doxycycline induction - 未名空间MITBBS历史存档

doxycycline induction# Biology - 生物学

b*j2014-10-23 07:10

1 楼

s*o2014-10-23 07:10

2 楼

如题

i*i2014-10-23 07:10

3 楼

主板自带声卡。。。还没开机箱怕把warranty废了。
机箱前面耳机口有声音，后面没有。
显卡HDMI不能传声音，blue tooth可以和音箱pair，但是没有声音。
如果把声卡disable， HDMI和Bluetooth 恢复正常，当然耳机口就不work了。。。
抓耳挠腮求解。。。

s*g2014-10-23 07:10

4 楼

最近接手个project.
已经有shRNA转入细胞，抗生素筛选已成。需要doxycycline induction去减少一个蛋白。
没用过doxycycline induction。
1。doxycycline都用那个公司产品?Cat#是什么？用什么试剂配母液？
2。doxycycline induces多长时间（1天？2天？。。。）才能有反应，从而进行后续试
验？
3。doxycycline induction是在regular medium里进行，还是serum free medium里进
行。
谢谢！

z*i2014-10-23 07:10

5 楼

万字

【在 s*******o 的大作中提到】

: 如题

a92014-10-23 07:10

6 楼

选一下默认声音设备试试

【在 i********i 的大作中提到】

: 主板自带声卡。。。还没开机箱怕把warranty废了。
: 机箱前面耳机口有声音，后面没有。
: 显卡HDMI不能传声音，blue tooth可以和音箱pair，但是没有声音。
: 如果把声卡disable， HDMI和Bluetooth 恢复正常，当然耳机口就不work了。。。
: 抓耳挠腮求解。。。

m*D2014-10-23 07:10

7 楼

你用tetoff还是teton系统？off系统是shut down transcription，作mRNA decay,30分
钟就够了。要on系统，则要等protein出来，你得看看最好时间。我们一般是24小时。
doxicycline你在sigma可以买。找tissue culture级别的。也可以买水溶液。直接加
medium里。

白。

【在 s*****g 的大作中提到】

: 最近接手个project.
: 已经有shRNA转入细胞，抗生素筛选已成。需要doxycycline induction去减少一个蛋白。
: 没用过doxycycline induction。
: 1。doxycycline都用那个公司产品?Cat#是什么？用什么试剂配母液？
: 2。doxycycline induces多长时间（1天？2天？。。。）才能有反应，从而进行后续试
: 验？
: 3。doxycycline induction是在regular medium里进行，还是serum free medium里进
: 行。
: 谢谢！

l*s2014-10-23 07:10

8 楼

韩国酱油

k*02014-10-23 07:10

9 楼

独立显卡的话除非显卡上自带声卡或者有接SPDIF passthrough from sound card, 否
则是没有声音的。

【在 i********i 的大作中提到】

: 主板自带声卡。。。还没开机箱怕把warranty废了。
: 机箱前面耳机口有声音，后面没有。
: 显卡HDMI不能传声音，blue tooth可以和音箱pair，但是没有声音。
: 如果把声卡disable， HDMI和Bluetooth 恢复正常，当然耳机口就不work了。。。
: 抓耳挠腮求解。。。

s*g2014-10-23 07:10

10 楼

thanks a lot!

【在 m*********D 的大作中提到】

: 你用tetoff还是teton系统？off系统是shut down transcription，作mRNA decay,30分
: 钟就够了。要on系统，则要等protein出来，你得看看最好时间。我们一般是24小时。
: doxicycline你在sigma可以买。找tissue culture级别的。也可以买水溶液。直接加
: medium里。
:
: 白。

s*l2014-10-23 07:10

11 楼

万家香淡酱油。一直想换没找到合适的。谁给推荐个好的淡酱油？

a92014-10-23 07:10

12 楼

那是多古老的传说了

【在 k**0 的大作中提到】

: 独立显卡的话除非显卡上自带声卡或者有接SPDIF passthrough from sound card, 否
: 则是没有声音的。

s*g2014-10-23 07:10

13 楼

Doxycycline hyclate
http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/sigma/d9891?lang=en
Doxycycline Hydrochloride, Ready Made Solution
http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/sigma/d3072?lang=en
Both are OK, right?
I think my system is Tet-on. I will try 24h DOX treatment at first.
Thanks a lot!

