b*8
2 楼
如题，最近研究一个基因，发现敲掉他之后细胞增殖变慢，p53-p21激活，做flow 看
cell cycle发现有G1/S arrest，虽然统计学p小于0.05，但是看起来很marginal，特别
是转了control siRNA的细胞G1 比例都特别高，达到60%以上，请问这是怎么回事？有
什么好的trick吗？
tips：肝癌细胞株HepG2，转染control/smartpool siNRA targeting a gene 48小时候
收细胞，固定于70%的乙醇。
cell cycle发现有G1/S arrest，虽然统计学p小于0.05，但是看起来很marginal，特别
是转了control siRNA的细胞G1 比例都特别高，达到60%以上，请问这是怎么回事？有
什么好的trick吗？
tips：肝癌细胞株HepG2，转染control/smartpool siNRA targeting a gene 48小时候
收细胞，固定于70%的乙醇。
b*d
3 楼
我觉着上个周末到今天的利率已经很好了。
【在 e********e 的大作中提到】
: 等着lock了。。。
【在 e********e 的大作中提到】
: 等着lock了。。。
a*8
4 楼
这样的数据，统计再有意义，也没有生物意义。purely negative data to me
e*e
5 楼
今天更好吧？
【在 b*d 的大作中提到】
: 我觉着上个周末到今天的利率已经很好了。
【在 b*d 的大作中提到】
: 我觉着上个周末到今天的利率已经很好了。
b*8
6 楼
多谢回复，请问有没有关于细胞周期分析方面的经验分享呢？
【在 a******8 的大作中提到】
: 这样的数据，统计再有意义，也没有生物意义。purely negative data to me
【在 a******8 的大作中提到】
: 这样的数据，统计再有意义，也没有生物意义。purely negative data to me
b*d
7 楼
还没有看到今天的利率表，不过应该和周五查不多。
【在 e********e 的大作中提到】
: 今天更好吧？
【在 e********e 的大作中提到】
: 今天更好吧？
z*i
8 楼
HepG2很难转染，你效率有多少？分析细胞周期的时候你用的是total population还是
只看那些被transfected的细胞周期？
只看那些被transfected的细胞周期？
n*9
9 楼
already this low, what are you going to lose? if it goes even lower, do
another refi. if it moves up, you got a low rate. so it's a win-win.
【在 e********e 的大作中提到】
: 等着lock了。。。
another refi. if it moves up, you got a low rate. so it's a win-win.
【在 e********e 的大作中提到】
: 等着lock了。。。
q*g
10 楼
如果你感兴趣的话，还是sort cells，然后看筛选过的细胞周期。目前你的结果几乎没
有什么变化，尽管统计上小于0.05.另外，我更倾向于用shRNA.
有什么变化，尽管统计上小于0.05.另外，我更倾向于用shRNA.
t*m
11 楼
you cannot re-fi again in 4 months usually
【在 n*******9 的大作中提到】
: already this low, what are you going to lose? if it goes even lower, do
: another refi. if it moves up, you got a low rate. so it's a win-win.
【在 n*******9 的大作中提到】
: already this low, what are you going to lose? if it goes even lower, do
: another refi. if it moves up, you got a low rate. so it's a win-win.
b*8
12 楼
恩
多谢楼上各位，怀疑转染效率不够，但是之前也用过lentiviral shRNA+puromycin
selection的，结果跟这次用siRNA差不多，当时就发现G1的比例很高，怀疑是
puromycin对细胞周期有干扰，所以转用siRNA的，不明白为什么control的时候G1的比
例都那么高
多谢楼上各位，怀疑转染效率不够，但是之前也用过lentiviral shRNA+puromycin
selection的，结果跟这次用siRNA差不多，当时就发现G1的比例很高，怀疑是
puromycin对细胞周期有干扰，所以转用siRNA的，不明白为什么control的时候G1的比
例都那么高
k*e
13 楼
我刚刚锁了一个5/1 ARM 3.0%
貌似你拿到第一个statement以后就可以re-fi，但是4个月之内re-fi的话，帮你做第一
个loan的那个agent的commission会被罚回去很多。
【在 t*m 的大作中提到】
: you cannot re-fi again in 4 months usually
貌似你拿到第一个statement以后就可以re-fi，但是4个月之内re-fi的话，帮你做第一
个loan的那个agent的commission会被罚回去很多。
【在 t*m 的大作中提到】
: you cannot re-fi again in 4 months usually
A*y
14 楼
G1 always looks like that for cancer cell culture in a flask. If you show a
different one, I will simply told you that your control is junk.
【在 b**********8 的大作中提到】
: 恩
: 多谢楼上各位，怀疑转染效率不够，但是之前也用过lentiviral shRNA+puromycin
: selection的，结果跟这次用siRNA差不多，当时就发现G1的比例很高，怀疑是
: puromycin对细胞周期有干扰，所以转用siRNA的，不明白为什么control的时候G1的比
: 例都那么高
different one, I will simply told you that your control is junk.
