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请问两个southern blot 的问题
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请问两个southern blot 的问题# Biology - 生物学
c*i
1
最近OPT快过期,可是还没找到工作。
考虑转到F2,理论上如果有公司要我,并且帮我申请H1B,即使是F2也是可行的吧?
但是就不知道这种情况多吗? 公司应该不愿意等我那么长时间,给我申请H1B吧。
难道只有再申请转回F1一条路了吗?
谢谢
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w*y
2
我试过好几种方法,都无法清洁到让自己满意
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b*r
3
被朋友的猫猫抓伤了, 是只几个月大的小猫,朋友刚买的, 他也不知道打过什么疫苗
没有。 应该怎么处理?
谢谢
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c*u
4
transgenic mouse southern blot, 做了几个星期了还没出来,首要的问题如图,坑爹
的genomic DNA 用HindIII切了24个小时,60v 跑了6个小时,就给我跑成这副鬼样子,
大家提DNA, 溶DNA,切,跑胶有什么trick没? 还有一个问题是,我的目标条带有
10kb,DIG probe, 我老板说10kb太大了,2-5kb最好,那我这种情况有可能成不?
真心求教,酌情发包子,谢谢。
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S*I
5

可行
不多,但有;如果H-1B正好有配额,办个加急,等15个工作日就能上班了,公司不至于
连15天都等不了吧。

【在 c********i 的大作中提到】
: 最近OPT快过期,可是还没找到工作。
: 考虑转到F2,理论上如果有公司要我,并且帮我申请H1B,即使是F2也是可行的吧?
: 但是就不知道这种情况多吗? 公司应该不愿意等我那么长时间,给我申请H1B吧。
: 难道只有再申请转回F1一条路了吗?
: 谢谢

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g*9
6
What kind of 油 are you talking about?
I just wipe it down with some dish liquid every time after I finish cooking,
so far everything is as clean as new.

【在 w*********y 的大作中提到】
: 我试过好几种方法,都无法清洁到让自己满意
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q*u
7
按普通擦伤划伤处理即可

【在 b******r 的大作中提到】
: 被朋友的猫猫抓伤了, 是只几个月大的小猫,朋友刚买的, 他也不知道打过什么疫苗
: 没有。 应该怎么处理?
: 谢谢

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s*r
8
southern这种实验耗时长,步骤多,加上DIG本身信号就比同位素弱,真心坑爹。新手
的话能搞的死去活来,我前段时间自己也是试了两次都没成功,实在不想伺候了,最后
以一顿buffet的代价请lab里一老手postdoc做的。。
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e*r
9
配额如果没了就有问题了

【在 S**I 的大作中提到】
:
: 可行
: 不多,但有;如果H-1B正好有配额,办个加急,等15个工作日就能上班了,公司不至于
: 连15天都等不了吧。

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c*l
10
409
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a*8
11
You can see your wells has strong signal. DNA digestion is not complete.
HindIII is NOT a good enzyme for southern. try other enzyme and then trouble
shoot other conditions. Good luck.
Your marker is good, I guess that you also labeled a small amount of marker,
which is good.
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b*l
12
每天擦,而且最好炉子没凉的时候用洗碗剂和scotch pad擦。很容易。不过可能我用的
油烟不大。而且记住,炒锅外面要擦干净。

【在 w*********y 的大作中提到】
: 我试过好几种方法,都无法清洁到让自己满意
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d*h
13
DNA提的不纯,酶切的不完全,你图中都有明显带痕了
你如果样品个数少,建议你跑大孔胶,过夜跑,放低电压,跑出来的片子好看
用同位素做,不要用地高辛,那个和同位素做的片子没法比
以我的经验看的话,跑成这样,同位素都足够做出漂亮片子了。
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g*9
14
1. change to P38.
2. wash it a little bit longer.
This result seems to be promising.
good luck.

【在 c********u 的大作中提到】
: transgenic mouse southern blot, 做了几个星期了还没出来,首要的问题如图,坑爹
: 的genomic DNA 用HindIII切了24个小时,60v 跑了6个小时,就给我跑成这副鬼样子,
: 大家提DNA, 溶DNA,切,跑胶有什么trick没? 还有一个问题是,我的目标条带有
: 10kb,DIG probe, 我老板说10kb太大了,2-5kb最好,那我这种情况有可能成不?
: 真心求教,酌情发包子,谢谢。

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a*m
15
本科的时候做的。。。
HindIII怎么还用24小时?全都切得稀巴烂了吧。。。

【在 c********u 的大作中提到】
: transgenic mouse southern blot, 做了几个星期了还没出来,首要的问题如图,坑爹
: 的genomic DNA 用HindIII切了24个小时,60v 跑了6个小时,就给我跑成这副鬼样子,
: 大家提DNA, 溶DNA,切,跑胶有什么trick没? 还有一个问题是,我的目标条带有
: 10kb,DIG probe, 我老板说10kb太大了,2-5kb最好,那我这种情况有可能成不?
: 真心求教,酌情发包子,谢谢。

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f*d
16
这个是明显的酶切没有切开阿。DNA不干净应该是根本问题。 southern blot不是什么
很复杂的试验,一般只要DNA是好的,都能出结果。
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