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怎么把组织的GFP荧光去掉做staining？

怎么把组织的GFP荧光去掉做staining？# Biology - 生物学

a*y2012-11-06 08:11

1 楼

【以下文字转载自 WaterWorld 讨论区】
发信人: flyingplate (马甲睡衣外套拖鞋), 信区: WaterWorld
标题: 年轻漂亮女人上床一次收费多少
发信站: BBS 未名空间站 (Tue Sep 21 12:15:27 2010, 美东)
前面那个坑里面老兄有点耿耿于怀，因为老婆年轻的时候40块钱被上一次。结婚的时候
却管他要房要婚
礼。可能是觉得有价格歧视，虽然很多博物馆给学生和老人也都半价/免费的。
如果那个老婆年轻的时候，每次收费高一点，估计他就不会这么介意了。
假设置办房子，婚礼，加起来120万-150万。
30岁结婚，50岁包二奶。
中国经济发展速度每年平均8%（可能有出入。）
20年中夫妻生活平均每周一次。
那么每次收费标准应该是3000元，这样正好值得房子婚礼的价值总和。
所以年轻漂亮女人婚前上床每次收费应该不得少于3000元。
用excel的算法：
=PV(0.0016,1000,3000)

b*n2012-11-06 08:11

2 楼

组织中有RFP和GFP，如果要染色就只有选蓝光了，而蓝光很弱，另外如果要做co-
staining就没得选择了。
有没有办法把RFP和GFP的荧光彻底bleach掉，但是不影响后续的staining？
谁给个详尽的protocol，有包子。

a*y2012-11-06 08:11

3 楼

大家来帮忙看看，这样算法对不对?

v*e2012-11-06 08:11

4 楼

搭车问一下，什么公司的GFP抗体可以做免疫组化

【在 b*****n 的大作中提到】

: 组织中有RFP和GFP，如果要染色就只有选蓝光了，而蓝光很弱，另外如果要做co-
: staining就没得选择了。
: 有没有办法把RFP和GFP的荧光彻底bleach掉，但是不影响后续的staining？
: 谁给个详尽的protocol，有包子。

p*p2012-11-06 08:11

5 楼

年轻漂亮的女人一周上床不止一次
这么算不对。
如果一周7次，3000/7=428
如果一夜7次，3000/7/7=61

d*l2012-11-06 08:11

6 楼

depends on the type of GFP

【在 v****e 的大作中提到】

: 搭车问一下，什么公司的GFP抗体可以做免疫组化

g*n2012-11-06 08:11

7 楼

肯定不对，固定资产折旧，漂亮女人年纪越大，discount factor越大，最后十年估计
干一次应该不算钱

n*w2012-11-06 08:11

8 楼

We sometimes fix our mouse tissues with prefer and do paraffin sections, and
after all the organic solvents the signal is gone.

v*t2012-11-06 08:11

9 楼

后来应该倒贴

【在 g******n 的大作中提到】

: 肯定不对，固定资产折旧，漂亮女人年纪越大，discount factor越大，最后十年估计
: 干一次应该不算钱

G*d2012-11-06 08:11

10 楼

good
I can try
thanks

a*y2012-11-06 08:11

11 楼

那么你来算算，贴多少比较合适?

【在 v***t 的大作中提到】

: 后来应该倒贴

v*e2012-11-06 08:11

12 楼

It is EGFP, based on the information of mouse line provided.

【在 d**l 的大作中提到】

: depends on the type of GFP

x*g2012-11-06 08:11

13 楼

从40岁算起

【在 a********y 的大作中提到】

: 那么你来算算，贴多少比较合适?

z*62012-11-06 08:11

14 楼

Really? But someone in our lab did the same treatment, and the signal is
still there...

and

【在 n***w 的大作中提到】

: We sometimes fix our mouse tissues with prefer and do paraffin sections, and
: after all the organic solvents the signal is gone.

s*s2012-11-06 08:11

15 楼

fix削弱gfp，你本来就太强了就没办法了

【在 z*******6 的大作中提到】

: Really? But someone in our lab did the same treatment, and the signal is
: still there...
:
: and

D*a2012-11-06 08:11

16 楼

泡酒精应该很管用的啊，多泡会呢

【在 z*******6 的大作中提到】

: Really? But someone in our lab did the same treatment, and the signal is
: still there...
:
: and

a*k2012-11-06 08:11

17 楼

on my hand:
1, Roche mouse mAB
2, lifetech
3, Torrey pinee Rb pAB
4, Aves, ck AB
都有signal，background不太一样。Good luck.

【在 v****e 的大作中提到】

: It is EGFP, based on the information of mouse line provided.

n*w2012-11-06 08:11

18 楼

100% efficiency at our hands.

【在 z*******6 的大作中提到】

: Really? But someone in our lab did the same treatment, and the signal is
: still there...
:
: and

v*e2012-11-06 08:11

19 楼

能告诉我哪几个比较好，如果去做石蜡包埋的免疫萤光染色吗？我要做co-
immunostaing去定位我要做的那个基因。谢谢

【在 a********k 的大作中提到】

: on my hand:
: 1, Roche mouse mAB
: 2, lifetech
: 3, Torrey pinee Rb pAB
: 4, Aves, ck AB
: 都有signal，background不太一样。Good luck.

b*n2012-11-06 08:11

20 楼

What is "Prefer"?
fix our mouse tissues with prefer

and

【在 n***w 的大作中提到】

: We sometimes fix our mouse tissues with prefer and do paraffin sections, and
: after all the organic solvents the signal is gone.

z*62012-11-06 08:11

21 楼

What kind of GFP you used?
The one we use is neutrophils from LysMGFP+/- mice...

【在 n***w 的大作中提到】

: 100% efficiency at our hands.

G*d2012-11-06 08:11

22 楼

Not work

a*a2012-11-06 08:11

23 楼

这个是可以的
还有就是可以参照一下actin染色的protocol，
里面会有一步通透掉游离actin
PFA固定是不行的
我们做分化的时候就这样留着EGFP

【在 D*a 的大作中提到】

: 泡酒精应该很管用的啊，多泡会呢