以控制反射的波长范围的，
可以降低在其他channel的信号。和pinhole及gain的设置也有关系。
数目和显微镜参数也可以做。
第二个问题，怀疑光路设置有问题。比如选反射镜的时候可以控制反射的波长范围的，
可以降低在其他channel的信号。和pinhole及gain的设置也有关系。
y*u
12 楼
好吧，１０个小包，PETS ID ONLY
h*w
13 楼
哪里40块的e3000?
【在 l********l 的大作中提到】
: e3000也就贵20刀，稳如泰山，折腾这垃圾干吗阿
【在 l********l 的大作中提到】
: e3000也就贵20刀，稳如泰山，折腾这垃圾干吗阿
m*5
14 楼
第一个问题，因为显微镜不是自己的，所以要等周一上班才能回去调，这周末要烦死了
第二个问题同样，我也怀疑什么设置出问题了，但又无权改。 别人看高表达信号强得
要命也不存在这个问题。 从表达pattern上来看make sense，但有一点不确定性也是很
难受的。 因为是knock-in工具，花了很长时间…… 也考虑过会不会是auto flurecent
，不过反而可能性不大，因为大多数auto flurecent都只在比较狭窄的channel.
包子稍后送上！
【在 a*****x 的大作中提到】
: 第一个问题，可以用ZEN或者LSM读原始数据加Scale bar。如果用其他软件，根据像素
: 数目和显微镜参数也可以做。
: 第二个问题，怀疑光路设置有问题。比如选反射镜的时候可以控制反射的波长范围的，
: 可以降低在其他channel的信号。和pinhole及gain的设置也有关系。
第二个问题同样，我也怀疑什么设置出问题了，但又无权改。 别人看高表达信号强得
要命也不存在这个问题。 从表达pattern上来看make sense，但有一点不确定性也是很
难受的。 因为是knock-in工具，花了很长时间…… 也考虑过会不会是auto flurecent
，不过反而可能性不大，因为大多数auto flurecent都只在比较狭窄的channel.
包子稍后送上！
【在 a*****x 的大作中提到】
: 第一个问题，可以用ZEN或者LSM读原始数据加Scale bar。如果用其他软件，根据像素
: 数目和显微镜参数也可以做。
: 第二个问题，怀疑光路设置有问题。比如选反射镜的时候可以控制反射的波长范围的，
: 可以降低在其他channel的信号。和pinhole及gain的设置也有关系。
y*u
15 楼
俺下班回家乐，怕拉帮忙发一下吧
N*d
16 楼
版内有托无疑啊
进货的需谨慎了
进货的需谨慎了
m*5
17 楼
再顶上去问问………………
P*o
18 楼
okie~
【在 y*********u 的大作中提到】
: 俺下班回家乐，怕拉帮忙发一下吧
【在 y*********u 的大作中提到】
: 俺下班回家乐，怕拉帮忙发一下吧
G*h
19 楼
这么几块钱的东西，托个鸟啊
【在 N**********d 的大作中提到】
: 版内有托无疑啊
: 进货的需谨慎了
【在 N**********d 的大作中提到】
: 版内有托无疑啊
: 进货的需谨慎了
m*5
20 楼
baozi sent!
