l*y
2 楼
shopper不小心转发了两次monthly bonus的邮件
本来昨天已经转发过一张收据
今天忘记了又转了一张别的收据
不会有问题吧
多谢!
本来昨天已经转发过一张收据
今天忘记了又转了一张别的收据
不会有问题吧
多谢!
m*r
3 楼
老板让作一个用新的单克隆抗体治疗带肿瘤裸鼠的报告。以前没有做过这方面的工作,
这段时间读了很多文献,学习了很多东西,发现做这方面还是很有意思的,比我以前做
的基础的东西有意义多了。
现在热情很大,但不明白的问题也很多。向大家请教一个问题:在这种用新单克隆抗体
治疗带瘤裸鼠中最常见的问题是什么?
小妹先谢过了。
这段时间读了很多文献,学习了很多东西,发现做这方面还是很有意思的,比我以前做
的基础的东西有意义多了。
现在热情很大,但不明白的问题也很多。向大家请教一个问题:在这种用新单克隆抗体
治疗带瘤裸鼠中最常见的问题是什么?
小妹先谢过了。
c*z
6 楼
你是分子生物学的课题组还是药理药剂的?
如果前者的话,在细胞层面做好了,delivery搞不定就僵在那里了
不过可能后续工作老板都会找collaborator给你们做
如果前者的话,在细胞层面做好了,delivery搞不定就僵在那里了
不过可能后续工作老板都会找collaborator给你们做
L*Y
8 楼
我在想要不要再转发一次。。。
m*r
9 楼
非常感谢你的回复!!!我是学分子生物学的。
我就是打算将在BALB/c小鼠制备的单克隆抗体再腹腔注射到带肿瘤的BALB/c裸鼠中,观
察该抗体是否有抑制肿瘤生长的作用。老板让我写一下在这种实验过程中可能会遇到的
问题,以及可能的其他选择方案。有些象他写grant中的potential pitfalls and
alternatives。
对我一个在这个领域的新手来说,实在不知道在这种实验过程中可能会遇到什么问题以
及可能的选择方案。请多多指教。再次感谢。
【在 c*z 的大作中提到】
: 你是分子生物学的课题组还是药理药剂的?
: 如果前者的话,在细胞层面做好了,delivery搞不定就僵在那里了
: 不过可能后续工作老板都会找collaborator给你们做
我就是打算将在BALB/c小鼠制备的单克隆抗体再腹腔注射到带肿瘤的BALB/c裸鼠中,观
察该抗体是否有抑制肿瘤生长的作用。老板让我写一下在这种实验过程中可能会遇到的
问题,以及可能的其他选择方案。有些象他写grant中的potential pitfalls and
alternatives。
对我一个在这个领域的新手来说,实在不知道在这种实验过程中可能会遇到什么问题以
及可能的选择方案。请多多指教。再次感谢。
【在 c*z 的大作中提到】
: 你是分子生物学的课题组还是药理药剂的?
: 如果前者的话,在细胞层面做好了,delivery搞不定就僵在那里了
: 不过可能后续工作老板都会找collaborator给你们做
a*y
10 楼
如果是NSF的话, CAREER没有多少钱。不就是个普通的grant么?
CAREER而且还不用和established的竞争,因该比普通NSF容易拿。
我们学校排名120多名,过去几年基本上系里的AP都拿了NSF CAREER。很多人之后都拿
不到grant,更加证明这个比普通的grant容易拿
CAREER而且还不用和established的竞争,因该比普通NSF容易拿。
我们学校排名120多名,过去几年基本上系里的AP都拿了NSF CAREER。很多人之后都拿
不到grant,更加证明这个比普通的grant容易拿
s*9
11 楼
你至少应该简单介绍一下你的抗原,cytokine,receptor?这个receptor是activation
receptor?如果是,那么receptor有没有redundency?你的antibody是agonist还是
antagonist?
没有这些info,怎么能够预测pitfall?
【在 m*******r 的大作中提到】
: 非常感谢你的回复!!!我是学分子生物学的。
: 我就是打算将在BALB/c小鼠制备的单克隆抗体再腹腔注射到带肿瘤的BALB/c裸鼠中,观
: 察该抗体是否有抑制肿瘤生长的作用。老板让我写一下在这种实验过程中可能会遇到的
: 问题,以及可能的其他选择方案。有些象他写grant中的potential pitfalls and
: alternatives。
: 对我一个在这个领域的新手来说,实在不知道在这种实验过程中可能会遇到什么问题以
: 及可能的选择方案。请多多指教。再次感谢。
receptor?如果是,那么receptor有没有redundency?你的antibody是agonist还是
antagonist?
