f*j
2 楼
原来的吸尘器好像不为宠物家庭设计的 每次吸地只能把埋在地毯里面的狗毛吸到表面
上来 然后地毯看上去更脏了的样子
好像有一种吸尘器是专门给宠物毛设计的 有用的好的牌子请同学们推荐一下吧 多谢
如果有人可以教我怎么发包子的话 我尽量包子答谢
上来 然后地毯看上去更脏了的样子
好像有一种吸尘器是专门给宠物毛设计的 有用的好的牌子请同学们推荐一下吧 多谢
如果有人可以教我怎么发包子的话 我尽量包子答谢
x*e
3 楼
最近构建了几个12k的construct, 小提酶切检验送测序都没问题。但当我想做中提就死
活做不出。目前troubleshooting的结果是做50-100ml的overnight culture质粒就会降
结解。有人遇到过类似的情况吗?有没有好的解决方法?
活做不出。目前troubleshooting的结果是做50-100ml的overnight culture质粒就会降
结解。有人遇到过类似的情况吗?有没有好的解决方法?
g*0
4 楼
I want to be a billionaire.
I want rainbows and unicorns, too.
I want rainbows and unicorns, too.
x*o
7 楼
miele跟Dyson比哪个更强大啊
a*d
8 楼
isopropanol precipitation -20度 overnight, then spin down
x*o
9 楼
i*l
14 楼
见过这种(2例)
1.路霉素扩增质粒不扩增细菌
2用小管(同楼上) 或者固体平板长,平板长完了刮下来细菌用
1.路霉素扩增质粒不扩增细菌
2用小管(同楼上) 或者固体平板长,平板长完了刮下来细菌用
p*f
15 楼
I like Miele for its quietness and cleanliness. The turbo power tool works
extremely well with carpet as well as floors. However, the smaller
attachments do not have the extra power that only comes with the turbo power
tool. So when it comes to clean hair off of the cat tree, I still have to
use the old sticky roller.
【在 m***h 的大作中提到】
: of course Miele
extremely well with carpet as well as floors. However, the smaller
attachments do not have the extra power that only comes with the turbo power
tool. So when it comes to clean hair off of the cat tree, I still have to
use the old sticky roller.
【在 m***h 的大作中提到】
: of course Miele
t*u
17 楼
对付tile有推荐吗?
c*d
19 楼
My experience:
Dyson dc25 is great for bigger house but above your budget ($200-$300).
Dyson dc24 may be ok if you have smaller space and cheaper. sometimes Frys
have old model Dyson dc17 refurbished. The best deal is to check target
clearance if you are not in rush. I did not get the animal model (which has
an additional accessory for $$$)
Hoover windtunnel is also great (below $100) but only for the first six months or so then
lose suction.
【在 f********j 的大作中提到】
: 原来的吸尘器好像不为宠物家庭设计的 每次吸地只能把埋在地毯里面的狗毛吸到表面
: 上来 然后地毯看上去更脏了的样子
: 好像有一种吸尘器是专门给宠物毛设计的 有用的好的牌子请同学们推荐一下吧 多谢
: 如果有人可以教我怎么发包子的话 我尽量包子答谢
Dyson dc25 is great for bigger house but above your budget ($200-$300).
Dyson dc24 may be ok if you have smaller space and cheaper. sometimes Frys
have old model Dyson dc17 refurbished. The best deal is to check target
clearance if you are not in rush. I did not get the animal model (which has
an additional accessory for $$$)
Hoover windtunnel is also great (below $100) but only for the first six months or so then
lose suction.
【在 f********j 的大作中提到】
: 原来的吸尘器好像不为宠物家庭设计的 每次吸地只能把埋在地毯里面的狗毛吸到表面
: 上来 然后地毯看上去更脏了的样子
: 好像有一种吸尘器是专门给宠物毛设计的 有用的好的牌子请同学们推荐一下吧 多谢
: 如果有人可以教我怎么发包子的话 我尽量包子答谢
m*u
21 楼
$100以下,推荐eureka,带pet字样的款,walmart就有。我当年买的也就60块吧,都用
了3年多了,还是很好用。
了3年多了,还是很好用。
f*j
23 楼
Thanks a lot.
I only got a small apartment, so I guess the dc24 should be enough for me
has
months or so then
【在 c********d 的大作中提到】
: My experience:
: Dyson dc25 is great for bigger house but above your budget ($200-$300).