【在 b**********8 的大作中提到】
: 恩
: 多谢楼上各位，怀疑转染效率不够，但是之前也用过lentiviral shRNA+puromycin
: selection的，结果跟这次用siRNA差不多，当时就发现G1的比例很高，怀疑是
: puromycin对细胞周期有干扰，所以转用siRNA的，不明白为什么control的时候G1的比
: 例都那么高
b*d
15 楼
对，现在大部分的银行都要求6个月了。
【在 k***e 的大作中提到】
: 我刚刚锁了一个5/1 ARM 3.0%
: 貌似你拿到第一个statement以后就可以re-fi，但是4个月之内re-fi的话，帮你做第一
: 个loan的那个agent的commission会被罚回去很多。
【在 k***e 的大作中提到】
: 我刚刚锁了一个5/1 ARM 3.0%
: 貌似你拿到第一个statement以后就可以re-fi，但是4个月之内re-fi的话，帮你做第一
: 个loan的那个agent的commission会被罚回去很多。
m*m
16 楼
Your siRNA might not work well, and some cancer cells (lines) always have
hight G1 if cultured in vitro
Change the cell line or siRNA
【在 b**********8 的大作中提到】
: 如题，最近研究一个基因，发现敲掉他之后细胞增殖变慢，p53-p21激活，做flow 看
: cell cycle发现有G1/S arrest，虽然统计学p小于0.05，但是看起来很marginal，特别
: 是转了control siRNA的细胞G1 比例都特别高，达到60%以上，请问这是怎么回事？有
: 什么好的trick吗？
: tips：肝癌细胞株HepG2，转染control/smartpool siNRA targeting a gene 48小时候
: 收细胞，固定于70%的乙醇。
hight G1 if cultured in vitro
Change the cell line or siRNA
【在 b**********8 的大作中提到】
: 如题，最近研究一个基因，发现敲掉他之后细胞增殖变慢，p53-p21激活，做flow 看
: cell cycle发现有G1/S arrest，虽然统计学p小于0.05，但是看起来很marginal，特别
: 是转了control siRNA的细胞G1 比例都特别高，达到60%以上，请问这是怎么回事？有
: 什么好的trick吗？
: tips：肝癌细胞株HepG2，转染control/smartpool siNRA targeting a gene 48小时候
: 收细胞，固定于70%的乙醇。
d*n
17 楼
不是罚回去很多，是全都罚回去，估计还得赔自己公司点儿损失。
q*g
18 楼
60%G1还成吧，我用的细胞也差不多这个值。生长受到抑制的时候，能到80%。不知道你
是做了几次实验，误差这么小。
或许你可以试试BrdU assay，也是做flow
【在 b**********8 的大作中提到】
: 恩
: 多谢楼上各位，怀疑转染效率不够，但是之前也用过lentiviral shRNA+puromycin
: selection的，结果跟这次用siRNA差不多，当时就发现G1的比例很高，怀疑是
: puromycin对细胞周期有干扰，所以转用siRNA的，不明白为什么control的时候G1的比
: 例都那么高
是做了几次实验，误差这么小。
或许你可以试试BrdU assay，也是做flow
【在 b**********8 的大作中提到】
: 恩
: 多谢楼上各位，怀疑转染效率不够，但是之前也用过lentiviral shRNA+puromycin
: selection的，结果跟这次用siRNA差不多，当时就发现G1的比例很高，怀疑是
: puromycin对细胞周期有干扰，所以转用siRNA的，不明白为什么control的时候G1的比
: 例都那么高
f*x
19 楼
每天都是历史新低
S*e
20 楼
看见你这么说好几次了 "I will simply told you" 应该是tell
提醒一下你的英文语法
a
【在 A******y 的大作中提到】
: G1 always looks like that for cancer cell culture in a flask. If you show a
: different one, I will simply told you that your control is junk.
提醒一下你的英文语法
a
【在 A******y 的大作中提到】
: G1 always looks like that for cancer cell culture in a flask. If you show a
: different one, I will simply told you that your control is junk.
b*d
21 楼
对，起码最近几天是。
【在 f*x 的大作中提到】
: 每天都是历史新低
【在 f*x 的大作中提到】
: 每天都是历史新低
A*y
22 楼
I know, my grammar sucks especially online.