没有这些info,怎么能够预测pitfall?
【在 m*******r 的大作中提到】
: 非常感谢你的回复!!!我是学分子生物学的。
: 我就是打算将在BALB/c小鼠制备的单克隆抗体再腹腔注射到带肿瘤的BALB/c裸鼠中,观
: 察该抗体是否有抑制肿瘤生长的作用。老板让我写一下在这种实验过程中可能会遇到的
: 问题,以及可能的其他选择方案。有些象他写grant中的potential pitfalls and
: alternatives。
: 对我一个在这个领域的新手来说,实在不知道在这种实验过程中可能会遇到什么问题以
: 及可能的选择方案。请多多指教。再次感谢。
m*r
13 楼
好的。谢谢您的提醒。
我用的抗原是一个新克隆鉴定的肿瘤高表达蛋白,功能实验证明它的表达可以显著地促
进肿瘤的生长。免疫组化和荧光标记实验显示它定位在细胞膜上,并且有胞外区。是不
是受体我们还没有实验证明。是否redundency我们也不清楚。我们希望制备的单克隆抗
体是抑制阻断这个肿瘤高表达蛋白的功能的,以此达到抑制肿瘤生长的目的。
谢谢!!!
activation
【在 s****9 的大作中提到】
: 你至少应该简单介绍一下你的抗原,cytokine,receptor?这个receptor是activation
: receptor?如果是,那么receptor有没有redundency?你的antibody是agonist还是
: antagonist?
: 没有这些info,怎么能够预测pitfall?
我用的抗原是一个新克隆鉴定的肿瘤高表达蛋白,功能实验证明它的表达可以显著地促
进肿瘤的生长。免疫组化和荧光标记实验显示它定位在细胞膜上,并且有胞外区。是不
是受体我们还没有实验证明。是否redundency我们也不清楚。我们希望制备的单克隆抗
体是抑制阻断这个肿瘤高表达蛋白的功能的,以此达到抑制肿瘤生长的目的。
谢谢!!!
activation
【在 s****9 的大作中提到】
: 你至少应该简单介绍一下你的抗原,cytokine,receptor?这个receptor是activation
: receptor?如果是,那么receptor有没有redundency?你的antibody是agonist还是
: antagonist?
: 没有这些info,怎么能够预测pitfall?
s*9
15 楼
谢谢你的包子,看在包子的面子上,多说几句。
如果让提问题,可以提很多,
首先,做单抗的抗原是不是N Terminal,或者细胞外的部分。如果不是,抗体识别的
epitope很可能不是细胞外的部分。如果我做这个实验,首先就是把单抗结合上颜色(
eg. Alex488),用FACS染一下,看看能不能特异结合细胞外的抗原。
如果这个抗体识别的是细胞内的抗原。经典的免疫学认为,抗体不能够neutralize细胞
内的东西(当然,前年有篇PNAS说可以)。
如果可以识别胞外抗原,而且抗原是肿瘤特异的,那么很有意思。首先,应该看一下,
这个抗体对于抗原的结合能不能影响蛋白的功能。比如,overexpress 这个抗原之后,
加抗体,in vitro culture对肿瘤细胞的生长有没有影响。如果有,可以猜想它是一个
受体,抗体甚至有可能是个agonist。这样的话,这个project会变的很有意思。如果是
negative result,说明也推翻不了太多问题。
接下来,你当然可以直接打tumor(最好是overexpression的tumor把window放大)到
BALB/c上,然后打抗体看有没有效果。如果有,你接着需要打BALB/c Scid mice看是不
是immune cell介导的Antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity。或者直接的
影响蛋白在肿瘤上的功能,进而影响tumor growth。
如果没有effect,也不用紧张,你可以连上颜色后,看看抗体能不能被内吞,如果可以
,你可以把抗体接合上toxin,做in vivo treatment。也可以修饰一下Fc,看看能不能
enhance ADCC进而使得抗体有效果。
总结一下,首先应该看看能不能结合胞外蛋白,如果不行,意义不大。如果可以结合细
胞外的蛋白,蛋白是肿瘤(或者某些肿瘤)特异的,且是一个新抗体,我觉得很有意思
,有很多可以做的东西。发了文章之后,去公司也会比较容易。
【在 m*******r 的大作中提到】
: 好的。谢谢您的提醒。
: 我用的抗原是一个新克隆鉴定的肿瘤高表达蛋白,功能实验证明它的表达可以显著地促
: 进肿瘤的生长。免疫组化和荧光标记实验显示它定位在细胞膜上,并且有胞外区。是不
: 是受体我们还没有实验证明。是否redundency我们也不清楚。我们希望制备的单克隆抗
: 体是抑制阻断这个肿瘤高表达蛋白的功能的,以此达到抑制肿瘤生长的目的。
: 谢谢!!!
