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请教protein fractionation
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请教protein fractionation# Biology - 生物学
s*n
1
放下电话,心里好受一点,他和外公相处得很好。
而我的生活突然安静下来。什么剪刀,笔,电脑手机之类的东西都可以随意放了,却不
适应了;在网上发了无数的帖子,倾诉心中的忧郁和思念;没有以前那么累了,不用操
心今天给他吃什么,带他到哪里去玩了,不用担心自己想做的事不断地被他打断了,心
里却不断甜蜜地回忆这些一幕幕,感伤接下来的一年光阴。
网上不断的有好心人发信来开导我:要先照顾好自己,才有能力照顾好宝宝;希望我内
心强大起来,未来总会有好的一天。。。
如果有足够的钱,我一定会选择把他送到幼儿园,再累也要把他留下。
我应该很庆幸,自己目睹了他那么多成长中的第一次:那一天枕头突然倒下来压到他的
身上,他为了“逃脱”,挣扎着完成了他的第一次翻身,我欣喜不已,打电话告诉所有
的人;那个夏日的早上我拿了一盆水到阳台上去浇向日葵,回来的时候居然看到原先只
会躺着翻滚的他居然是坐着的,惊喜之余,我又把他放来躺下,结果小家伙很熟练地就
用一只手撑在地上坐了起来;会坐了之后就开始移动,很快就掌握了爬的技巧,开始是
用膝盖着地,这样爬了三四个月慢慢地开始用脚丫子来爬了,屁股翘得高高的;然后就
可以扶着东西站那么一小会,当然多数时候是抱着我们的腿;那天在图书馆听故事的时
候,可能太高兴了吧,在一堆爬行的小婴儿中间居然腰一直,站了零点几秒钟,“艳惊
”全场的妈妈们,让我这个当妈的着实骄傲了一把,那时他十个月;差几天一岁的有天
晚上,我给他拍了个视频,记录了他人生的第一步,蹒跚,充满了尝试与好奇,还有我
惊喜的叫声。我都忘记了有这个视频,前几天翻出来看时,才觉得这真的是好珍贵的记
忆。我还有他七个多月时第一次叫“妈妈”的视频,胖呼呼的他只会坐,还不会爬,看
到我走开才两米去拿东西,就着急地直叫,叫得我心醉又开心。
他十一个月的有一天,我第一次离开他这么久,三个小时,我去上晚上的课。脑子里全
是他,回来一进门,他一扭头看到我,仿佛看到救星一般,尖叫着地爬到我跟前,抱着
我的腿。我蹲下一把把他抱住,只想把他融到我怀里,让他住到我心上再也不分离。
两年来几乎每天都在拍照,拍视频;转眼到了现在;感叹怎么他长大得这么快。有了自
己的思想,开始说“不”,脸皮也厚了,他知道我这个当妈的要比爸爸包容他,所以有
的事情也不听了。可他还是那个他,晚上睡醒了,依然要找的是妈妈。
机场送别,亲亲他的左脸,右脸,小嘴,额头;也许我眼中的悲伤让他意识到什么,他
开始在小车里挣扎。老公带他走了,而我转背眼泪即扑面而下;我想,一年后,他会是
什么样子了,变化一定很大吧。
我担心他会因为找不到妈妈而难过,每天打电话问他的情况,我其实好想和他说说话,
听他叫一声妈妈;但我怕他会因为妈妈不能抱他而大哭,怕他找不到妈妈而害怕。我也
怕自己不能承受,会因为他的一声妈妈而泪流满面。
我只能告诉自己要坚强,明年快快地过完,我就要和我的宝宝们团聚了。
感谢那些支持我的人,让我更坚定我的选择;也感谢那些拍我的人,让我会更懂得如果
珍惜将来与宝宝们的时光。
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y*e
2
你发的check list中,用来support I-765的document只有I94卡的copy。请问你的485
、765&131是一起装订的,用一份supporting document来支持所有的申请。
还是三个分别作为独立的申请装订的,用三份supporting document分别支持各自的申
请。
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f*k
3
用花盆/容器插了些空心菜杆子,搁在阳台上,大部分都活了。请问这样子可以采摘了
吗(看图片)?是把叶子剪下来?好像侧枝都还不是很大的样子。栽了2个星期了。
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m*r
4
想用western blot做某蛋白膜在cytoplasma和plasma membrane的分布,请问大家推荐
用什么kit或者buffer。谢谢。
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l*r
5
bless

