j*y
2 楼
俺好不容易从比别人那里讨来了一个vector, 一看是滴在 一个小圆形的 filter
paper 上的， 俺是新手误以为该质粒是在Ecoli 菌内， 就把它放到 5ml LB 管内一小
时后， 取50 uL 上清 涂平板， 过夜什么都没有涨出来。 俺才意识到，别人寄过来的
是质粒， 不是菌株。
俺把这小块滤纸融在5mL LB 里面了， 这个还有补救的办法么？
paper 上的， 俺是新手误以为该质粒是在Ecoli 菌内， 就把它放到 5ml LB 管内一小
时后， 取50 uL 上清 涂平板， 过夜什么都没有涨出来。 俺才意识到，别人寄过来的
是质粒， 不是菌株。
俺把这小块滤纸融在5mL LB 里面了， 这个还有补救的办法么？
s*l
3 楼
大人收到EAD／AP卡多长时间了？
我们是TSC中心，３月１５日４８５ RD。４月１１日大人收到EAD／AP， ４月２０日收
到大人AP纸，到今天小孩的AP纸还是没消息，我也很着急
我们是TSC中心，３月１５日４８５ RD。４月１１日大人收到EAD／AP， ４月２０日收
到大人AP纸，到今天小孩的AP纸还是没消息，我也很着急
y*i
4 楼
直接拿1ml出来 加competent cell转化涂板
【在 j***y 的大作中提到】
: 俺好不容易从比别人那里讨来了一个vector, 一看是滴在 一个小圆形的 filter
: paper 上的， 俺是新手误以为该质粒是在Ecoli 菌内， 就把它放到 5ml LB 管内一小
: 时后， 取50 uL 上清 涂平板， 过夜什么都没有涨出来。 俺才意识到，别人寄过来的
: 是质粒， 不是菌株。
: 俺把这小块滤纸融在5mL LB 里面了， 这个还有补救的办法么？
【在 j***y 的大作中提到】
: 俺好不容易从比别人那里讨来了一个vector, 一看是滴在 一个小圆形的 filter
: paper 上的， 俺是新手误以为该质粒是在Ecoli 菌内， 就把它放到 5ml LB 管内一小
: 时后， 取50 uL 上清 涂平板， 过夜什么都没有涨出来。 俺才意识到，别人寄过来的
: 是质粒， 不是菌株。
: 俺把这小块滤纸融在5mL LB 里面了， 这个还有补救的办法么？
a*k
5 楼
should be 1-5ul
【在 y****i 的大作中提到】
: 直接拿1ml出来 加competent cell转化涂板
【在 y****i 的大作中提到】
: 直接拿1ml出来 加competent cell转化涂板
j*y
6 楼
1-5 uL 是不是太少了？
【在 a********k 的大作中提到】
: should be 1-5ul
【在 a********k 的大作中提到】
: should be 1-5ul
y*i
7 楼
我是说直接扔细菌到LB里面去直接涂板 不是说取1ml转化。。。
【在 a********k 的大作中提到】
: should be 1-5ul
【在 a********k 的大作中提到】
: should be 1-5ul
d*m
8 楼
LZ是怎么混到开国大老的？
j*y
9 楼
唉， 俺Lab以前是不做clone这些东西的，分子生物基本靠自摸，呵呵
【在 d********m 的大作中提到】
: LZ是怎么混到开国大老的？
【在 d********m 的大作中提到】
: LZ是怎么混到开国大老的？
m*n
10 楼
笑死了，哈哈哈哈哈
【在 j***y 的大作中提到】
: 唉， 俺Lab以前是不做clone这些东西的，分子生物基本靠自摸，呵呵
【在 j***y 的大作中提到】
: 唉， 俺Lab以前是不做clone这些东西的，分子生物基本靠自摸，呵呵
e*s
11 楼
试试看纯化和浓缩质粒的小柱子，把5ml LB浓缩到5-10ul,然后转化。
不行的话，你就只能重新要了。
【在 j***y 的大作中提到】
: 唉， 俺Lab以前是不做clone这些东西的，分子生物基本靠自摸，呵呵
不行的话，你就只能重新要了。
【在 j***y 的大作中提到】
: 唉， 俺Lab以前是不做clone这些东西的，分子生物基本靠自摸，呵呵
I*y
12 楼
你不会是在巴黎吧？ 我最近ship了一个plasmid，就是这么寄的。哈哈……
【在 j***y 的大作中提到】
: 唉， 俺Lab以前是不做clone这些东西的，分子生物基本靠自摸，呵呵
【在 j***y 的大作中提到】
: 唉， 俺Lab以前是不做clone这些东西的，分子生物基本靠自摸，呵呵
p*b
13 楼
好像BL21不适合用于质粒扩增， 一般表达才用BL21
y*u
14 楼
。。。我就一个都没有做过
【在 m****n 的大作中提到】
: 笑死了，哈哈哈哈哈
【在 m****n 的大作中提到】
: 笑死了，哈哈哈哈哈
e*s
15 楼
其实大部分质粒没问题。我就遇见过一个BL21不行的pMal。
【在 p******b 的大作中提到】
: 好像BL21不适合用于质粒扩增， 一般表达才用BL21
【在 p******b 的大作中提到】
: 好像BL21不适合用于质粒扩增， 一般表达才用BL21
s*g
16 楼
等新闻！
r*r
17 楼
這用一般heat shock的應該是沒救了，至少要用電的。
j*y
18 楼
是的
俺后来用 stratagene mutagenesis kit 带来的 XL1-blue heat shock 转化什么都没
有涨，再改用用电转化 就有蓝色菌株在 X-gal板涨出来 (vector 是带 Lacz alpha的）
【在 r****r 的大作中提到】
: 這用一般heat shock的應該是沒救了，至少要用電的。
俺后来用 stratagene mutagenesis kit 带来的 XL1-blue heat shock 转化什么都没
有涨，再改用用电转化 就有蓝色菌株在 X-gal板涨出来 (vector 是带 Lacz alpha的）
【在 r****r 的大作中提到】
: 這用一般heat shock的應該是沒救了，至少要用電的。
s*g
19 楼
和你一起开心。电转的条件是什么啊？用那个公司的仪器？以前只做动物细胞的电转。
没有做过competent cell的点转。。。
没有做过competent cell的点转。。。
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