:
: activation
如果让提问题,可以提很多,
首先,做单抗的抗原是不是N Terminal,或者细胞外的部分。如果不是,抗体识别的
epitope很可能不是细胞外的部分。如果我做这个实验,首先就是把单抗结合上颜色(
eg. Alex488),用FACS染一下,看看能不能特异结合细胞外的抗原。
如果这个抗体识别的是细胞内的抗原。经典的免疫学认为,抗体不能够neutralize细胞
内的东西(当然,前年有篇PNAS说可以)。
如果可以识别胞外抗原,而且抗原是肿瘤特异的,那么很有意思。首先,应该看一下,
这个抗体对于抗原的结合能不能影响蛋白的功能。比如,overexpress 这个抗原之后,
加抗体,in vitro culture对肿瘤细胞的生长有没有影响。如果有,可以猜想它是一个
受体,抗体甚至有可能是个agonist。这样的话,这个project会变的很有意思。如果是
negative result,说明也推翻不了太多问题。
接下来,你当然可以直接打tumor(最好是overexpression的tumor把window放大)到
BALB/c上,然后打抗体看有没有效果。如果有,你接着需要打BALB/c Scid mice看是不
是immune cell介导的Antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity。或者直接的
影响蛋白在肿瘤上的功能,进而影响tumor growth。
如果没有effect,也不用紧张,你可以连上颜色后,看看抗体能不能被内吞,如果可以
,你可以把抗体接合上toxin,做in vivo treatment。也可以修饰一下Fc,看看能不能
enhance ADCC进而使得抗体有效果。
总结一下,首先应该看看能不能结合胞外蛋白,如果不行,意义不大。如果可以结合细
胞外的蛋白,蛋白是肿瘤(或者某些肿瘤)特异的,且是一个新抗体,我觉得很有意思
,有很多可以做的东西。发了文章之后,去公司也会比较容易。
【在 m*******r 的大作中提到】
: 好的。谢谢您的提醒。
: 我用的抗原是一个新克隆鉴定的肿瘤高表达蛋白,功能实验证明它的表达可以显著地促
: 进肿瘤的生长。免疫组化和荧光标记实验显示它定位在细胞膜上,并且有胞外区。是不
: 是受体我们还没有实验证明。是否redundency我们也不清楚。我们希望制备的单克隆抗
: 体是抑制阻断这个肿瘤高表达蛋白的功能的,以此达到抑制肿瘤生长的目的。
: 谢谢!!!
:
: activation
l*1
17 楼
Move On LZ
this kind of topic never get NDA or FDA approved
it is just waste time and Fundings.
from that 一个新的单克隆抗体治疗带肿瘤裸鼠的问题
if you did not used multi novel 单/poly 克隆抗体治疗带one type 肿瘤裸鼠
pls refer:
发信人: luminb (Gooder), 信区: Biology
标 题: Re: 大家说说Cancer cell metabolism吧,这个越来越火啊!
发信站: BBS 未名空间站 (Sun Jan 6 22:48:08 2013, 美东)
我已经发现有个规律了。大牛发些东西,打脸的常常是药厂。为啥,大牛做的药厂纷纷
跟风啊,然后一看,NND不是这么回事。很多情况下,大家也就算了,有的就会跳出头
,发个打脸的文章。呵呵。
http://www.mitbbs.com/article_t1/Biology/31748337_0_3.html
or
and
M2 isoform of pyruvate kinase is dispensable for tumor maintenance and
growth.
