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SDS-PAGE电泳marker总是跑外8字
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W*r
2
海归大熊猫苏琳完成自然交配
3月15日,熊猫“苏琳”(左)和“武岗”在进行自然交配。当日,在卧龙中国保护大
熊猫研究中心四川雅安碧峰峡基地,雌性大熊猫“苏琳”与雄性大熊猫“武岗”顺利完
成自然交配,这是5岁多的“苏琳”第一次配种。
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d*i
3
用的是biorad precast TGX gel。有什么办法能跑的端端正正?
另外,小分子量好像很虚,虽然是4-20%的gel,有什么办法改进?
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e*n
4
时间跑得嗖嗖的
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T*t
5
在marker两边的空lane里也加Loading buffer,然后再跑胶。
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f*9
6
怕啥?
怕老?

【在 t*******t 的大作中提到】
: 怕
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d*i
7

谢谢回复!marker两边再没有了。。。。。

【在 T**********t 的大作中提到】
: 在marker两边的空lane里也加Loading buffer,然后再跑胶。
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n*w
8
换产品
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s*g
9
12% 的胶这个问题不明显。
另外你的电压是多少?
每次跑一块还是两块胶?
我个人觉得他们4-20%的梯度胶质量不过关。有时候到下面小分子量的地方,蛋白带都
会出现曲线(不是平行的。)或有的lane就跑不下去了,而又得lane跑得还挺快。
所以近来只用他们的12%胶。但有时也会出现一小片空白(不出带)--我认为这和他们
去年底开始抽真空保存有关。以前不抽真空,就没有这要蛾子的事情。

【在 d****i 的大作中提到】
: 用的是biorad precast TGX gel。有什么办法能跑的端端正正?
: 另外,小分子量好像很虚,虽然是4-20%的gel,有什么办法改进?

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a*e
10
确实,他们这个gel配的操蛋了。
自己配胶跑的比公司的好太多了

【在 s*****g 的大作中提到】
: 12% 的胶这个问题不明显。
: 另外你的电压是多少?
: 每次跑一块还是两块胶?
: 我个人觉得他们4-20%的梯度胶质量不过关。有时候到下面小分子量的地方,蛋白带都
: 会出现曲线(不是平行的。)或有的lane就跑不下去了,而又得lane跑得还挺快。
: 所以近来只用他们的12%胶。但有时也会出现一小片空白(不出带)--我认为这和他们
: 去年底开始抽真空保存有关。以前不抽真空,就没有这要蛾子的事情。

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d*i
11
我用的是midi的box,没法自己配啊。
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d*i
12

电压是120V,每次两块胶。

【在 s*****g 的大作中提到】
: 12% 的胶这个问题不明显。
: 另外你的电压是多少?
: 每次跑一块还是两块胶?
: 我个人觉得他们4-20%的梯度胶质量不过关。有时候到下面小分子量的地方,蛋白带都
: 会出现曲线(不是平行的。)或有的lane就跑不下去了,而又得lane跑得还挺快。
: 所以近来只用他们的12%胶。但有时也会出现一小片空白(不出带)--我认为这和他们
: 去年底开始抽真空保存有关。以前不抽真空,就没有这要蛾子的事情。

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s*r
13
如果ladder是gel ready的话,当它是个样品里面也加点你的sample buffer

【在 d****i 的大作中提到】
:
: 电压是120V,每次两块胶。

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n*d
14
别折腾了,gradient gel 就是这样,没办法。
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Z*5
15
1.外面的电泳液没加满
2.胶下面-玻璃板之间的空气排干净
3.换个好的电泳槽试试
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d*i
16

下次试一试。谢谢!

【在 s******r 的大作中提到】
: 如果ladder是gel ready的话,当它是个样品里面也加点你的sample buffer
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d*i
17

1. 外面没加满基本上也没差别了。
2. 下次仔细看看。
3. 电泳槽子是biorad midi的新槽子,应该没问题。谢谢!

【在 Z******5 的大作中提到】
: 1.外面的电泳液没加满
: 2.胶下面-玻璃板之间的空气排干净
: 3.换个好的电泳槽试试

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s*s
18
梯度胶?跑多了就这样

【在 d****i 的大作中提到】
: 用的是biorad precast TGX gel。有什么办法能跑的端端正正?
: 另外,小分子量好像很虚,虽然是4-20%的gel,有什么办法改进?

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m*f
19
蛋白上样少点试试!
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g*5
20
4-12% Bistris Gel.
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d*i
21
非常感谢楼上所有朋友!我会逐一试试大家说的办法看有没有改进。
和biorad的技术支持联系了,他们没有什么帮助性的建议,只是给换了一批新胶。
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s*g
22
大家知道么?除了Bio-Rad的ready gel可以50ul/well,其他公司的胶每孔能上那么大
甚至更大体积的样么?
如果有我想试试。因为Bio-Rad的ready gel质量越来越糟。。。
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d*i
23
做precasting gel的除了biorad和invitrogen还有哪个公司啊?好像没有了。
我用的是midi的box,都想自己配胶了,就是没找到合适配套的玻璃板子。
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f*a
24
我用的invitrogen的整套western系统,包括precast的gel,觉得非常好,带型也perfect
,没有遇到过问题。而且操作也挺简单,何不试试invitrogen。
以前我用过biorad,自己用玻璃板子做的gel,也不错。你这种情况我还没有遇见过。
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s*g
25
以前也用invitrogen的胶。可他们上样量少(25uL)而且胶只能保存3个月。过期就得
扔。
另外跑胶和transfer时间也比biorad的长。

perfect

【在 f*******a 的大作中提到】
: 我用的invitrogen的整套western系统,包括precast的gel,觉得非常好,带型也perfect
: ,没有遇到过问题。而且操作也挺简单,何不试试invitrogen。
: 以前我用过biorad,自己用玻璃板子做的gel,也不错。你这种情况我还没有遇见过。

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s*n
26
Invitrogen 的gel我们一直用,非梯度胶保存一年左右没问题,剃度胶没用过
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