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求助Histone / DNA methylation chromosome spread共染

求助Histone / DNA methylation chromosome spread共染# Biology - 生物学

z*r2015-02-13 08:02

1 楼

小弟搞化工专业的。第一轮是HR电话面试的，问得都是传统的那些问题，结束的时候
HR 给定了下一轮面试的时间，说是让技术部位的再电话面试一下。这是我第一电话面
试，不知道技术部门的一般都问那些方面的问题？有什么“套路”吗？请有经验的大虾
们指导一下。不胜感激！

h*02015-02-13 08:02

2 楼

I applied the credit card last month and I do not have AA account before. I
still have not got my AA account so far. Will they mail the AA account to me
? How can I get my AA account and password to login to aa.com otherwise?
Thanks

R*n2015-02-13 08:02

3 楼

最近在做一个DNA和histone甲基化共染色，主要是想看在chromosome上的分布。先拿
colcemide处理2小时，然后放0.075M KCl，滴到玻璃板上。染了几次，细胞核都打不开
，也看不到一条条染色体。要是只用DAPI，能看到100-200个核中有一个能打开，但是
很不稳定。看protocol,有两个可能的问题。
1）我是悬空滴的，效果不如用cytospin?
2) 玻璃板没有poly-lysine coating,沾不住chromosome.
有人能提供点经验么？这方面是新手。

h*12015-02-13 08:02

4 楼

关键是要细胞在分裂期才会有一条条的染色体，否则就是染色质，哪能分得开呀。建议
细胞处于分裂活跃期的时候收细胞，不能太满。另外trypsin时间不要太长，收那些很
快就dissociate的细胞

【在 R****n 的大作中提到】

: 最近在做一个DNA和histone甲基化共染色，主要是想看在chromosome上的分布。先拿
: colcemide处理2小时，然后放0.075M KCl，滴到玻璃板上。染了几次，细胞核都打不开
: ，也看不到一条条染色体。要是只用DAPI，能看到100-200个核中有一个能打开，但是
: 很不稳定。看protocol,有两个可能的问题。
: 1）我是悬空滴的，效果不如用cytospin?
: 2) 玻璃板没有poly-lysine coating,沾不住chromosome.
: 有人能提供点经验么？这方面是新手。

R*n2015-02-13 08:02

5 楼

"细胞处于分裂活跃期的时候收细胞，不能太满"
20-30% confluence?
"另外trypsin时间不要太长，收那些很快就dissociate的细胞"
这个是什么原因啊？
谢谢

【在 h********1 的大作中提到】

: 关键是要细胞在分裂期才会有一条条的染色体，否则就是染色质，哪能分得开呀。建议
: 细胞处于分裂活跃期的时候收细胞，不能太满。另外trypsin时间不要太长，收那些很
: 快就dissociate的细胞