: Dyson dc24 may be ok if you have smaller space and cheaper. sometimes Frys
: have old model Dyson dc17 refurbished. The best deal is to check target
: clearance if you are not in rush. I did not get the animal model (which has
: an additional accessory for $$$)
: Hoover windtunnel is also great (below $100) but only for the first six months or so then
: lose suction.
I only got a small apartment, so I guess the dc24 should be enough for me
has
months or so then
【在 c********d 的大作中提到】
: My experience:
: Dyson dc25 is great for bigger house but above your budget ($200-$300).
: Dyson dc24 may be ok if you have smaller space and cheaper. sometimes Frys
: have old model Dyson dc17 refurbished. The best deal is to check target
: clearance if you are not in rush. I did not get the animal model (which has
: an additional accessory for $$$)
: Hoover windtunnel is also great (below $100) but only for the first six months or so then
: lose suction.
r*k
29 楼
我maxiprep的时候遇到过类似情况,miniprep没问题,但是maxiprep出来的consturct
,transfect到细胞里面的时候就是表达不出蛋白。后来发现可能是maxiprep的时候用
枪吹的太剧烈了,导致dna被切断了,跑胶的时候很多弥散。
,transfect到细胞里面的时候就是表达不出蛋白。后来发现可能是maxiprep的时候用
枪吹的太剧烈了,导致dna被切断了,跑胶的时候很多弥散。
r*n
30 楼
我遇到过好多次很类似的情况,应该是construct某种原因不稳定或者有一定毒性。我
出现问题的construct里面共同点是有很多loxP site,还有很多别的重复的sequence。
Culture总是无法扩大。没有这些序列的载体就没什么问题。最后合并了多个小culture
来提高产量。另外我的经验是这些construct在耐受性好的细胞里稳定些,比如NEB的5-
alpha F'Iq或者Invitrogen的stbl cell。
【在 x********e 的大作中提到】
: 最近构建了几个12k的construct, 小提酶切检验送测序都没问题。但当我想做中提就死
: 活做不出。目前troubleshooting的结果是做50-100ml的overnight culture质粒就会降
: 结解。有人遇到过类似的情况吗?有没有好的解决方法?
出现问题的construct里面共同点是有很多loxP site,还有很多别的重复的sequence。
Culture总是无法扩大。没有这些序列的载体就没什么问题。最后合并了多个小culture
来提高产量。另外我的经验是这些construct在耐受性好的细胞里稳定些,比如NEB的5-
alpha F'Iq或者Invitrogen的stbl cell。
【在 x********e 的大作中提到】
: 最近构建了几个12k的construct, 小提酶切检验送测序都没问题。但当我想做中提就死
: 活做不出。目前troubleshooting的结果是做50-100ml的overnight culture质粒就会降
: 结解。有人遇到过类似的情况吗?有没有好的解决方法?
m*z
32 楼
S*a
34 楼
我刚遇到类似的问题解决了,希望解决方案对你有帮助。
我的质粒表达hairpin shRNA,对细菌有毒性。涂板的时候克隆长出来没有问题,但是摇
菌的时候长的不好,拿到的质粒dna浓度很稀。
我是买来的质粒,所以打电话问了公司客服。他们建议:
1.用 terrific broth (TB)而不是普通LB摇菌;
2.用 carbenicillin,不要用Ampicillin (如果你的细菌是amp抗性的话);
3.如果还不行,可以尝试room temperature 摇菌两到三天。
我的问题换了TB就解决了,祝你好运!
我的质粒表达hairpin shRNA,对细菌有毒性。涂板的时候克隆长出来没有问题,但是摇
菌的时候长的不好,拿到的质粒dna浓度很稀。
我是买来的质粒,所以打电话问了公司客服。他们建议:
1.用 terrific broth (TB)而不是普通LB摇菌;
2.用 carbenicillin,不要用Ampicillin (如果你的细菌是amp抗性的话);
3.如果还不行,可以尝试room temperature 摇菌两到三天。
我的问题换了TB就解决了,祝你好运!
l*g
38 楼
质粒不稳定,size down了,降低温度到30度过夜,应该可以解决问题
l*g
39 楼
病毒载体这种情况也不少,我用30度长过夜解决问题。换Stabl3或者4对于我的经验是
效果有限。
效果有限。
q*7
41 楼
E*i
42 楼
EPI400试试吧
或者PCR整个质粒
或者PCR整个质粒
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