lentiviral based Cell line 求助# Biology - 生物学
h*k
1 楼
今天起床，坐在自己小屋里，差点调泪。无人诉说，自己感觉孤独无助。心里肯定是
抑郁了。复习的心情也没了。该回国了吗？还有办法调整自己吗？该去看心理医生吗？
抑郁了。复习的心情也没了。该回国了吗？还有办法调整自己吗？该去看心理医生吗？
z*9
2 楼
我用Lenti-X lentiviral vector （EF-1 alpha Promoter)表达我的一个viral
glycoprotein,在其C端与GFP marker之间，我加上了一Protease 2AA site，我认为这
样只要细胞有gfp就一定有我的目标蛋白表达，
结果却不是我预测的，我在gfp表达细胞并没有监测到我的目标蛋白，
请问，各位做细胞系的大牛有何建议，谢谢
glycoprotein,在其C端与GFP marker之间，我加上了一Protease 2AA site，我认为这
样只要细胞有gfp就一定有我的目标蛋白表达，
结果却不是我预测的，我在gfp表达细胞并没有监测到我的目标蛋白，
请问，各位做细胞系的大牛有何建议，谢谢
h*o
3 楼
坚持住，我们一个女生朋友的男朋友，找了一年了，一直推迟毕业。。前两天给我们发
邮件说，找到工作了！
邮件说，找到工作了！
s*y
4 楼
这个和lentiviral不一定有直接关系。我建议你先把那个载体直接表达在293T cell 里
面（不需要加包装载体），看看能不能表达出来两个蛋白。
【在 z*******9 的大作中提到】
: 我用Lenti-X lentiviral vector （EF-1 alpha Promoter)表达我的一个viral
: glycoprotein,在其C端与GFP marker之间，我加上了一Protease 2AA site，我认为这
: 样只要细胞有gfp就一定有我的目标蛋白表达，
: 结果却不是我预测的，我在gfp表达细胞并没有监测到我的目标蛋白，
: 请问，各位做细胞系的大牛有何建议，谢谢
面（不需要加包装载体），看看能不能表达出来两个蛋白。
【在 z*******9 的大作中提到】
: 我用Lenti-X lentiviral vector （EF-1 alpha Promoter)表达我的一个viral
: glycoprotein,在其C端与GFP marker之间，我加上了一Protease 2AA site，我认为这
: 样只要细胞有gfp就一定有我的目标蛋白表达，
: 结果却不是我预测的，我在gfp表达细胞并没有监测到我的目标蛋白，
: 请问，各位做细胞系的大牛有何建议，谢谢
b*j
5 楼
不断争取面试机会，就会不断提高。总有一个过程，什么专业？
z*9
6 楼
谢谢，我现在正在监测他在293T里的情况，
只是觉得这个也太Counter Intuitive 了，
只是觉得这个也太Counter Intuitive 了，
M*u
7 楼
不反思的话，很难提高：）
【在 b*****j 的大作中提到】
: 不断争取面试机会，就会不断提高。总有一个过程，什么专业？
【在 b*****j 的大作中提到】
: 不断争取面试机会，就会不断提高。总有一个过程，什么专业？
s*s
8 楼
你看看GFP前面有没有独立的ATG能单独表达的？要么就是你的蛋白实在太不稳定了。
你有没有用GFP抗体做一下western看一下大小？
293T里面比较tricky。我的理解是这玩意儿根本不需要经过mRNA，直接就是病毒RNA表
达了。
【在 z*******9 的大作中提到】
: 谢谢，我现在正在监测他在293T里的情况，
: 只是觉得这个也太Counter Intuitive 了，
你有没有用GFP抗体做一下western看一下大小？
293T里面比较tricky。我的理解是这玩意儿根本不需要经过mRNA，直接就是病毒RNA表
达了。
【在 z*******9 的大作中提到】
: 谢谢，我现在正在监测他在293T里的情况，
: 只是觉得这个也太Counter Intuitive 了，
A*4
9 楼
加油~
也不要给自己太大的压力，把该做的做好就好了
【在 h***k 的大作中提到】
: 今天起床，坐在自己小屋里，差点调泪。无人诉说，自己感觉孤独无助。心里肯定是
: 抑郁了。复习的心情也没了。该回国了吗？还有办法调整自己吗？该去看心理医生吗？
也不要给自己太大的压力，把该做的做好就好了
【在 h***k 的大作中提到】
: 今天起床，坐在自己小屋里，差点调泪。无人诉说，自己感觉孤独无助。心里肯定是
: 抑郁了。复习的心情也没了。该回国了吗？还有办法调整自己吗？该去看心理医生吗？
l*y
10 楼
测个mRNA，看看有没有GFP的mRNA上还有没有目标蛋白序列连着，可能就是目标蛋白表达
太低，或者有毒性被select against了丢了只剩GFP了
【在 z*******9 的大作中提到】
: 我用Lenti-X lentiviral vector （EF-1 alpha Promoter)表达我的一个viral
: glycoprotein,在其C端与GFP marker之间，我加上了一Protease 2AA site，我认为这
: 样只要细胞有gfp就一定有我的目标蛋白表达，
: 结果却不是我预测的，我在gfp表达细胞并没有监测到我的目标蛋白，
: 请问，各位做细胞系的大牛有何建议，谢谢
太低，或者有毒性被select against了丢了只剩GFP了
【在 z*******9 的大作中提到】
: 我用Lenti-X lentiviral vector （EF-1 alpha Promoter)表达我的一个viral
: glycoprotein,在其C端与GFP marker之间，我加上了一Protease 2AA site，我认为这
: 样只要细胞有gfp就一定有我的目标蛋白表达，
: 结果却不是我预测的，我在gfp表达细胞并没有监测到我的目标蛋白，
: 请问，各位做细胞系的大牛有何建议，谢谢
m*4
11 楼
do some exercise, then continue. Offer is somewhere ahead waiting, but you
have to work hard to get it.