HTTP: //www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/23267074
【在 m*******r 的大作中提到】
: 好的。谢谢您的提醒。
: 我用的抗原是一个新克隆鉴定的肿瘤高表达蛋白,功能实验证明它的表达可以显著地促
: 进肿瘤的生长。免疫组化和荧光标记实验显示它定位在细胞膜上,并且有胞外区。是不
: 是受体我们还没有实验证明。是否redundency我们也不清楚。我们希望制备的单克隆抗
: 体是抑制阻断这个肿瘤高表达蛋白的功能的,以此达到抑制肿瘤生长的目的。
: 谢谢!!!
:
: activation
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it is just waste time and Fundings.
from that 一个新的单克隆抗体治疗带肿瘤裸鼠的问题
if you did not used multi novel 单/poly 克隆抗体治疗带one type 肿瘤裸鼠
pls refer:
发信人: luminb (Gooder), 信区: Biology
标 题: Re: 大家说说Cancer cell metabolism吧,这个越来越火啊!
发信站: BBS 未名空间站 (Sun Jan 6 22:48:08 2013, 美东)
我已经发现有个规律了。大牛发些东西,打脸的常常是药厂。为啥,大牛做的药厂纷纷
跟风啊,然后一看,NND不是这么回事。很多情况下,大家也就算了,有的就会跳出头
,发个打脸的文章。呵呵。
http://www.mitbbs.com/article_t1/Biology/31748337_0_3.html
or
and
M2 isoform of pyruvate kinase is dispensable for tumor maintenance and
growth.
HTTP: //www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/23267074
【在 m*******r 的大作中提到】
: 好的。谢谢您的提醒。
: 我用的抗原是一个新克隆鉴定的肿瘤高表达蛋白,功能实验证明它的表达可以显著地促
: 进肿瘤的生长。免疫组化和荧光标记实验显示它定位在细胞膜上,并且有胞外区。是不
: 是受体我们还没有实验证明。是否redundency我们也不清楚。我们希望制备的单克隆抗
: 体是抑制阻断这个肿瘤高表达蛋白的功能的,以此达到抑制肿瘤生长的目的。
: 谢谢!!!
:
: activation
m*r
19 楼
受教了!非常感谢!
【在 s****9 的大作中提到】
: 谢谢你的包子,看在包子的面子上,多说几句。
: 如果让提问题,可以提很多,
: 首先,做单抗的抗原是不是N Terminal,或者细胞外的部分。如果不是,抗体识别的
: epitope很可能不是细胞外的部分。如果我做这个实验,首先就是把单抗结合上颜色(
: eg. Alex488),用FACS染一下,看看能不能特异结合细胞外的抗原。
: 如果这个抗体识别的是细胞内的抗原。经典的免疫学认为,抗体不能够neutralize细胞
: 内的东西(当然,前年有篇PNAS说可以)。
: 如果可以识别胞外抗原,而且抗原是肿瘤特异的,那么很有意思。首先,应该看一下,
: 这个抗体对于抗原的结合能不能影响蛋白的功能。比如,overexpress 这个抗原之后,
: 加抗体,in vitro culture对肿瘤细胞的生长有没有影响。如果有,可以猜想它是一个
【在 s****9 的大作中提到】
: 谢谢你的包子,看在包子的面子上,多说几句。
: 如果让提问题,可以提很多,
: 首先,做单抗的抗原是不是N Terminal,或者细胞外的部分。如果不是,抗体识别的
: epitope很可能不是细胞外的部分。如果我做这个实验,首先就是把单抗结合上颜色(
: eg. Alex488),用FACS染一下,看看能不能特异结合细胞外的抗原。
: 如果这个抗体识别的是细胞内的抗原。经典的免疫学认为,抗体不能够neutralize细胞
: 内的东西(当然,前年有篇PNAS说可以)。
: 如果可以识别胞外抗原,而且抗原是肿瘤特异的,那么很有意思。首先,应该看一下,
: 这个抗体对于抗原的结合能不能影响蛋白的功能。比如,overexpress 这个抗原之后,
: 加抗体,in vitro culture对肿瘤细胞的生长有没有影响。如果有,可以猜想它是一个
m*r
21 楼
谢谢您!对您跟踪最新科研前沿的能力甚为佩服!
【在 l**********1 的大作中提到】
: Move On LZ
: this kind of topic never get NDA or FDA approved
: it is just waste time and Fundings.