【在 a*****x 的大作中提到】
: 第一个问题，可以用ZEN或者LSM读原始数据加Scale bar。如果用其他软件，根据像素
: 数目和显微镜参数也可以做。
: 第二个问题，怀疑光路设置有问题。比如选反射镜的时候可以控制反射的波长范围的，
: 可以降低在其他channel的信号。和pinhole及gain的设置也有关系。
【在 a*****x 的大作中提到】
: 第一个问题，可以用ZEN或者LSM读原始数据加Scale bar。如果用其他软件，根据像素
: 数目和显微镜参数也可以做。
: 第二个问题，怀疑光路设置有问题。比如选反射镜的时候可以控制反射的波长范围的，
: 可以降低在其他channel的信号。和pinhole及gain的设置也有关系。
w*u
21 楼
我吃
s*c
22 楼
re
【在 l********l 的大作中提到】
: e3000也就贵20刀，稳如泰山，折腾这垃圾干吗阿
【在 l********l 的大作中提到】
: e3000也就贵20刀，稳如泰山，折腾这垃圾干吗阿
f*e
23 楼
DsRed 的 spectra 看上去 excitation 的确很 broad, 具体取决于你用的显微镜的
blue 和 green 的波段定义，但 DsRed 在一般蓝光绿光 490nm, 515nm 的地方都有不
是太弱的激发，是最大的 40% 和 70%，信号强的话完全可以引起足够观察到的信号。
然后你们那里的荧光显微镜 emission filter 可能用的是 long pass filter, 就是说
，只要 emission 比允许的 wavelength 更长就都能通过。通俗的说就是 DsRed 的红
光 emission 可以通过为了蓝光或者绿光设立的 emission filter (如果是 long pass
而不是 band pass 的话），从而被检测到。如果不是有多个 color 看 correlation
的话，问题不大。
blue 和 green 的波段定义，但 DsRed 在一般蓝光绿光 490nm, 515nm 的地方都有不
是太弱的激发，是最大的 40% 和 70%，信号强的话完全可以引起足够观察到的信号。
然后你们那里的荧光显微镜 emission filter 可能用的是 long pass filter, 就是说
，只要 emission 比允许的 wavelength 更长就都能通过。通俗的说就是 DsRed 的红
光 emission 可以通过为了蓝光或者绿光设立的 emission filter (如果是 long pass
而不是 band pass 的话），从而被检测到。如果不是有多个 color 看 correlation
的话，问题不大。
i*p
24 楼
吃
N*d
25 楼
又没说你，你猴急啥
【在 G*****h 的大作中提到】
: 这么几块钱的东西，托个鸟啊
【在 G*****h 的大作中提到】
: 这么几块钱的东西，托个鸟啊
x*u
26 楼
借宝地搭车问问:
荧光显微镜看GFP标记细胞.转到白光后,显微镜里看到的细胞也是白色背景;但是拍出的
照片,背景却是绿色的,哪位高手能给个高招?
显微镜:Nikon TE200 inverted microscope
光源:白光
拍照软件:snapshot
谢谢啦!
荧光显微镜看GFP标记细胞.转到白光后,显微镜里看到的细胞也是白色背景;但是拍出的
照片,背景却是绿色的,哪位高手能给个高招?
显微镜:Nikon TE200 inverted microscope
光源:白光
拍照软件:snapshot
谢谢啦!
m*h
27 楼
chi ~~~
w*8
28 楼
求40 e3000的丢
f*e
29 楼
通常显微镜的 camera 是没有 color discrimination 的，只有 gray level。照片出
来的颜色通常都是软件后期处理加上的 pseudo color，理论上 user 设置什么颜色，
就会出什么颜色。
【在 x****u 的大作中提到】
: 借宝地搭车问问:
: 荧光显微镜看GFP标记细胞.转到白光后,显微镜里看到的细胞也是白色背景;但是拍出的
: 照片,背景却是绿色的,哪位高手能给个高招?
: 显微镜:Nikon TE200 inverted microscope
: 光源:白光
: 拍照软件:snapshot
: 谢谢啦!
来的颜色通常都是软件后期处理加上的 pseudo color，理论上 user 设置什么颜色，
就会出什么颜色。
【在 x****u 的大作中提到】
: 借宝地搭车问问:
: 荧光显微镜看GFP标记细胞.转到白光后,显微镜里看到的细胞也是白色背景;但是拍出的
: 照片,背景却是绿色的,哪位高手能给个高招?
: 显微镜:Nikon TE200 inverted microscope
: 光源:白光
: 拍照软件:snapshot
: 谢谢啦!
m*h
30 楼
酱爆排骨对chili妈来说啥意思?
【在 P******o 的大作中提到】
: cong~
: 吃。。。
e*i
31 楼
bundle it with a time machine and a newegg 10/50 coupon.
bingo! You got a refurbished e3000!