【在 m*********D 的大作中提到】

: 你用tetoff还是teton系统？off系统是shut down transcription，作mRNA decay,30分
: 钟就够了。要on系统，则要等protein出来，你得看看最好时间。我们一般是24小时。
: doxicycline你在sigma可以买。找tissue culture级别的。也可以买水溶液。直接加
: medium里。
:
: 白。

f*42014-10-23 07:10

14 楼

酱青用万字的，老抽用金兰的。以前老抽用珠江桥，后来看到一帖说是兑的就没用了。
去亚洲超市买酱油，最恨标签全是soya sauce而不区别老抽生抽。
韩国酱油没有用过，不知道好吗

a*e2014-10-23 07:10

15 楼

先更新driver
这年头声卡都是Realtek吧，还没见过有问题的

★ 发自iPhone App: ChineseWeb 1.0.6

【在 i********i 的大作中提到】

: 主板自带声卡。。。还没开机箱怕把warranty废了。
: 机箱前面耳机口有声音，后面没有。
: 显卡HDMI不能传声音，blue tooth可以和音箱pair，但是没有声音。
: 如果把声卡disable， HDMI和Bluetooth 恢复正常，当然耳机口就不work了。。。
: 抓耳挠腮求解。。。

m*D2014-10-23 07:10

16 楼

We bought D9891-5g, made water solution at 10 mg/ml, and filtered through 0.
22 um before adding into medium.

【在 s*****g 的大作中提到】

: Doxycycline hyclate
: http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/sigma/d9891?lang=en
: Doxycycline Hydrochloride, Ready Made Solution
: http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/sigma/d3072?lang=en
: Both are OK, right?
: I think my system is Tet-on. I will try 24h DOX treatment at first.
: Thanks a lot!

B*n2014-10-23 07:10

17 楼

我都用李锦记，只是因为在纽约有公司，比较放心点进货渠道

k*02014-10-23 07:10

18 楼

我3年前NVIDIA的卡都没有，ATI all in one一直都有。
但on board的都是crap. 随表搞张sound blaster都比it好，所以要SPDIF pass
through.

【在 a9 的大作中提到】

: 那是多古老的传说了

s*g2014-10-23 07:10

19 楼

非常感谢。昨天我根据你的建议，上网查，没有舍得买他们的液体，定了D9891-1g, 看
来我订对了！
他们的液体也是在DMSO里溶的。
既然你们已经可以用水溶，我也用水溶，这样对细胞伤害小些。
水溶的信息很重要。太感谢了！
另外，母液存放的多少度？-20C还是4C？谢谢！

B*d2014-10-23 07:10

20 楼

李锦记
偶尔也买买日本的organic生抽

【在 s*******o 的大作中提到】

: 如题

a92014-10-23 07:10

21 楼

不用来解码的话应该都差不多。
现在新的hdmi还是只能传两声道的raw声音吗？

【在 k**0 的大作中提到】

: 我3年前NVIDIA的卡都没有，ATI all in one一直都有。
: 但on board的都是crap. 随表搞张sound blaster都比it好，所以要SPDIF pass
: through.

m*D2014-10-23 07:10

22 楼

Water soluble--you can find the information with the compound, up to 50 mg/
ml.
However, we generally make 10 mg/ml.
We keep water solution at -20. For how long? I have no idea.:(. At least a
few months should be ok.

p*y2014-10-23 07:10

23 楼

李锦记

k*02014-10-23 07:10

24 楼

不是早就可以传杜比数码了吗。这么搞的人一般都是用家庭影院的。

【在 a9 的大作中提到】

: 不用来解码的话应该都差不多。
: 现在新的hdmi还是只能传两声道的raw声音吗？

s*g2014-10-23 07:10

25 楼

你们在引发TET-ON一天后就有蛋白水平反应
那么再用药物处理细胞时，是否还要让DOX和处理的药物共存在培养基中？
DOX如果处理一周，细胞会死亡么？
针对你们的细胞，DOX的浓度是多少？
谢谢！