【在 h***k 的大作中提到】
: 今天起床，坐在自己小屋里，差点调泪。无人诉说，自己感觉孤独无助。心里肯定是
: 抑郁了。复习的心情也没了。该回国了吗？还有办法调整自己吗？该去看心理医生吗？
have to work hard to get it.
【在 h***k 的大作中提到】
: 今天起床，坐在自己小屋里，差点调泪。无人诉说，自己感觉孤独无助。心里肯定是
: 抑郁了。复习的心情也没了。该回国了吗？还有办法调整自己吗？该去看心理医生吗？
z*9
12 楼
谢谢各位的建议，
我首先监测了在293T trasfection时，蛋白的表达，IFA结果表明我目标蛋白表达良好
，基本是有GFP信号的细胞，目标蛋白都是表达的，
接着，我对我的细胞株用不同的抗体又从新做了IFA和WsternBlot，这次两次监测的结
果都是阳性，我都能监测到目标蛋白（这表明我上次IFA没有监测到我的蛋白很有可能
是抗体的原因）
不过，对细胞株的IFA又看到一个现象，我的目标蛋白并不与gfp信号完全重合，我可以
观察到有些细胞有很强的gfp信号但却没有我目标蛋白信号，或者反之，（重复一下，
我目标蛋白是和GFP fused with 2AA protease linker)?
请问各位，这是不是经常出现的现象？
我首先监测了在293T trasfection时，蛋白的表达，IFA结果表明我目标蛋白表达良好
，基本是有GFP信号的细胞，目标蛋白都是表达的，
接着，我对我的细胞株用不同的抗体又从新做了IFA和WsternBlot，这次两次监测的结
果都是阳性，我都能监测到目标蛋白（这表明我上次IFA没有监测到我的蛋白很有可能
是抗体的原因）
不过，对细胞株的IFA又看到一个现象，我的目标蛋白并不与gfp信号完全重合，我可以
观察到有些细胞有很强的gfp信号但却没有我目标蛋白信号，或者反之，（重复一下，
我目标蛋白是和GFP fused with 2AA protease linker)?
请问各位，这是不是经常出现的现象？
x*i
13 楼
楼主CS学几年了?
v*m
14 楼
2AA的linker在细胞内被非特异性剪切。gfp fusion常见的现象。
【在 z*******9 的大作中提到】
: 谢谢各位的建议，
: 我首先监测了在293T trasfection时，蛋白的表达，IFA结果表明我目标蛋白表达良好
: ，基本是有GFP信号的细胞，目标蛋白都是表达的，
: 接着，我对我的细胞株用不同的抗体又从新做了IFA和WsternBlot，这次两次监测的结
: 果都是阳性，我都能监测到目标蛋白（这表明我上次IFA没有监测到我的蛋白很有可能
: 是抗体的原因）
: 不过，对细胞株的IFA又看到一个现象，我的目标蛋白并不与gfp信号完全重合，我可以
: 观察到有些细胞有很强的gfp信号但却没有我目标蛋白信号，或者反之，（重复一下，
: 我目标蛋白是和GFP fused with 2AA protease linker)?
: 请问各位，这是不是经常出现的现象？
【在 z*******9 的大作中提到】
: 谢谢各位的建议，
: 我首先监测了在293T trasfection时，蛋白的表达，IFA结果表明我目标蛋白表达良好
: ，基本是有GFP信号的细胞，目标蛋白都是表达的，
: 接着，我对我的细胞株用不同的抗体又从新做了IFA和WsternBlot，这次两次监测的结
: 果都是阳性，我都能监测到目标蛋白（这表明我上次IFA没有监测到我的蛋白很有可能
: 是抗体的原因）
: 不过，对细胞株的IFA又看到一个现象，我的目标蛋白并不与gfp信号完全重合，我可以
: 观察到有些细胞有很强的gfp信号但却没有我目标蛋白信号，或者反之，（重复一下，
: 我目标蛋白是和GFP fused with 2AA protease linker)?
: 请问各位，这是不是经常出现的现象？
r*e
15 楼
加油，多参加活动，锻炼身体，放松。回国也不错，如果男生一个人的话。
【在 h***k 的大作中提到】
: 今天起床，坐在自己小屋里，差点调泪。无人诉说，自己感觉孤独无助。心里肯定是
: 抑郁了。复习的心情也没了。该回国了吗？还有办法调整自己吗？该去看心理医生吗？
【在 h***k 的大作中提到】
: 今天起床，坐在自己小屋里，差点调泪。无人诉说，自己感觉孤独无助。心里肯定是
: 抑郁了。复习的心情也没了。该回国了吗？还有办法调整自己吗？该去看心理医生吗？
v*m
16 楼
有gfp，没你蛋白的情况也会很常见。
【在 z*******9 的大作中提到】
: 我用Lenti-X lentiviral vector （EF-1 alpha Promoter)表达我的一个viral
: glycoprotein,在其C端与GFP marker之间，我加上了一Protease 2AA site，我认为这
: 样只要细胞有gfp就一定有我的目标蛋白表达，
: 结果却不是我预测的，我在gfp表达细胞并没有监测到我的目标蛋白，
: 请问，各位做细胞系的大牛有何建议，谢谢
【在 z*******9 的大作中提到】
: 我用Lenti-X lentiviral vector （EF-1 alpha Promoter)表达我的一个viral
: glycoprotein,在其C端与GFP marker之间，我加上了一Protease 2AA site，我认为这
: 样只要细胞有gfp就一定有我的目标蛋白表达，
: 结果却不是我预测的，我在gfp表达细胞并没有监测到我的目标蛋白，
: 请问，各位做细胞系的大牛有何建议，谢谢
N*r
17 楼
楼主加油
f*D
18 楼
其实回国也不错
不要太push自己
不要在自己不善长的领域停留太久