【在 w**********8 的大作中提到】
: 求40 e3000的丢
bingo! You got a refurbished e3000!
【在 w**********8 的大作中提到】
: 求40 e3000的丢
x*u
32 楼
谢谢啦
【在 f*******e 的大作中提到】
: 通常显微镜的 camera 是没有 color discrimination 的，只有 gray level。照片出
: 来的颜色通常都是软件后期处理加上的 pseudo color，理论上 user 设置什么颜色，
: 就会出什么颜色。
【在 f*******e 的大作中提到】
: 通常显微镜的 camera 是没有 color discrimination 的，只有 gray level。照片出
: 来的颜色通常都是软件后期处理加上的 pseudo color，理论上 user 设置什么颜色，
: 就会出什么颜色。
b*y
33 楼
排包子
s*e
34 楼
从前用dsRed也碰到过类似问题，当时还兴冲冲的以为co－localization就此做成……
好像现在Tsien实验室已经不建议大家用这个荧光蛋白了，有可能的话换成mCherry？
好像现在Tsien实验室已经不建议大家用这个荧光蛋白了，有可能的话换成mCherry？
l*n
35 楼
Pai
a*x
36 楼
dsRed 是那个647nm激发的dye吗？我用的没有问题啊。。。
【在 s******e 的大作中提到】
: 从前用dsRed也碰到过类似问题，当时还兴冲冲的以为co－localization就此做成……
: 好像现在Tsien实验室已经不建议大家用这个荧光蛋白了，有可能的话换成mCherry？
【在 s******e 的大作中提到】
: 从前用dsRed也碰到过类似问题，当时还兴冲冲的以为co－localization就此做成……
: 好像现在Tsien实验室已经不建议大家用这个荧光蛋白了，有可能的话换成mCherry？
D*y
37 楼
吃包子：）
m*5
38 楼
………………
【在 a*****x 的大作中提到】
: dsRed 是那个647nm激发的dye吗？我用的没有问题啊。。。
【在 a*****x 的大作中提到】
: dsRed 是那个647nm激发的dye吗？我用的没有问题啊。。。
f*4
39 楼
吃包子！
m*5
40 楼
顶上去继续收集DsREd 的reputation
另外，有人用过DsRed expression2这个东西么？》
另外，有人用过DsRed expression2这个东西么？》
y*l
41 楼
re
P*o
42 楼
last baozi
【在 y*******l 的大作中提到】
: re
【在 y*******l 的大作中提到】
: re
c*a
43 楼
a...too late....for baozi....55555
y*l
44 楼
赞速度！！
刚re完就收到包 ：）谢谢~~
【在 P******o 的大作中提到】
: last baozi
刚re完就收到包 ：）谢谢~~
【在 P******o 的大作中提到】
: last baozi
t*u
45 楼
吃排骨
m*j
46 楼
what is 酱爆排骨 and 清蒸鲫鱼?
【在 y*********u 的大作中提到】
: 向清蒸鲫鱼前进！
【在 y*********u 的大作中提到】
: 向清蒸鲫鱼前进！
x*u
47 楼
包子?
w*y
48 楼
co-ask
【在 m***j 的大作中提到】
: what is 酱爆排骨 and 清蒸鲫鱼?
【在 m***j 的大作中提到】
: what is 酱爆排骨 and 清蒸鲫鱼?
o*l
49 楼
小菜两碟
向清蒸鲫鱼前进！
【在 y*********u 的大作中提到】
: 向清蒸鲫鱼前进！
向清蒸鲫鱼前进！
【在 y*********u 的大作中提到】
: 向清蒸鲫鱼前进！
o*l
50 楼
啊，难道不是吃的那个？
【在 m****h 的大作中提到】
:
: 酱爆排骨对chili妈来说啥意思?
【在 m****h 的大作中提到】
:
: 酱爆排骨对chili妈来说啥意思?