【在 m*********D 的大作中提到】

: Water soluble--you can find the information with the compound, up to 50 mg/
: ml.
: However, we generally make 10 mg/ml.
: We keep water solution at -20. For how long? I have no idea.:(. At least a
: few months should be ok.

l*h2014-10-23 07:10

26 楼

李锦记

a92014-10-23 07:10

27 楼

杜比数码解码的任务在家庭影院，好声卡坏声卡都一样的

【在 k**0 的大作中提到】

: 不是早就可以传杜比数码了吗。这么搞的人一般都是用家庭影院的。

m*D2014-10-23 07:10

28 楼

Right. For tet-on system (in stable cell line), we even test different dox
concentration to see our protein expression level. Higher dox does induce
more our protein expression. So if you prefer a certainly level, you may
have to test.
yes.
Never tried that long. 2 days with 2 ug/ml would not kill 293 cells at my
hands. Dox has low toxicity to mammalian cells. I think it might be ok.
However, I would suggest you to test dox alone.
1-5 ug/ml is recommended. I myself used 2 ug/ml for tet-off system. For tet-
on system, the protein expression level might related to your dox amount. so
you better test.

s*o2014-10-23 07:10

29 楼

同求

【在 s****l 的大作中提到】

: 万家香淡酱油。一直想换没找到合适的。谁给推荐个好的淡酱油？

k*02014-10-23 07:10

30 楼

你肯定？比如游戏是5.1 杜比数码的，你的声卡无法解码自然也无法送信号去receiver
[在 a9 (嗯) 的大作中提到：]
:杜比数码解码的任务在家庭影院，好声卡坏声卡都一样的

s*g2014-10-23 07:10

31 楼

非常感谢赐教！
等订货一来，就要开工了！

t*72014-10-23 07:10

32 楼

李锦记鲜味生抽、李锦记草菇老抽
偶尔断粮了又没时间去中国超市，就去美国超市买日本酱油KIKKOMAN

i*i2014-10-23 07:10

33 楼

多谢。。。确实是这个问题。。。声卡设备居然有四个。。。

【在 a9 的大作中提到】

: 选一下默认声音设备试试

s*g2014-10-23 07:10

34 楼

最近接手个project.
已经有shRNA转入细胞，抗生素筛选已成。需要doxycycline induction去减少一个蛋白。
没用过doxycycline induction。
1。doxycycline都用那个公司产品?Cat#是什么？用什么试剂配母液？
2。doxycycline induces多长时间（1天？2天？。。。）才能有反应，从而进行后续试
验？
3。doxycycline induction是在regular medium里进行，还是serum free medium里进
行。
谢谢！

b*g2014-10-23 07:10

35 楼

一直用李锦记的各种酱油，都很好。
搭车问下，李锦记里的蚝油好几个品种，哪种最好吃啊？

a92014-10-23 07:10

36 楼

游戏不清楚，电影都是这样的。
游戏得看游戏生成的是什么编码

receiver

【在 k**0 的大作中提到】

: 你肯定？比如游戏是5.1 杜比数码的，你的声卡无法解码自然也无法送信号去receiver
: [在 a9 (嗯) 的大作中提到：]
: :杜比数码解码的任务在家庭影院，好声卡坏声卡都一样的

m*D2014-10-23 07:10

37 楼

你用tetoff还是teton系统？off系统是shut down transcription，作mRNA decay,30分
钟就够了。要on系统，则要等protein出来，你得看看最好时间。我们一般是24小时。
doxicycline你在sigma可以买。找tissue culture级别的。也可以买水溶液。直接加
medium里。