不要太push自己
不要在自己不善长的领域停留太久
l*e
19 楼
不行就回国呀。不要给自己太多压力
l*6
20 楼
+u，我也在苦海挣扎呢，共勉啊
m*o
21 楼
你是cs的？没想到cs也这么难，看版上那么多软工的offer，看来也是少数。
我觉得你可以考虑两条路，回国或者来bay area最后搏一下。这边软工工作机会真多啊
，如果水平不错，肯定能找到。回国也没什么大不了的啊，回国有家人，有更多的机会
，不是也挺好，千万别钻牛角尖。
【在 h***k 的大作中提到】
: 今天起床，坐在自己小屋里，差点调泪。无人诉说，自己感觉孤独无助。心里肯定是
: 抑郁了。复习的心情也没了。该回国了吗？还有办法调整自己吗？该去看心理医生吗？
我觉得你可以考虑两条路，回国或者来bay area最后搏一下。这边软工工作机会真多啊
，如果水平不错，肯定能找到。回国也没什么大不了的啊，回国有家人，有更多的机会
，不是也挺好，千万别钻牛角尖。
【在 h***k 的大作中提到】
: 今天起床，坐在自己小屋里，差点调泪。无人诉说，自己感觉孤独无助。心里肯定是
: 抑郁了。复习的心情也没了。该回国了吗？还有办法调整自己吗？该去看心理医生吗？
j*w
22 楼
推荐几个在困难时期找工作的文章：
http://yourguiding.com/viewtopic.php?f=31&t=8361&sid=73f2ca3095
【在 h***k 的大作中提到】
: 今天起床，坐在自己小屋里，差点调泪。无人诉说，自己感觉孤独无助。心里肯定是
: 抑郁了。复习的心情也没了。该回国了吗？还有办法调整自己吗？该去看心理医生吗？
http://yourguiding.com/viewtopic.php?f=31&t=8361&sid=73f2ca3095
【在 h***k 的大作中提到】
: 今天起床，坐在自己小屋里，差点调泪。无人诉说，自己感觉孤独无助。心里肯定是
: 抑郁了。复习的心情也没了。该回国了吗？还有办法调整自己吗？该去看心理医生吗？
F*g
23 楼
Pat,坚持就是胜利，找工作的都不容易啊，别看满版的报这个offer，那个面经。抓住
一个offer就好。
一个offer就好。
s*e
24 楼
没关系，不一定非要在美国找，其实在国内也过的挺快乐的。如果想在美国工作，就继
续找，要乐观，即使最后还是找不到，自己也尽力了，也没什么可后悔的了。是不是？
续找，要乐观，即使最后还是找不到，自己也尽力了，也没什么可后悔的了。是不是？
w*m
25 楼
lz 我也大半年下来了 刚才收到之前实习的公司的邮件说最终我们还是不会给你offer
以及昨天电面的拒信 真是心里郁结 真想哭
我觉得我英文永远说不过那些新生 经验永远也比不过那些layoff 我深刻地理解你
但我自己也说不上有信心。。。。
以及昨天电面的拒信 真是心里郁结 真想哭
我觉得我英文永远说不过那些新生 经验永远也比不过那些layoff 我深刻地理解你
但我自己也说不上有信心。。。。
c*o
26 楼
楼主不要难过了。其实难过根本没用。认真思考总结，重新再来。
我也一直在失业中。正想着去重新读学位呢。
offer
【在 w*******m 的大作中提到】
: lz 我也大半年下来了 刚才收到之前实习的公司的邮件说最终我们还是不会给你offer
: 以及昨天电面的拒信 真是心里郁结 真想哭
: 我觉得我英文永远说不过那些新生 经验永远也比不过那些layoff 我深刻地理解你
: 但我自己也说不上有信心。。。。
我也一直在失业中。正想着去重新读学位呢。
offer
【在 w*******m 的大作中提到】
: lz 我也大半年下来了 刚才收到之前实习的公司的邮件说最终我们还是不会给你offer
: 以及昨天电面的拒信 真是心里郁结 真想哭
: 我觉得我英文永远说不过那些新生 经验永远也比不过那些layoff 我深刻地理解你
: 但我自己也说不上有信心。。。。
L*u
27 楼
流泪是最没用。唯一的好处去，宣泄情绪。然后，请安静下来思考。你自己的希望是什
么，优点是什么，怎么可以把他们联系起来。之后，心中的信心就会变强些，再强些。
。
么，优点是什么，怎么可以把他们联系起来。之后，心中的信心就会变强些，再强些。
。
Z*4
28 楼
不要郁闷 我也找了一年多了
现在还在找。
一起加油。
了不起回国，没设么大不了的。重要的是在这个过程中每天都要进步一点点。
人生长着呢。
【在 h***k 的大作中提到】
: 今天起床，坐在自己小屋里，差点调泪。无人诉说，自己感觉孤独无助。心里肯定是
: 抑郁了。复习的心情也没了。该回国了吗？还有办法调整自己吗？该去看心理医生吗？
现在还在找。
一起加油。
了不起回国，没设么大不了的。重要的是在这个过程中每天都要进步一点点。
人生长着呢。
【在 h***k 的大作中提到】
: 今天起床，坐在自己小屋里，差点调泪。无人诉说，自己感觉孤独无助。心里肯定是
: 抑郁了。复习的心情也没了。该回国了吗？还有办法调整自己吗？该去看心理医生吗？
i*e
29 楼
patpat 发泄下，休息下，大不了哭一下， 继续吧
f*e
30 楼
多努力，我们公司现在有很多SW opening，就业环境没有那么差，特别是高科技。
【在 m*******o 的大作中提到】
: 你是cs的？没想到cs也这么难，看版上那么多软工的offer，看来也是少数。
: 我觉得你可以考虑两条路，回国或者来bay area最后搏一下。这边软工工作机会真多啊
: ，如果水平不错，肯定能找到。回国也没什么大不了的啊，回国有家人，有更多的机会
: ，不是也挺好，千万别钻牛角尖。
【在 m*******o 的大作中提到】
