I am dealing with a gene with incomplete 5' CDS. 5.5kb 3' CDS already known. Need to RACE 5' end (~5kb left). Does anyone have a good kit to recommend for long cDNA synthesis and 5'RACE? many thanks,
c*8
4 楼
CITI FORWARD还能被拒。。。还是不要试了。。
S*e
5 楼
re
g*e
6 楼
是啊 不知是RP问题还是有什么硬伤。我都无语
Z*5
7 楼
用invitrogen的这个kit 5' RACE System for Rapid Amplification of cDNA Ends, version 2.0 说明书上说貌似50min反转录4kb没问题。 我之前做大约10kb的,反转录2个小时,结果 很好。 不过我那个基因表达丰度非常高。如果表达丰度很低的,不知道效果会如何。 另外,建议在预测的TSS后面1-2kb的地方同时设计一个引物做5'RACE, 看看和你从 11kb的位置拉出来的是不是同一个起始位点。