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请教大家一个knockdown的问题
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请教大家一个knockdown的问题# Biology - 生物学
r*t
1
我想knock down 293细胞里的基因,transient knock down就可以
请问大家用哪个公司的产品好? 什么方法能有最高效的knock down?
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g*5
2
lipofectamine RNAimax, low concentration(10nM) siRNA pool target to your
gene.
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r*t
3
多谢!这个效率如何?能有90%以上的细胞被knock down吗?
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a*n
4
这个不错,转然效率应该是很高的,KD效率取决于siRNA的效果
顺便问一下,大家一般用哪个control siRNA做negative control啊?我发现control
siRNA经常对细胞也有不同的影响,比如我试了一个公司的3个control siRNA在
luciferase assay中,发现他们3个的数值还相差比较多

【在 g*********5 的大作中提到】
: lipofectamine RNAimax, low concentration(10nM) siRNA pool target to your
: gene.

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w*a
5
很多paper里面都给了scramble siRNA序列吧。
不过你也都得试了才知道。

【在 a*****n 的大作中提到】
: 这个不错,转然效率应该是很高的,KD效率取决于siRNA的效果
: 顺便问一下,大家一般用哪个control siRNA做negative control啊?我发现control
: siRNA经常对细胞也有不同的影响,比如我试了一个公司的3个control siRNA在
: luciferase assay中,发现他们3个的数值还相差比较多

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f*f
6
你的luciferase readout 稳定么?至少要保证同种control不同实验数值基本一致,跟
不转sirna 样品相比如何? 假如是跟reporter共转之类的话另说。

【在 a*****n 的大作中提到】
: 这个不错,转然效率应该是很高的,KD效率取决于siRNA的效果
: 顺便问一下,大家一般用哪个control siRNA做negative control啊?我发现control
: siRNA经常对细胞也有不同的影响,比如我试了一个公司的3个control siRNA在
: luciferase assay中,发现他们3个的数值还相差比较多

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g*5
7
It depends...

【在 r*****t 的大作中提到】
: 多谢!这个效率如何?能有90%以上的细胞被knock down吗?
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