: 你是cs的？没想到cs也这么难，看版上那么多软工的offer，看来也是少数。
: 我觉得你可以考虑两条路，回国或者来bay area最后搏一下。这边软工工作机会真多啊
: ，如果水平不错，肯定能找到。回国也没什么大不了的啊，回国有家人，有更多的机会
: ，不是也挺好，千万别钻牛角尖。
s*a
31 楼
感觉找工作很多时候都是机缘巧合，多看看自己的network里谁能帮上忙。
bless！
bless！
c*o
32 楼
同意，找工作很大程度上就是运气，和能力不是正相关。往往笑到最后的是坚持最久的
，他只不过比别人多投了一个月的简历。
【在 s***a 的大作中提到】
: 感觉找工作很多时候都是机缘巧合，多看看自己的network里谁能帮上忙。
: bless！
，他只不过比别人多投了一个月的简历。
【在 s***a 的大作中提到】
: 感觉找工作很多时候都是机缘巧合，多看看自己的network里谁能帮上忙。
: bless！
w*s
33 楼
坚持。
我当年找工作，找了一年多，也崩溃了很多次，投了无数简历，改了N遍简历，看了
若干面试书，每次上论坛看别人说只要你觉得绝望了，offer就来了，我心里想，
咋我都绝望了那么多次了，每次都觉得到底谷了，offer还是不来呢，是不是这辈子
都没办法找到工作了（没工作经验的fresh master)？
后来实在是太绝望了，干脆什么都不管了，放下一切，出去旅行，海边住了一周，结果就在
度假那一周拿到了offer。
我当年找工作，找了一年多，也崩溃了很多次，投了无数简历，改了N遍简历，看了
若干面试书，每次上论坛看别人说只要你觉得绝望了，offer就来了，我心里想，
咋我都绝望了那么多次了，每次都觉得到底谷了，offer还是不来呢，是不是这辈子
都没办法找到工作了（没工作经验的fresh master)？
后来实在是太绝望了，干脆什么都不管了，放下一切，出去旅行，海边住了一周，结果就在
度假那一周拿到了offer。
a*a
34 楼
楼主，送一句话共勉，you make the failure complete when you stop trying.加油
！
！
h*n
35 楼
patpat
o*y
36 楼
agree，
anyway, with the best blessssss!
【在 a****a 的大作中提到】
: 楼主，送一句话共勉，you make the failure complete when you stop trying.加油
: ！
anyway, with the best blessssss!
【在 a****a 的大作中提到】
: 楼主，送一句话共勉，you make the failure complete when you stop trying.加油
: ！
Z*4
37 楼
你经历很牛逼 哈哈 度假把offer度来了！赞！
果就在
【在 w***s 的大作中提到】
: 坚持。
: 我当年找工作，找了一年多，也崩溃了很多次，投了无数简历，改了N遍简历，看了
: 若干面试书，每次上论坛看别人说只要你觉得绝望了，offer就来了，我心里想，
: 咋我都绝望了那么多次了，每次都觉得到底谷了，offer还是不来呢，是不是这辈子
: 都没办法找到工作了（没工作经验的fresh master)？
: 后来实在是太绝望了，干脆什么都不管了，放下一切，出去旅行，海边住了一周，结果就在
: 度假那一周拿到了offer。
果就在
【在 w***s 的大作中提到】
: 坚持。
: 我当年找工作，找了一年多，也崩溃了很多次，投了无数简历，改了N遍简历，看了
: 若干面试书，每次上论坛看别人说只要你觉得绝望了，offer就来了，我心里想，
: 咋我都绝望了那么多次了，每次都觉得到底谷了，offer还是不来呢，是不是这辈子
: 都没办法找到工作了（没工作经验的fresh master)？
: 后来实在是太绝望了，干脆什么都不管了，放下一切，出去旅行，海边住了一周，结果就在
: 度假那一周拿到了offer。
N*D
38 楼
我也是vacation拿到的offer，呵呵
果就在
【在 w***s 的大作中提到】
: 坚持。
: 我当年找工作，找了一年多，也崩溃了很多次，投了无数简历，改了N遍简历，看了
: 若干面试书，每次上论坛看别人说只要你觉得绝望了，offer就来了，我心里想，
: 咋我都绝望了那么多次了，每次都觉得到底谷了，offer还是不来呢，是不是这辈子
: 都没办法找到工作了（没工作经验的fresh master)？
: 后来实在是太绝望了，干脆什么都不管了，放下一切，出去旅行，海边住了一周，结果就在
: 度假那一周拿到了offer。
果就在
【在 w***s 的大作中提到】
: 坚持。
: 我当年找工作，找了一年多，也崩溃了很多次，投了无数简历，改了N遍简历，看了
: 若干面试书，每次上论坛看别人说只要你觉得绝望了，offer就来了，我心里想，
: 咋我都绝望了那么多次了，每次都觉得到底谷了，offer还是不来呢，是不是这辈子
: 都没办法找到工作了（没工作经验的fresh master)？
: 后来实在是太绝望了，干脆什么都不管了，放下一切，出去旅行，海边住了一周，结果就在
: 度假那一周拿到了offer。
p*n
39 楼
胜利就在前头啊。
我看过一个BLOG/书？。开头作者写得好惨啊！！
他写当时开车去西雅图面试。之前FAIL无数，当时很绝望啊。。。。
没想到那次就成功，然后彻底转折
所以，不要灰心啊。
我看过一个BLOG/书？。开头作者写得好惨啊！！
他写当时开车去西雅图面试。之前FAIL无数，当时很绝望啊。。。。
没想到那次就成功，然后彻底转折
所以，不要灰心啊。
g*y
40 楼