白。

【在 s*****g 的大作中提到】

: 最近接手个project.
: 已经有shRNA转入细胞，抗生素筛选已成。需要doxycycline induction去减少一个蛋白。
: 没用过doxycycline induction。
: 1。doxycycline都用那个公司产品?Cat#是什么？用什么试剂配母液？
: 2。doxycycline induces多长时间（1天？2天？。。。）才能有反应，从而进行后续试
: 验？
: 3。doxycycline induction是在regular medium里进行，还是serum free medium里进
: 行。
: 谢谢！

j*u2014-10-23 07:10

38 楼

请问一下，老抽生抽哪个更咸？

【在 f*****4 的大作中提到】

: 酱青用万字的，老抽用金兰的。以前老抽用珠江桥，后来看到一帖说是兑的就没用了。
: 去亚洲超市买酱油，最恨标签全是soya sauce而不区别老抽生抽。
: 韩国酱油没有用过，不知道好吗

s*g2014-10-23 07:10

39 楼

thanks a lot!

【在 m*********D 的大作中提到】

: 你用tetoff还是teton系统？off系统是shut down transcription，作mRNA decay,30分
: 钟就够了。要on系统，则要等protein出来，你得看看最好时间。我们一般是24小时。
: doxicycline你在sigma可以买。找tissue culture级别的。也可以买水溶液。直接加
: medium里。
:
: 白。

f*42014-10-23 07:10

40 楼

生抽咸，调味
老抽上色。
好的生抽真的很香

【在 j**u 的大作中提到】

: 请问一下，老抽生抽哪个更咸？

s*g2014-10-23 07:10

41 楼

Doxycycline hyclate
http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/sigma/d9891?lang=en
Doxycycline Hydrochloride, Ready Made Solution
http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/sigma/d3072?lang=en
Both are OK, right?
I think my system is Tet-on. I will try 24h DOX treatment at first.
Thanks a lot!

【在 m*********D 的大作中提到】

: 你用tetoff还是teton系统？off系统是shut down transcription，作mRNA decay,30分
: 钟就够了。要on系统，则要等protein出来，你得看看最好时间。我们一般是24小时。
: doxicycline你在sigma可以买。找tissue culture级别的。也可以买水溶液。直接加
: medium里。
:
: 白。

s*o2014-10-23 07:10

42 楼

珠江桥只咸不香

m*D2014-10-23 07:10

43 楼

We bought D9891-5g, made water solution at 10 mg/ml, and filtered through 0.
22 um before adding into medium.

【在 s*****g 的大作中提到】

: Doxycycline hyclate
: http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/sigma/d9891?lang=en
: Doxycycline Hydrochloride, Ready Made Solution
: http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/sigma/d3072?lang=en
: Both are OK, right?
: I think my system is Tet-on. I will try 24h DOX treatment at first.
: Thanks a lot!

s*l2014-10-23 07:10

44 楼

个人感觉生抽更咸，忒咸。。

【在 j**u 的大作中提到】

: 请问一下，老抽生抽哪个更咸？

s*g2014-10-23 07:10

45 楼

非常感谢。昨天我根据你的建议，上网查，没有舍得买他们的液体，定了D9891-1g, 看
来我订对了！
他们的液体也是在DMSO里溶的。
既然你们已经可以用水溶，我也用水溶，这样对细胞伤害小些。
水溶的信息很重要。太感谢了！
另外，母液存放的多少度？-20C还是4C？谢谢！

j*u2014-10-23 07:10

46 楼

3x

【在 f*****4 的大作中提到】

:
: 生抽咸，调味
: 老抽上色。
: 好的生抽真的很香

m*D2014-10-23 07:10

47 楼

Water soluble--you can find the information with the compound, up to 50 mg/
ml.
However, we generally make 10 mg/ml.
We keep water solution at -20. For how long? I have no idea.:(. At least a
few months should be ok.

j*u2014-10-23 07:10

48 楼

3x

【在 s****l 的大作中提到】

: 个人感觉生抽更咸，忒咸。。

s*g2014-10-23 07:10

49 楼

你们在引发TET-ON一天后就有蛋白水平反应
那么再用药物处理细胞时，是否还要让DOX和处理的药物共存在培养基中？
DOX如果处理一周，细胞会死亡么？
针对你们的细胞，DOX的浓度是多少？
谢谢！

