s*a
2 楼
大家提取细胞蛋白的常用方法是哪个:
1,消化,离心,去上清,加 lysis buffer。
2,往皿中加 PBS,刮下来,离心,去上清,加 lysis buffer。
3,直接往皿中加 lysis buffer,刮下来,离心,取上清。
这 3 种方法对于最终的蛋白的质或量上有比较大的影响么?
我经常用 1 和 3,但好像我见过的说明书中,凡是涉及到收集细胞这块,一般都是用
的方法 2 。
谢谢!
1,消化,离心,去上清,加 lysis buffer。
2,往皿中加 PBS,刮下来,离心,去上清,加 lysis buffer。
3,直接往皿中加 lysis buffer,刮下来,离心,取上清。
这 3 种方法对于最终的蛋白的质或量上有比较大的影响么?
我经常用 1 和 3,但好像我见过的说明书中,凡是涉及到收集细胞这块,一般都是用
的方法 2 。
谢谢!
j*o
3 楼
上网查余额,看看卡里的钱是哪天充进去的.
j*n
6 楼
虽说1-3我都做过 但我个人不喜欢1 是因为总觉得胰酶消化本身就是一种刺激 尤其对
做信号转导的 谁能说清有没有影响?
2我也不常用,倒不是这个方法理论上有啥缺陷,只是我经常遇到细胞在PBS里面离心不
易,经常细胞不能完全形成pellet EP管里面还好点 15ml离心管尤其严重
3我比较常用 其实是省事 缺点是总会一定程度掺入PBS而稀释裂解液 可能会导致最后
蛋白浓度不够而影响实验 不过一般来说吸干净了影响不大
看你个人爱好了
【在 s**********a 的大作中提到】
: 大家提取细胞蛋白的常用方法是哪个:
: 1,消化,离心,去上清,加 lysis buffer。
: 2,往皿中加 PBS,刮下来,离心,去上清,加 lysis buffer。
: 3,直接往皿中加 lysis buffer,刮下来,离心,取上清。
: 这 3 种方法对于最终的蛋白的质或量上有比较大的影响么?
: 我经常用 1 和 3,但好像我见过的说明书中,凡是涉及到收集细胞这块,一般都是用
: 的方法 2 。
: 谢谢!
z*8
7 楼
是那个prepaid card吗?
a*n
8 楼
做蛋白质三样都可以,消化离心提出来的蛋白多一些
b*f
11 楼
co ask
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