找工作就象被埋在井下，需要打一条路出来。心情好一点时，就琢磨一下怎么脱困，想
想自己有什么没试过的路；心情不好的时候，就一块一块地搬石头。只要不停地努力，
总有一天，你会找到路出去。
想自己有什么没试过的路；心情不好的时候，就一块一块地搬石头。只要不停地努力，
总有一天，你会找到路出去。
p*j
41 楼
是的，加油，你可以出去旅游一下的，放松心情！
w*0
42 楼
安慰的话听起来很舒服，但是还是要从自身出发。
想想自己还可以在哪些方面提高？networking有时候也是厚脸皮搞出来的，是不是面试
上还需要提高，简历是不是还需要加工，需不需要裸奔到加州（比如说）那样机会大一
些。总之，人生苦难重重，工作了的人也有他们的烦恼。好好努力，别放弃，相信自己
。
想想自己还可以在哪些方面提高？networking有时候也是厚脸皮搞出来的，是不是面试
上还需要提高，简历是不是还需要加工，需不需要裸奔到加州（比如说）那样机会大一
些。总之，人生苦难重重，工作了的人也有他们的烦恼。好好努力，别放弃，相信自己
。
P*1
43 楼
每天做运动。 精神也会好点。 要不就去参加教会多认识一些人。好多天天闷在家里
，乱想。
，乱想。
w*s
44 楼
我当年找工作的时候，也苦过的。找了一年多工作，
一开始不以为意，到后来的连连被拒，或者根本没消息，
只好非常仔细地忍着恶心一遍一遍改简历，一封一封写cover letter，耐下心来
写了100多个behavior question的答案，每次面试前还根据职位描述改了又改，
同时在看面试书，谈话书和一些教材，还有练英语。到处骚扰认识的人，校友，陌生人，
linkedin上乱看，校友网络乱发信，论坛，刚认识的人，跑去教堂混，已经找到工作
的同学，真是叫做豁下脸面了，一有时间就在网上海投简历从早到晚，还搜各公司的人的
email去发骚扰信，饭不想吃，觉也不睡，憔悴得很。我是属于那种很内向的人，
也不太会说话。
找工作绝望的时候干过很多傻事，myvisajob上的会员资格买过，伪装过local申请者，
又出不起飞机票钱，LD大力支持，他一个人开车3天，每天开10来个小时，住一晚，第2天
才开到，面试2小时，中午一面试完我们就开回家，路上住一晚，第2天下午开到。
我就在副驾驶上一直复习面试问题，这是去外州面试一家小公司，年薪才3万的那种，
还不办H1B，结果还没offer。这个事情我都没敢跟人说过，觉得别人一定会嘲笑的。
也投过很低级的职位，说要干体力活的我都投过。还有人给我介绍华人的call center，
说每小时给几刀？结果还被拒了。华人公司我也投过很多，年薪2万多的职位，都
没人理我。
后来给我offer的，是家上市公司，自己找上门的，年薪比起大家在本版报的offer，
当然是很低的了，不过我已经满足了，给办h1b，有relocation和signing bonus，
而且面试的时候，我都没怎么准备，因为当时正是一个情绪崩溃期，想着这家公司肯定不
会要我，等着被拒呢。结果面试我的老板根本没问我问题，他自说自话地闲聊了一会，
问我是啥专业，愿不愿意relo，我说愿意啊，他就给了offer。
一开始不以为意，到后来的连连被拒，或者根本没消息，
只好非常仔细地忍着恶心一遍一遍改简历，一封一封写cover letter，耐下心来
写了100多个behavior question的答案，每次面试前还根据职位描述改了又改，
同时在看面试书，谈话书和一些教材，还有练英语。到处骚扰认识的人，校友，陌生人，
linkedin上乱看，校友网络乱发信，论坛，刚认识的人，跑去教堂混，已经找到工作
的同学，真是叫做豁下脸面了，一有时间就在网上海投简历从早到晚，还搜各公司的人的
email去发骚扰信，饭不想吃，觉也不睡，憔悴得很。我是属于那种很内向的人，
也不太会说话。
找工作绝望的时候干过很多傻事，myvisajob上的会员资格买过，伪装过local申请者，
又出不起飞机票钱，LD大力支持，他一个人开车3天，每天开10来个小时，住一晚，第2天
才开到，面试2小时，中午一面试完我们就开回家，路上住一晚，第2天下午开到。
我就在副驾驶上一直复习面试问题，这是去外州面试一家小公司，年薪才3万的那种，
还不办H1B，结果还没offer。这个事情我都没敢跟人说过，觉得别人一定会嘲笑的。
也投过很低级的职位，说要干体力活的我都投过。还有人给我介绍华人的call center，
说每小时给几刀？结果还被拒了。华人公司我也投过很多，年薪2万多的职位，都
没人理我。
后来给我offer的，是家上市公司，自己找上门的，年薪比起大家在本版报的offer，
当然是很低的了，不过我已经满足了，给办h1b，有relocation和signing bonus，
而且面试的时候，我都没怎么准备，因为当时正是一个情绪崩溃期，想着这家公司肯定不
会要我，等着被拒呢。结果面试我的老板根本没问我问题，他自说自话地闲聊了一会，
问我是啥专业，愿不愿意relo，我说愿意啊，他就给了offer。
c*y
45 楼
传奇经历呀
人，
人的
【在 w***s 的大作中提到】
: 我当年找工作的时候，也苦过的。找了一年多工作，
: 一开始不以为意，到后来的连连被拒，或者根本没消息，
: 只好非常仔细地忍着恶心一遍一遍改简历，一封一封写cover letter，耐下心来
: 写了100多个behavior question的答案，每次面试前还根据职位描述改了又改，
: 同时在看面试书，谈话书和一些教材，还有练英语。到处骚扰认识的人，校友，陌生人，
: linkedin上乱看，校友网络乱发信，论坛，刚认识的人，跑去教堂混，已经找到工作
: 的同学，真是叫做豁下脸面了，一有时间就在网上海投简历从早到晚，还搜各公司的人的
