polysome profiling vs ribosome profiling 有什么区别啊?# Biology - 生物学o*42014-04-07 07:041 楼我有个蛋白对于ribosome biogenesis有影响,怎么检测这种影响呢?哪个protocol更好呢?不知道这两个protocol有什么区别呢?谢谢
m*u2014-04-07 07:042 楼这是大小概念的意思吧。后者包含前者。ribosome profile,前面的fraction就是ribosome 独立的大、小亚基,中间是monosome,后面的fraction就是polysome了。这个profileing使用来检测活性翻译的mRNA的,所以叫profiling。我看过你另外的那个帖子了,这个方法不是你想要的。你要的是核糖体活性差异,而不是mRNA的tanslatiblity的差异。你再想想其他办法,或者至少要多这个方法做些modification。
m*u2014-04-07 07:043 楼对你那个帖子的问题就问的很好。这么检测ribosome的含量和活性。ribosomeprofiling有点太间接了。对照不仅仅是loading的总蛋白量或总RNA量,我觉得细胞数才是重要的。因为我在那个回帖中说了,核糖体数目或活性受到影响细胞生长会受到影响。细想,比用总蛋白或总RNA做profiling,得到的pattern完全一致也是可能的。但你用相同细胞数来作核糖体蛋白滴定,核糖体少的当然就是信号弱了,一个WB或一个northern试验就够了。
o*42014-04-07 07:044 楼“但你用相同细胞数来作核糖体蛋白滴定”这个咋做简单? WB没问题, northern 有点麻烦啊【在 m******u 的大作中提到】: 对你那个帖子的问题就问的很好。这么检测ribosome的含量和活性。ribosome: profiling有点太间接了。对照不仅仅是loading的总蛋白量或总RNA量,我觉得细胞数: 才是重要的。因为我在那个回帖中说了,核糖体数目或活性受到影响细胞生长会受到影: 响。细想,比用总蛋白或总RNA做profiling,得到的pattern完全一致也是可能的。但: 你用相同细胞数来作核糖体蛋白滴定,核糖体少的当然就是信号弱了,一个WB或一个: northern试验就够了。