【在 S**********e 的大作中提到】
: 看见你这么说好几次了 "I will simply told you" 应该是tell
: 提醒一下你的英文语法
:
: a
【在 S**********e 的大作中提到】
: 看见你这么说好几次了 "I will simply told you" 应该是tell
: 提醒一下你的英文语法
:
: a
p*b
23 楼
今天比上周五还低吗？15年。今天比上周五还低吗？15年。
b*8
24 楼
没想到这么多朋友回复，谢谢大家的意见和建议
看来主要原因可能是转染效率太低，我准备重复一次这个实验，连续两天转染两次
siRNA，第三天收细胞分析试试看
多谢大家
看来主要原因可能是转染效率太低，我准备重复一次这个实验，连续两天转染两次
siRNA，第三天收细胞分析试试看
多谢大家
b*d
25 楼
今天的利率涨上去了，15年不如上周五的。
【在 p*****b 的大作中提到】
: 今天比上周五还低吗？15年。今天比上周五还低吗？15年。
【在 p*****b 的大作中提到】
: 今天比上周五还低吗？15年。今天比上周五还低吗？15年。
c*r
26 楼
这data，不就是没有差别么？
转染率多少？超过50%就别做了，没意义
【在 b**********8 的大作中提到】
: 如题，最近研究一个基因，发现敲掉他之后细胞增殖变慢，p53-p21激活，做flow 看
: cell cycle发现有G1/S arrest，虽然统计学p小于0.05，但是看起来很marginal，特别
: 是转了control siRNA的细胞G1 比例都特别高，达到60%以上，请问这是怎么回事？有
: 什么好的trick吗？
: tips：肝癌细胞株HepG2，转染control/smartpool siNRA targeting a gene 48小时候
: 收细胞，固定于70%的乙醇。
转染率多少？超过50%就别做了，没意义
【在 b**********8 的大作中提到】
: 如题，最近研究一个基因，发现敲掉他之后细胞增殖变慢，p53-p21激活，做flow 看
: cell cycle发现有G1/S arrest，虽然统计学p小于0.05，但是看起来很marginal，特别
: 是转了control siRNA的细胞G1 比例都特别高，达到60%以上，请问这是怎么回事？有
: 什么好的trick吗？
: tips：肝癌细胞株HepG2，转染control/smartpool siNRA targeting a gene 48小时候
: 收细胞，固定于70%的乙醇。
p*b
27 楼
谢谢Bed,10年的和上周五比呢？多少
r*s
28 楼
搭车请教：怎么测siRNA转染效率？唯有sort?
谢谢
谢谢
b*d
29 楼
也比周五涨了,$350K以上的Loan可以做到3.5% No cost Refinance。
【在 p*****b 的大作中提到】
: 谢谢Bed,10年的和上周五比呢？多少
【在 p*****b 的大作中提到】
: 谢谢Bed,10年的和上周五比呢？多少
q*g
30 楼
他前边说“发现敲掉他之后细胞增殖变慢，p53-p21激活”，为了证明p21激活，他必须
看看cell cycle。
【在 c******r 的大作中提到】
: 这data，不就是没有差别么？
: 转染率多少？超过50%就别做了，没意义
看看cell cycle。
【在 c******r 的大作中提到】
: 这data，不就是没有差别么？
: 转染率多少？超过50%就别做了，没意义
m*n
31 楼
还会跌不？
被loan agent push叫我们今天lock呢
【在 b*d 的大作中提到】
: 今天的利率涨上去了，15年不如上周五的。
被loan agent push叫我们今天lock呢
【在 b*d 的大作中提到】
: 今天的利率涨上去了，15年不如上周五的。
a*a
32 楼
no si的细胞G1 phase是多少？
b*d
33 楼
我觉得明天的利息会比今天好.
【在 m********n 的大作中提到】
: 还会跌不？
: 被loan agent push叫我们今天lock呢
【在 m********n 的大作中提到】
: 还会跌不？
: 被loan agent push叫我们今天lock呢
a*n
34 楼
原来如此，难怪我之前用HELA cell看到很不正常的细胞周期
a
【在 A******y 的大作中提到】
: G1 always looks like that for cancer cell culture in a flask. If you show a
: different one, I will simply told you that your control is junk.
a
【在 A******y 的大作中提到】
: G1 always looks like that for cancer cell culture in a flask. If you show a
: different one, I will simply told you that your control is junk.
h*n
35 楼
G1/G0这个比例很正常.
【在 b**********8 的大作中提到】
: 如题，最近研究一个基因，发现敲掉他之后细胞增殖变慢，p53-p21激活，做flow 看
: cell cycle发现有G1/S arrest，虽然统计学p小于0.05，但是看起来很marginal，特别
: 是转了control siRNA的细胞G1 比例都特别高，达到60%以上，请问这是怎么回事？有
: 什么好的trick吗？
: tips：肝癌细胞株HepG2，转染control/smartpool siNRA targeting a gene 48小时候
: 收细胞，固定于70%的乙醇。
【在 b**********8 的大作中提到】
: 如题，最近研究一个基因，发现敲掉他之后细胞增殖变慢，p53-p21激活，做flow 看
: cell cycle发现有G1/S arrest，虽然统计学p小于0.05，但是看起来很marginal，特别
: 是转了control siRNA的细胞G1 比例都特别高，达到60%以上，请问这是怎么回事？有
: 什么好的trick吗？
: tips：肝癌细胞株HepG2，转染control/smartpool siNRA targeting a gene 48小时候
: 收细胞，固定于70%的乙醇。
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