: email去发骚扰信，饭不想吃，觉也不睡，憔悴得很。我是属于那种很内向的人，
: 也不太会说话。
: 找工作绝望的时候干过很多傻事，myvisajob上的会员资格买过，伪装过local申请者，
人，
人的
【在 w***s 的大作中提到】
: 我当年找工作的时候，也苦过的。找了一年多工作，
: 一开始不以为意，到后来的连连被拒，或者根本没消息，
: 只好非常仔细地忍着恶心一遍一遍改简历，一封一封写cover letter，耐下心来
: 写了100多个behavior question的答案，每次面试前还根据职位描述改了又改，
: 同时在看面试书，谈话书和一些教材，还有练英语。到处骚扰认识的人，校友，陌生人，
: linkedin上乱看，校友网络乱发信，论坛，刚认识的人，跑去教堂混，已经找到工作
: 的同学，真是叫做豁下脸面了，一有时间就在网上海投简历从早到晚，还搜各公司的人的
: email去发骚扰信，饭不想吃，觉也不睡，憔悴得很。我是属于那种很内向的人，
: 也不太会说话。
: 找工作绝望的时候干过很多傻事，myvisajob上的会员资格买过，伪装过local申请者，
w*s
46 楼
-.- 哎呀好丢脸，被熟人看见了……不要转载啊。
【在 c**y 的大作中提到】
: 传奇经历呀
:
: 人，
: 人的
【在 c**y 的大作中提到】
: 传奇经历呀
:
: 人，
: 人的
c*y
47 楼
多难得的经历呀，我正赞叹你的百折不挠呢。
【在 w***s 的大作中提到】
: -.- 哎呀好丢脸，被熟人看见了……不要转载啊。
【在 w***s 的大作中提到】
: -.- 哎呀好丢脸，被熟人看见了……不要转载啊。
s*n
48 楼
赞
有的时候需要的不是那种一下子就成功的大牛的经历，反倒是这种曲曲折折的经历，会
给人智慧，鼓励和信心
谢谢 ORZ
人，
人的
【在 w***s 的大作中提到】
: 我当年找工作的时候，也苦过的。找了一年多工作，
: 一开始不以为意，到后来的连连被拒，或者根本没消息，
: 只好非常仔细地忍着恶心一遍一遍改简历，一封一封写cover letter，耐下心来
: 写了100多个behavior question的答案，每次面试前还根据职位描述改了又改，
: 同时在看面试书，谈话书和一些教材，还有练英语。到处骚扰认识的人，校友，陌生人，
: linkedin上乱看，校友网络乱发信，论坛，刚认识的人，跑去教堂混，已经找到工作
: 的同学，真是叫做豁下脸面了，一有时间就在网上海投简历从早到晚，还搜各公司的人的
: email去发骚扰信，饭不想吃，觉也不睡，憔悴得很。我是属于那种很内向的人，
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有的时候需要的不是那种一下子就成功的大牛的经历，反倒是这种曲曲折折的经历，会
给人智慧，鼓励和信心
谢谢 ORZ
人，
人的
【在 w***s 的大作中提到】
: 我当年找工作的时候，也苦过的。找了一年多工作，
: 一开始不以为意，到后来的连连被拒，或者根本没消息，
: 只好非常仔细地忍着恶心一遍一遍改简历，一封一封写cover letter，耐下心来
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: 也不太会说话。
: 找工作绝望的时候干过很多傻事，myvisajob上的会员资格买过，伪装过local申请者，
P*1
49 楼
天啊，你都那样找工作了还要找1年多啊。 世道不好。
看来我找工作2个多月还没有找到也算正常。
人，
人的
【在 w***s 的大作中提到】
: 我当年找工作的时候，也苦过的。找了一年多工作，
: 一开始不以为意，到后来的连连被拒，或者根本没消息，
: 只好非常仔细地忍着恶心一遍一遍改简历，一封一封写cover letter，耐下心来
: 写了100多个behavior question的答案，每次面试前还根据职位描述改了又改，
: 同时在看面试书，谈话书和一些教材，还有练英语。到处骚扰认识的人，校友，陌生人，
: linkedin上乱看，校友网络乱发信，论坛，刚认识的人，跑去教堂混，已经找到工作
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: email去发骚扰信，饭不想吃，觉也不睡，憔悴得很。我是属于那种很内向的人，
: 也不太会说话。
: 找工作绝望的时候干过很多傻事，myvisajob上的会员资格买过，伪装过local申请者，
看来我找工作2个多月还没有找到也算正常。
人，
人的
【在 w***s 的大作中提到】
: 我当年找工作的时候，也苦过的。找了一年多工作，
: 一开始不以为意，到后来的连连被拒，或者根本没消息，
: 只好非常仔细地忍着恶心一遍一遍改简历，一封一封写cover letter，耐下心来
: 写了100多个behavior question的答案，每次面试前还根据职位描述改了又改，
: 同时在看面试书，谈话书和一些教材，还有练英语。到处骚扰认识的人，校友，陌生人，
: linkedin上乱看，校友网络乱发信，论坛，刚认识的人，跑去教堂混，已经找到工作
: 的同学，真是叫做豁下脸面了，一有时间就在网上海投简历从早到晚，还搜各公司的人的
: email去发骚扰信，饭不想吃，觉也不睡，憔悴得很。我是属于那种很内向的人，
: 也不太会说话。
: 找工作绝望的时候干过很多傻事，myvisajob上的会员资格买过，伪装过local申请者，
c*o
50 楼
多谢你上传的信息。你的经历对我也是鼓励。我也失业找工作快三个月了。疯投简历一
千多封。没有结果。我正考虑再重新读书呢。
我曾经有过三个月一千封信的经历，并找到了份工作。现在因为自身原因，只能辞职，
