请教大家一个载体连接的问题 - 未名空间MITBBS历史存档

请教大家一个载体连接的问题

请教大家一个载体连接的问题# Biology - 生物学

l*a2013-12-23 08:12

1 楼

【以下文字转载自 Wisdom 讨论区】
发信人: wisdomlover ((wisdom)), 信区: Wisdom
标题: Re: [版务]Wisdom版慎用词列表讨论贴
发信站: BBS 未名空间站 (Fri Feb 11 23:35:32 2011, 美东)
粉丝奶奶。

p*r2013-12-23 08:12

2 楼

最近本人在将一个6000-8000bp连接到pcDNA 3.1（+）(5400bp)中去, 使用普通的连接
酶至今都没有连接进去，真心向各位大虾请教，大家通常如何使用什么神奇的连接方法
和kit,thanks a lot

r*a2013-12-23 08:12

3 楼

我觉得联接酶，应该不会有什么问题的，常用的T4，至少我连6000片段到8000载体没有
什么问题。
你看看前面的步骤，酶切位点有没有特殊性，切没有切好（保护碱基啊），我觉得初问
题可能性更大

【在 p*******r 的大作中提到】

: 最近本人在将一个6000-8000bp连接到pcDNA 3.1（+）(5400bp)中去, 使用普通的连接
: 酶至今都没有连接进去，真心向各位大虾请教，大家通常如何使用什么神奇的连接方法
: 和kit,thanks a lot

s*o2013-12-23 08:12

4 楼

要trouble shooting就很费工了。insert和backbone的compatibility，目的籽粒和宿
主菌的compatibility都有可能会影响结果。

2024-01-28 18:01

2024-01-09 19:01

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