【在 s*******n 的大作中提到】
: 放下电话,心里好受一点,他和外公相处得很好。
: 而我的生活突然安静下来。什么剪刀,笔,电脑手机之类的东西都可以随意放了,却不
: 适应了;在网上发了无数的帖子,倾诉心中的忧郁和思念;没有以前那么累了,不用操
: 心今天给他吃什么,带他到哪里去玩了,不用担心自己想做的事不断地被他打断了,心
: 里却不断甜蜜地回忆这些一幕幕,感伤接下来的一年光阴。
: 网上不断的有好心人发信来开导我:要先照顾好自己,才有能力照顾好宝宝;希望我内
: 心强大起来,未来总会有好的一天。。。
: 如果有足够的钱,我一定会选择把他送到幼儿园,再累也要把他留下。
: 我应该很庆幸,自己目睹了他那么多成长中的第一次:那一天枕头突然倒下来压到他的
: 身上,他为了“逃脱”,挣扎着完成了他的第一次翻身,我欣喜不已,打电话告诉所有

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l*5
6
三份supporting document分别支持各自的申请, 以防CASE的几份申请被分到不同的IO
手中.
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f*k
7


【在 f***k 的大作中提到】
: 用花盆/容器插了些空心菜杆子,搁在阳台上,大部分都活了。请问这样子可以采摘了
: 吗(看图片)?是把叶子剪下来?好像侧枝都还不是很大的样子。栽了2个星期了。

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B*N
8
如果你只想分离膜和cytosol,用0.05%digitonin在细胞上打洞,一离心,cytosol会从
细胞内挤出来到buffer中。
如果你一定要提plasma membrane,你用220mM蔗糖溶液重悬细胞,然后用针头或者玻璃
杵匀浆,通过差速离心,可以分离。但是质膜和内质网分不开。

【在 m*****r 的大作中提到】
: 想用western blot做某蛋白膜在cytoplasma和plasma membrane的分布,请问大家推荐
: 用什么kit或者buffer。谢谢。

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y*e
9
多谢老大!
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d*3
10
我直接剪的

【在 f***k 的大作中提到】
: 用花盆/容器插了些空心菜杆子,搁在阳台上,大部分都活了。请问这样子可以采摘了
: 吗(看图片)?是把叶子剪下来?好像侧枝都还不是很大的样子。栽了2个星期了。

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m*r
11
有人用过thermal scientific的这个subcellular protein fractionation kit的么
http://www.piercenet.com/previews/2012-articles/subcellular-pro

【在 B*N 的大作中提到】
: 如果你只想分离膜和cytosol,用0.05%digitonin在细胞上打洞,一离心,cytosol会从
: 细胞内挤出来到buffer中。
: 如果你一定要提plasma membrane,你用220mM蔗糖溶液重悬细胞,然后用针头或者玻璃
: 杵匀浆,通过差速离心,可以分离。但是质膜和内质网分不开。

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f*c
12
长得真好
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r*e
13
顶这个,没错。
其实都不要digitonin,直接上低渗buffer,我用0.1M TrisHCl, no salt。冰上放10分
钟。10万g离心,上清就是cytosol,pellet用含1% Triton 的buffer弄出membrane pro
tein。

【在 B*N 的大作中提到】
: 如果你只想分离膜和cytosol,用0.05%digitonin在细胞上打洞,一离心,cytosol会从
: 细胞内挤出来到buffer中。
: 如果你一定要提plasma membrane,你用220mM蔗糖溶液重悬细胞,然后用针头或者玻璃
: 杵匀浆,通过差速离心,可以分离。但是质膜和内质网分不开。

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y*5
14
re

【在 f*****c 的大作中提到】
: 长得真好
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f*k
15
就是剪侧枝是吗?谢谢

【在 d*******3 的大作中提到】
: 我直接剪的
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x*z
16
主枝也可以啊。
下面留一两个芽点就可以了

★ 发自iPhone App: ChineseWeb 7.8

【在 f***k 的大作中提到】
: 就是剪侧枝是吗?谢谢
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f*k
17
谢谢了。第一次栽空心菜,不太懂哈。

【在 x****z 的大作中提到】
: 主枝也可以啊。
: 下面留一两个芽点就可以了
:
: ★ 发自iPhone App: ChineseWeb 7.8

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d*3
18
我是剪主枝的,这样侧枝就慢慢长大跟主枝一样粗,然后剪侧枝,然后侧侧枝又长大

【在 f***k 的大作中提到】
: 就是剪侧枝是吗?谢谢
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