【在 m*********D 的大作中提到】

: Water soluble--you can find the information with the compound, up to 50 mg/
: ml.
: However, we generally make 10 mg/ml.
: We keep water solution at -20. For how long? I have no idea.:(. At least a
: few months should be ok.

l*z2014-10-23 07:10

50 楼

李锦记-- 锦珍酱油味极鲜

m*D2014-10-23 07:10

51 楼

Right. For tet-on system (in stable cell line), we even test different dox
concentration to see our protein expression level. Higher dox does induce
more our protein expression. So if you prefer a certainly level, you may
have to test.
yes.
Never tried that long. 2 days with 2 ug/ml would not kill 293 cells at my
hands. Dox has low toxicity to mammalian cells. I think it might be ok.
However, I would suggest you to test dox alone.
1-5 ug/ml is recommended. I myself used 2 ug/ml for tet-off system. For tet-
on system, the protein expression level might related to your dox amount. so
you better test.

m*62014-10-23 07:10

52 楼

旗袍女打扇的那个好吃

【在 b**********g 的大作中提到】

: 一直用李锦记的各种酱油，都很好。
: 搭车问下，李锦记里的蚝油好几个品种，哪种最好吃啊？

s*g2014-10-23 07:10

53 楼

非常感谢赐教！
等订货一来，就要开工了！

f*42014-10-23 07:10

54 楼

同意这个。价钱也贵，但喂到是好

【在 m******6 的大作中提到】

: 旗袍女打扇的那个好吃

s*g2014-10-23 07:10

55 楼

我做了浓度梯度3天测试。找出毒性小的最高浓度。做了4 天的处理。
24h DOX Induction, then 3 days Drug treatment with DOX.
至于蛋白量需要WB 检测。但是MTS显示了我预期的结果。显微镜下也看到了细胞形状的
变化(Apoptosis/cell death)。
Negative control and shRNA knockdown 在细胞viability上有着显著的差异！
万分感谢！

t*e2014-10-23 07:10

56 楼

看到贴，还真去尝了尝，现在是用的金兰生抽，
还真的有香味
下次尝尝万字

【在 s*******o 的大作中提到】

: 如题

m*D2014-10-23 07:10

57 楼

恭喜！这个感谢我接受。：）））。

【在 s*****g 的大作中提到】

: 我做了浓度梯度3天测试。找出毒性小的最高浓度。做了4 天的处理。
: 24h DOX Induction, then 3 days Drug treatment with DOX.
: 至于蛋白量需要WB 检测。但是MTS显示了我预期的结果。显微镜下也看到了细胞形状的
: 变化(Apoptosis/cell death)。
: Negative control and shRNA knockdown 在细胞viability上有着显著的差异！
: 万分感谢！

b*g2014-10-23 07:10

58 楼

看来我买对了，不过是旗袍女划船，呵呵

【在 m******6 的大作中提到】

: 旗袍女打扇的那个好吃

t*e2014-10-23 07:10

59 楼

这个？
看不清字

【在 b**********g 的大作中提到】

: 看来我买对了，不过是旗袍女划船，呵呵

s*l2014-10-23 07:10

60 楼

多年前看报道李锦记酱油二恶英超标的事，后来怎样了？不过估计其它的牌子也保证不
了。

m*62014-10-23 07:10

61 楼

是这个。旗袍女。

【在 t*****e 的大作中提到】

: 这个？
: 看不清字

s*o2014-10-23 07:10

62 楼

猫猫大娘，这个旗袍女来自李锦记旧庄蚝油，不是酱油，呵呵

【在 m******6 的大作中提到】

: 是这个。旗袍女。

m*62014-10-23 07:10

63 楼

乖侄女，楼上的白小熊mm要求推荐蚝油

【在 s*******o 的大作中提到】

: 猫猫大娘，这个旗袍女来自李锦记旧庄蚝油，不是酱油，呵呵