: from that 一个新的单克隆抗体治疗带肿瘤裸鼠的问题
: if you did not used multi novel 单/poly 克隆抗体治疗带one type 肿瘤裸鼠
: pls refer:
: 发信人: luminb (Gooder), 信区: Biology
: 标 题: Re: 大家说说Cancer cell metabolism吧,这个越来越火啊!
: 发信站: BBS 未名空间站 (Sun Jan 6 22:48:08 2013, 美东)
: 我已经发现有个规律了。大牛发些东西,打脸的常常是药厂。为啥,大牛做的药厂纷纷
【在 l**********1 的大作中提到】
: Move On LZ
: this kind of topic never get NDA or FDA approved
: it is just waste time and Fundings.
: from that 一个新的单克隆抗体治疗带肿瘤裸鼠的问题
: if you did not used multi novel 单/poly 克隆抗体治疗带one type 肿瘤裸鼠
: pls refer:
: 发信人: luminb (Gooder), 信区: Biology
: 标 题: Re: 大家说说Cancer cell metabolism吧,这个越来越火啊!
: 发信站: BBS 未名空间站 (Sun Jan 6 22:48:08 2013, 美东)
: 我已经发现有个规律了。大牛发些东西,打脸的常常是药厂。为啥,大牛做的药厂纷纷
c*z
23 楼
lz也不要太绝望,你的课题和 HER2受体的herceptine 是一个路子
你的mAb已经拿到了么?如果还没有的话,你都不知道这个mAb是否binding在
functional region....
拿therapeutic antibody不像养做western的抗体这么简单,只要specific binding就
可以,你这个不是夹住蛋白身上任何部分就可以交差的。。。任重而道远啊
你加了这个蛋白细胞长的开心,不等于block了它就可以抑制细胞生长,其他通路或许
可以取代它,直接跳过这个蛋白让细胞生长
你的蛋白是受体还是配体倒是问题不大,block哪个都行
还有谢谢lz包子
【在 m*******r 的大作中提到】
: 谢谢您!对您跟踪最新科研前沿的能力甚为佩服!
你的mAb已经拿到了么?如果还没有的话,你都不知道这个mAb是否binding在
functional region....
拿therapeutic antibody不像养做western的抗体这么简单,只要specific binding就
可以,你这个不是夹住蛋白身上任何部分就可以交差的。。。任重而道远啊
你加了这个蛋白细胞长的开心,不等于block了它就可以抑制细胞生长,其他通路或许
可以取代它,直接跳过这个蛋白让细胞生长
你的蛋白是受体还是配体倒是问题不大,block哪个都行
还有谢谢lz包子
【在 m*******r 的大作中提到】
: 谢谢您!对您跟踪最新科研前沿的能力甚为佩服!
l*1
25 楼
不谢 都考古未名买买提 Bio 版的最近旧贴 得到的启发 没那些帖 俺就是一个Cre
mice 科盲
比如
楼主可以 结合楼下的跟贴
和以下的贴主 交流下 ERT2-Cre Mice genotyping Tips...
发信人: supersunday (Linda), 信区: Biology
标 题: ERT2怎么genotyping?
发信站: BBS 未名空间站 (Tue Jan 15 18:54:44 2013, 美东)
我们最近引进了两种Cre小鼠,一种是持续表达的,一种是诱导的(ERT2-Cre)。请问
ERT2怎么genotyping?怎么设计primer?我找了plasmid,是pCAG-ERT2CreERT2,没有找
到ERT2 site。
http://www.mitbbs.com/article_t/Biology/31772553.html
【在 m*******r 的大作中提到】
: 谢谢您!对您跟踪最新科研前沿的能力甚为佩服!
mice 科盲
比如
楼主可以 结合楼下的跟贴
和以下的贴主 交流下 ERT2-Cre Mice genotyping Tips...
发信人: supersunday (Linda), 信区: Biology
标 题: ERT2怎么genotyping?
发信站: BBS 未名空间站 (Tue Jan 15 18:54:44 2013, 美东)
我们最近引进了两种Cre小鼠,一种是持续表达的,一种是诱导的(ERT2-Cre)。请问
ERT2怎么genotyping?怎么设计primer?我找了plasmid,是pCAG-ERT2CreERT2,没有找
到ERT2 site。
http://www.mitbbs.com/article_t/Biology/31772553.html
【在 m*******r 的大作中提到】
: 谢谢您!对您跟踪最新科研前沿的能力甚为佩服!
l*1
26 楼
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