从新再来。
不要怕，沉住气，笑道最后的是坚持到最后的。
人，
人的
【在 w***s 的大作中提到】
: 我当年找工作的时候，也苦过的。找了一年多工作，
: 一开始不以为意，到后来的连连被拒，或者根本没消息，
: 只好非常仔细地忍着恶心一遍一遍改简历，一封一封写cover letter，耐下心来
: 写了100多个behavior question的答案，每次面试前还根据职位描述改了又改，
: 同时在看面试书，谈话书和一些教材，还有练英语。到处骚扰认识的人，校友，陌生人，
: linkedin上乱看，校友网络乱发信，论坛，刚认识的人，跑去教堂混，已经找到工作
: 的同学，真是叫做豁下脸面了，一有时间就在网上海投简历从早到晚，还搜各公司的人的
: email去发骚扰信，饭不想吃，觉也不睡，憔悴得很。我是属于那种很内向的人，
: 也不太会说话。
: 找工作绝望的时候干过很多傻事，myvisajob上的会员资格买过，伪装过local申请者，
千多封。没有结果。我正考虑再重新读书呢。
我曾经有过三个月一千封信的经历，并找到了份工作。现在因为自身原因，只能辞职，
从新再来。
不要怕，沉住气，笑道最后的是坚持到最后的。
人，
人的
【在 w***s 的大作中提到】
: 我当年找工作的时候，也苦过的。找了一年多工作，
: 一开始不以为意，到后来的连连被拒，或者根本没消息，
: 只好非常仔细地忍着恶心一遍一遍改简历，一封一封写cover letter，耐下心来
: 写了100多个behavior question的答案，每次面试前还根据职位描述改了又改，
: 同时在看面试书，谈话书和一些教材，还有练英语。到处骚扰认识的人，校友，陌生人，
: linkedin上乱看，校友网络乱发信，论坛，刚认识的人，跑去教堂混，已经找到工作
: 的同学，真是叫做豁下脸面了，一有时间就在网上海投简历从早到晚，还搜各公司的人的
: email去发骚扰信，饭不想吃，觉也不睡，憔悴得很。我是属于那种很内向的人，
: 也不太会说话。
: 找工作绝望的时候干过很多傻事，myvisajob上的会员资格买过，伪装过local申请者，
P*1
51 楼
我也考虑要重新回去读书。 再看看，不行的话，就回去读书吧。
【在 c****o 的大作中提到】
: 多谢你上传的信息。你的经历对我也是鼓励。我也失业找工作快三个月了。疯投简历一
: 千多封。没有结果。我正考虑再重新读书呢。
: 我曾经有过三个月一千封信的经历，并找到了份工作。现在因为自身原因，只能辞职，
: 从新再来。
: 不要怕，沉住气，笑道最后的是坚持到最后的。
:
: 人，
: 人的
【在 c****o 的大作中提到】
: 多谢你上传的信息。你的经历对我也是鼓励。我也失业找工作快三个月了。疯投简历一
: 千多封。没有结果。我正考虑再重新读书呢。
: 我曾经有过三个月一千封信的经历，并找到了份工作。现在因为自身原因，只能辞职，
: 从新再来。
: 不要怕，沉住气，笑道最后的是坚持到最后的。
:
: 人，
: 人的
w*s
52 楼
没有……真这样也就几个月吧。1年多是断断续续在找，算上还在读书的时候。
一开始对待找工作不是太认真，懒得准备interview，也懒得去搞mock interview，
这回得到教训了。其实读书时找工作绝对比毕业后再找工作要简单很多的
【在 P*******1 的大作中提到】
: 天啊，你都那样找工作了还要找1年多啊。 世道不好。
: 看来我找工作2个多月还没有找到也算正常。
:
:
: 人，
: 人的
一开始对待找工作不是太认真，懒得准备interview，也懒得去搞mock interview，
这回得到教训了。其实读书时找工作绝对比毕业后再找工作要简单很多的
【在 P*******1 的大作中提到】
: 天啊，你都那样找工作了还要找1年多啊。 世道不好。
: 看来我找工作2个多月还没有找到也算正常。
:
:
: 人，
: 人的
b*r
53 楼
bless
【在 h***k 的大作中提到】
: 今天起床，坐在自己小屋里，差点调泪。无人诉说，自己感觉孤独无助。心里肯定是
: 抑郁了。复习的心情也没了。该回国了吗？还有办法调整自己吗？该去看心理医生吗？
【在 h***k 的大作中提到】
: 今天起床，坐在自己小屋里，差点调泪。无人诉说，自己感觉孤独无助。心里肯定是
: 抑郁了。复习的心情也没了。该回国了吗？还有办法调整自己吗？该去看心理医生吗？
j*x
54 楼
坚持，一定要坚持。
我也是找了好久的工作没有结果，也在苦苦等待中。
这个时候只能靠自己了，也别逼自己太紧，回国也不错的。
但是一定要做百分百的努力，剩下的就听天命了。
我也是找了好久的工作没有结果，也在苦苦等待中。
这个时候只能靠自己了，也别逼自己太紧，回国也不错的。
但是一定要做百分百的努力，剩下的就听天命了。
w*6
55 楼
看完了，感觉很苦逼，苦逼就苦逼吧。让暴风雨来得更猛烈些吧。我不怕
i*e
56 楼
呵呵，牛，加油吧。
【在 w*******6 的大作中提到】
: 看完了，感觉很苦逼，苦逼就苦逼吧。让暴风雨来得更猛烈些吧。我不怕
【在 w*******6 的大作中提到】
: 看完了，感觉很苦逼，苦逼就苦逼吧。让暴风雨来得更猛烈些吧。我不怕
l*y
57 楼
姑娘真厉害，我找了一年多也没像你这么认真的
后来晃荡着也找到了，由于OPT的问题公司还从3月等到10月h1b生效我才上班
bless楼主，我也经历过很多次你这样崩溃的时刻，坚持住
或者给自己划定一个deadline，比如OPT用完了就回国，这样有目标的日子会好过一些
人，
人的
【在 w***s 的大作中提到】
: 我当年找工作的时候，也苦过的。找了一年多工作，