B*t
51 楼
这个题目啥意思？
怎么样才能成为酱爆排骨呢？
怎么样才能成为酱爆排骨呢？
P*o
52 楼
经验值：[5026](酱爆排骨)
【在 B****t 的大作中提到】
: 这个题目啥意思？
: 怎么样才能成为酱爆排骨呢？
【在 B****t 的大作中提到】
: 这个题目啥意思？
: 怎么样才能成为酱爆排骨呢？
B*t
53 楼
汗！
我以为辣妈晚饭吃酱爆排骨
正想着晚饭做啥呢
【在 P******o 的大作中提到】
: 经验值：[5026](酱爆排骨)
我以为辣妈晚饭吃酱爆排骨
正想着晚饭做啥呢
【在 P******o 的大作中提到】
: 经验值：[5026](酱爆排骨)
c*a
54 楼
怎么我4000多经验值叫“本站元老”
5000多才“酱爆排骨”啊？
5000多才“酱爆排骨”啊？
B*t
55 楼
[5518](开国大老)
看来我们不是那个菜系的
【在 c*****a 的大作中提到】
: 怎么我4000多经验值叫“本站元老”
: 5000多才“酱爆排骨”啊？
看来我们不是那个菜系的
【在 c*****a 的大作中提到】
: 怎么我4000多经验值叫“本站元老”
: 5000多才“酱爆排骨”啊？
P*o
56 楼
家页=》个人信息设置=》灌水流派
【在 c*****a 的大作中提到】
: 怎么我4000多经验值叫“本站元老”
: 5000多才“酱爆排骨”啊？
【在 c*****a 的大作中提到】
: 怎么我4000多经验值叫“本站元老”
: 5000多才“酱爆排骨”啊？
m*h
57 楼
............
D*r
58 楼
是中间围着个bagels的酱报排骨吗？哈哈哈哈，我吃中间的bagels,你们吃肉, 然后辣
椒妈就真排骨拉
【在 y*********u 的大作中提到】
: 向清蒸鲫鱼前进！
椒妈就真排骨拉
【在 y*********u 的大作中提到】
: 向清蒸鲫鱼前进！
Q*A
59 楼
还有包子么？上一个吧！
俄不要酱爆排骨
俄不要酱爆排骨
c*a
60 楼
啊，竟然还有这么ｃｕｔｅ的小细节
老邢的体贴真是感动人心啊
【在 P******o 的大作中提到】
: 家页=》个人信息设置=》灌水流派
老邢的体贴真是感动人心啊
【在 P******o 的大作中提到】
: 家页=》个人信息设置=》灌水流派
h*r
61 楼
我是豆浆油条，是我爱吃的早点，可惜这边吃不到了。。。。。。
c*a
62 楼
刚发现，这个食神系列是级别最多的流派
而且，最高级别是青菜豆腐。。。
而且，最高级别是青菜豆腐。。。
m*j
63 楼
才刚刚鱼香肉丝，
看来还要继续努力呀
看来还要继续努力呀
o*l
64 楼
我去看看我现在是什么。。。
【在 m***j 的大作中提到】
: 才刚刚鱼香肉丝，
: 看来还要继续努力呀
【在 m***j 的大作中提到】
: 才刚刚鱼香肉丝，
: 看来还要继续努力呀
a*o
65 楼
你也排骨啦
我还醋溜土豆呢
【在 B****t 的大作中提到】
: 这个题目啥意思？
: 怎么样才能成为酱爆排骨呢？
我还醋溜土豆呢
【在 B****t 的大作中提到】
: 这个题目啥意思？
: 怎么样才能成为酱爆排骨呢？
t*u
66 楼
哇哈哈
清蒸基于！
清蒸基于！
w*y
67 楼
I'll check mine
w*y
68 楼
经验值： [15442](清蒸鲫鱼)
c*a
69 楼
我才鱼香肉丝.....
a*r
70 楼
经验值： [6588](龙行天下)
hahaha
hahaha
y*u
71 楼
这也就是一个排骨的水平
【在 a**r 的大作中提到】
: 经验值： [6588](龙行天下)
: hahaha
【在 a**r 的大作中提到】
: 经验值： [6588](龙行天下)
: hahaha
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