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请问纯化蛋白complex

请问纯化蛋白complex# Biology - 生物学

a*02012-10-26 07:10

1 楼

楼主国内硕博，明年七月毕业，老板是博士生导师，博士在英国读的，人脉很广，认识
很多人，最近，认识的一个老师给老板发了个邮件，如下
“have you seen this?
do you have any post docs who may be suitable and would want to come to UK?
I'm happy to help out and provide a local base at Aston for sample prep and
general assistance。”
说的是一个UK的基金，可以申请2年的博后。
然后老板跟我说了，并抄送了一份给那个老师。
“Would you be interested in this opportunity? You have experiences in NMR
and neutron scattering, ISIS or Diamond light source might be a good place.
If you are interested in, Dr. Richard Martin (here I am copying this to him)
might help you sort out the application procedure. Please note, the
deadline is 31 Oct this year.”
基金：http://www.stfc.ac.uk/funding/fellowships/rutherford-international-fellowship-programme/
我表示可以试试，老板让我自己跟他联系，第一次申请这个事情，不知道该怎么跟那个
老师联系，措辞啥的一律不懂，要准备些啥材料啊，急求大神指点啊！！

b*e2012-10-26 07:10

2 楼

offer里面说2天之内，现在第三天了，需不需要问下hr？
谢谢～

s*g2012-10-26 07:10

3 楼

屏幕15'以上，
主要用途上网，看文档，等，不打游戏，但要run matlab。不要mac。
那款性价比高？小弟很久没有follow动向了。

C*42012-10-26 07:10

4 楼

传统的complex纯化，不应该是加了tag的蛋白，很strigent的条件(500 mM NaCl etc)
拉下来，在银染上看到带，才切下来去打，然后一系列实验，比如gel filtration，体
外重组蛋白重组这个complex等, 验证了，才敢说是complex吗。
现在很多文章所谓的纯化蛋白 complex，都是不需要看到清晰的条带，直接把elution
全部去打质谱（或者在切整个胶），看到三四十个蛋白，随便找几个自己想要的，就说
是interaction。
不知道哪个可信啊。

M*l2012-10-26 07:10

5 楼

ISIS亮了。。。

l*o2012-10-26 07:10

6 楼

恭喜lz，能给点电面面经么

p*n2012-10-26 07:10

7 楼

thinkpad T530?

k*02012-10-26 07:10

8 楼

自己相信了，评委相信了，就是complex。

b*e2012-10-26 07:10

9 楼

其实以前看了版上的面试题，我都不好意思发我的
我是phys+stat MS，所以基本没问什么cs的东西
电面问了 C++ virtual function的意义和用法，什么时候调用这个函数啊之类的
然后问了 data structure里面linked list, 和array排序之类的比较，然后说说几种
函数的O(n)运行时间，具体不记得了。
再就是一道brainteaser，问任意面值的话，如何用最少量货币pay landlord $1/day
一个月。
好像其他就是问research做了些啥
面试的话就更加没有任何编程的，全是智力题＋金融知识 (我考了2级cfa)
53张扑克，里面有一张joker，一张张拿取直到遇到joker为止，问拿到4张A概率
前3个0－9的数字（可重复）和后3个0－9的数字和相等的概率
把12个时针分针重合的时间求出来
小虫爬绳子的问题，据说是要用到PDE，我自己没听明白，面试的人就说算了
金融问得很泛泛
bond, security, stock之类的东西
bond yield curve的变化原因
为什么要IPO, stock的pricing
stock split的motivation
什么是tick up之类的
反正金融的问了7，8个问题，也不太记得清楚了
总之没有太为难我，如果真的coding也许会犯不少错误

【在 l*******o 的大作中提到】

: 恭喜lz，能给点电面面经么

h*g2012-10-26 07:10

10 楼

w530/t530，处理器要好点.

k*02012-10-26 07:10

11 楼

蛋白质相互作用，有强弱之分。
如果鉴定protein complex，正如您所说，用各种色谱或非变性电泳分离纯化到单峰或
单条带，不能再分离。protein complex是蛋白质作用较强而结构稳定的复合体。
很多蛋白，相互间有一定的作用，但没有稳定到形成复合体的程度。

a*y2012-10-26 07:10

12 楼

问问吧，hr挺好的。我等了一个礼拜呢。hr当时不知道是休假还是出差了。。。

【在 b******e 的大作中提到】

: offer里面说2天之内，现在第三天了，需不需要问下hr？
: 谢谢～

e*s2012-10-26 07:10

13 楼

你所谓的传统方法只能检测非常强的相互作用。
蛋白作用的方式很不同，比如你用500 mM Nacl，那么弱的电荷作用就容易被破坏，而
疏水作用就会被增强，更容易被检测到。
关键是对照。不管相互作用强弱，阴性、阳性对照最重要。而且最好通过2种以上不同
的方法验证。

)
elution

【在 C********4 的大作中提到】

: 传统的complex纯化，不应该是加了tag的蛋白，很strigent的条件(500 mM NaCl etc)
: 拉下来，在银染上看到带，才切下来去打，然后一系列实验，比如gel filtration，体
: 外重组蛋白重组这个complex等, 验证了，才敢说是complex吗。
: 现在很多文章所谓的纯化蛋白 complex，都是不需要看到清晰的条带，直接把elution
: 全部去打质谱（或者在切整个胶），看到三四十个蛋白，随便找几个自己想要的，就说
: 是interaction。
: 不知道哪个可信啊。

s*n2012-10-26 07:10

14 楼

gx,签了offer再发background check？

g*y2012-10-26 07:10

15 楼

我就是这么干的，把elution全部打质谱
找在wt存在的，在deletion mutant缺失的蛋白的
不过后面又用其它方法验证了

)
elution

【在 C********4 的大作中提到】

u*d2012-10-26 07:10

16 楼

re
稳定的complex的鉴定很重要，一些动态的相互作用也很重要。至于文章上面的文字表
述，擦亮眼睛即可。

【在 e****s 的大作中提到】

: 你所谓的传统方法只能检测非常强的相互作用。
: 蛋白作用的方式很不同，比如你用500 mM Nacl，那么弱的电荷作用就容易被破坏，而
: 疏水作用就会被增强，更容易被检测到。
: 关键是对照。不管相互作用强弱，阴性、阳性对照最重要。而且最好通过2种以上不同
: 的方法验证。
:
: )
: elution