: 一开始不以为意，到后来的连连被拒，或者根本没消息，
: 只好非常仔细地忍着恶心一遍一遍改简历，一封一封写cover letter，耐下心来
: 写了100多个behavior question的答案，每次面试前还根据职位描述改了又改，
: 同时在看面试书，谈话书和一些教材，还有练英语。到处骚扰认识的人，校友，陌生人，
: linkedin上乱看，校友网络乱发信，论坛，刚认识的人，跑去教堂混，已经找到工作
: 的同学，真是叫做豁下脸面了，一有时间就在网上海投简历从早到晚，还搜各公司的人的
: email去发骚扰信，饭不想吃，觉也不睡，憔悴得很。我是属于那种很内向的人，
: 也不太会说话。
: 找工作绝望的时候干过很多傻事，myvisajob上的会员资格买过，伪装过local申请者，
后来晃荡着也找到了，由于OPT的问题公司还从3月等到10月h1b生效我才上班
bless楼主，我也经历过很多次你这样崩溃的时刻，坚持住
或者给自己划定一个deadline，比如OPT用完了就回国，这样有目标的日子会好过一些
人，
人的
【在 w***s 的大作中提到】
: 我当年找工作的时候，也苦过的。找了一年多工作，
: 一开始不以为意，到后来的连连被拒，或者根本没消息，
: 只好非常仔细地忍着恶心一遍一遍改简历，一封一封写cover letter，耐下心来
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: 也不太会说话。
: 找工作绝望的时候干过很多傻事，myvisajob上的会员资格买过，伪装过local申请者，
l*y
58 楼
坚持就是胜利！！！bless
d*o
59 楼
bless
d*o
60 楼
湾区机会多，不行裸奔到这边来看看
y*n
61 楼
。。。
【在 d****o 的大作中提到】
: 湾区机会多，不行裸奔到这边来看看
【在 d****o 的大作中提到】
: 湾区机会多，不行裸奔到这边来看看
W*h
62 楼
厉害！精神可嘉，学习！
人，
人的
【在 w***s 的大作中提到】
: 我当年找工作的时候，也苦过的。找了一年多工作，
: 一开始不以为意，到后来的连连被拒，或者根本没消息，
: 只好非常仔细地忍着恶心一遍一遍改简历，一封一封写cover letter，耐下心来
: 写了100多个behavior question的答案，每次面试前还根据职位描述改了又改，
: 同时在看面试书，谈话书和一些教材，还有练英语。到处骚扰认识的人，校友，陌生人，
: linkedin上乱看，校友网络乱发信，论坛，刚认识的人，跑去教堂混，已经找到工作
: 的同学，真是叫做豁下脸面了，一有时间就在网上海投简历从早到晚，还搜各公司的人的
: email去发骚扰信，饭不想吃，觉也不睡，憔悴得很。我是属于那种很内向的人，
: 也不太会说话。
: 找工作绝望的时候干过很多傻事，myvisajob上的会员资格买过，伪装过local申请者，
人，
人的
【在 w***s 的大作中提到】
: 我当年找工作的时候，也苦过的。找了一年多工作，
: 一开始不以为意，到后来的连连被拒，或者根本没消息，
: 只好非常仔细地忍着恶心一遍一遍改简历，一封一封写cover letter，耐下心来
: 写了100多个behavior question的答案，每次面试前还根据职位描述改了又改，
: 同时在看面试书，谈话书和一些教材，还有练英语。到处骚扰认识的人，校友，陌生人，
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: 也不太会说话。
: 找工作绝望的时候干过很多傻事，myvisajob上的会员资格买过，伪装过local申请者，
w*s
63 楼
-.-bb 我那是自身条件不行啊……英语太差了……
【在 l*y 的大作中提到】
: 姑娘真厉害，我找了一年多也没像你这么认真的
: 后来晃荡着也找到了，由于OPT的问题公司还从3月等到10月h1b生效我才上班
: bless楼主，我也经历过很多次你这样崩溃的时刻，坚持住
: 或者给自己划定一个deadline，比如OPT用完了就回国，这样有目标的日子会好过一些
:
: 人，
: 人的
【在 l*y 的大作中提到】
: 姑娘真厉害，我找了一年多也没像你这么认真的
: 后来晃荡着也找到了，由于OPT的问题公司还从3月等到10月h1b生效我才上班
: bless楼主，我也经历过很多次你这样崩溃的时刻，坚持住
: 或者给自己划定一个deadline，比如OPT用完了就回国，这样有目标的日子会好过一些
:
: 人，
: 人的
a*o
64 楼
看来大家认为湾区机会大
可是想请问一下
我没有人脉
裸奔去湾区以后要如何找工作?
就算机会多
我也不知道上哪找啊?
谢谢
【在 d****o 的大作中提到】
: 湾区机会多，不行裸奔到这边来看看
可是想请问一下
我没有人脉
裸奔去湾区以后要如何找工作?
就算机会多
我也不知道上哪找啊?
谢谢
【在 d****o 的大作中提到】
: 湾区机会多，不行裸奔到这边来看看
N*s
65 楼
同问这个问题
【在 a***o 的大作中提到】
: 看来大家认为湾区机会大
: 可是想请问一下
: 我没有人脉
: 裸奔去湾区以后要如何找工作?
: 就算机会多
: 我也不知道上哪找啊?
: 谢谢
【在 a***o 的大作中提到】
: 看来大家认为湾区机会大
: 可是想请问一下
: 我没有人脉
: 裸奔去湾区以后要如何找工作?
: 就算机会多
: 我也不知道上哪找啊?
: 谢谢
p*j
66 楼
只有去了才知道，不用问了
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