Y*Z
2 楼
I have reviewed 10 papers for one journal in my previous school, And I lost
all the evidence. I haven't had invitation and Acknowledge letter.
Could I let the editor to write a letter of testimony for me? And I count it
as 10 papers review for this journal. Is that Ok?
Thanks
all the evidence. I haven't had invitation and Acknowledge letter.
Could I let the editor to write a letter of testimony for me? And I count it
as 10 papers review for this journal. Is that Ok?
Thanks
p*g
3 楼
看评价非常不好。。。
但已经交定金了，不知道有什么需要防范的没？
谢谢！
但已经交定金了，不知道有什么需要防范的没？
谢谢！
x*2
4 楼
前天，我们的电视正看着时，画面就突然模糊了，不到1分钟的时间，图像就不显示了
，但声音依旧。我马上反应，是显像管被烧了，但LD说，这是数码电视，没有显现管之
说。OK，，
这个电视是2007年买的，56IN，当时买时是2千多点。其中长途搬家2次，虽然是专业的
搬家公司有专门的包装保护，颠簸震动是难免的。现在，我家LD的意见是把电视DONATE
,再买个新的。新的这么大，现在只要800刀就可以买到。（我 怀疑中）
请懂的同学帮我分析分析：修理要花多少钱？新的56IN 数码电视800刀真能搞定？
，但声音依旧。我马上反应，是显像管被烧了，但LD说，这是数码电视，没有显现管之
说。OK，，
这个电视是2007年买的，56IN，当时买时是2千多点。其中长途搬家2次，虽然是专业的
搬家公司有专门的包装保护，颠簸震动是难免的。现在，我家LD的意见是把电视DONATE
,再买个新的。新的这么大，现在只要800刀就可以买到。（我 怀疑中）
请懂的同学帮我分析分析：修理要花多少钱？新的56IN 数码电视800刀真能搞定？
m*2
5 楼
Nat Biotechnol. 2014 Sep;32(9):941-6. doi: 10.1038/nbt.2951. Epub 2014 Jun
22.
Generation of mouse models of myeloid malignancy with combinatorial genetic
lesions using CRISPR-Cas9 genome editing.
有同学用过这篇文章提到过的质粒吗?
我用了，但是不workwork，包病毒的时候能看到293T细胞全部绿了，但是收集的病毒
titer非常非常低，根本不能重复文章中的转染效率。
22.
Generation of mouse models of myeloid malignancy with combinatorial genetic
lesions using CRISPR-Cas9 genome editing.
有同学用过这篇文章提到过的质粒吗?
我用了，但是不workwork，包病毒的时候能看到293T细胞全部绿了，但是收集的病毒
titer非常非常低，根本不能重复文章中的转染效率。
G*i
6 楼
YMMV..
【在 y***m 的大作中提到】
: personal day, vacation等都用完还能day off without pay么?
: thx!
【在 y***m 的大作中提到】
: personal day, vacation等都用完还能day off without pay么?
: thx!
a*n
7 楼
应该没有问题。你也可以以Reviewer的身份登录到该期刊的网站，你审的论文的记录应
该保留在那里。
该保留在那里。
T*m
8 楼
要是我的话，就把老电视捐了或者回收，买个新的。
z*t
9 楼
It's a headache for us too... I have to say some of their transduction
efficacy is too good...
I wonder if people also used Feng Zhang's Gecko lenti plasimid before? Since
Cas9 is big, it's hard to get good titer of virus...if the titer of
lentivirus with Cas9 is low, then I think it's Cas9's problem..
genetic
【在 m********2 的大作中提到】
: Nat Biotechnol. 2014 Sep;32(9):941-6. doi: 10.1038/nbt.2951. Epub 2014 Jun
: 22.
: Generation of mouse models of myeloid malignancy with combinatorial genetic
: lesions using CRISPR-Cas9 genome editing.
: 有同学用过这篇文章提到过的质粒吗?
: 我用了，但是不workwork，包病毒的时候能看到293T细胞全部绿了，但是收集的病毒
: titer非常非常低，根本不能重复文章中的转染效率。
efficacy is too good...
I wonder if people also used Feng Zhang's Gecko lenti plasimid before? Since
Cas9 is big, it's hard to get good titer of virus...if the titer of
lentivirus with Cas9 is low, then I think it's Cas9's problem..
genetic
【在 m********2 的大作中提到】
: Nat Biotechnol. 2014 Sep;32(9):941-6. doi: 10.1038/nbt.2951. Epub 2014 Jun
: 22.
: Generation of mouse models of myeloid malignancy with combinatorial genetic
: lesions using CRISPR-Cas9 genome editing.
: 有同学用过这篇文章提到过的质粒吗?
: 我用了，但是不workwork，包病毒的时候能看到293T细胞全部绿了，但是收集的病毒
: titer非常非常低，根本不能重复文章中的转染效率。
x*2
10 楼
咳，上次，俺家领导把那辆老车给捐了，其实卖的话，还是可以回收更多的现大 羊的
，，算了，算是帮助一下那些问题孩子吧。 难道这次，再放弃一只小羊，，给谁吃尼
，，
【在 T*******m 的大作中提到】
: 要是我的话，就把老电视捐了或者回收，买个新的。
，，算了，算是帮助一下那些问题孩子吧。 难道这次，再放弃一只小羊，，给谁吃尼
，，
【在 T*******m 的大作中提到】
: 要是我的话，就把老电视捐了或者回收，买个新的。
d*u
11 楼
张峰实验室的V1 plentiCRISPR感染效率不算高，毒性很大；加多了细胞尤其是primary
cell死得很厉害。V2 vector他们号称感染效率高很多倍，但是实际用的时候并没有那
么明显，但是毒性明显下来了。
cell死得很厉害。V2 vector他们号称感染效率高很多倍，但是实际用的时候并没有那
么明显，但是毒性明显下来了。
T*m
12 楼
老车有人要，可以用零部件。坏电视剧就不一样了。
的 ，，算了，算是帮助一下那些问题孩子吧。 难道这次，再放弃一只小羊，，，
【在 x******2 的大作中提到】
: 咳，上次，俺家领导把那辆老车给捐了，其实卖的话，还是可以回收更多的现大 羊的
: ，，算了，算是帮助一下那些问题孩子吧。 难道这次，再放弃一只小羊，，给谁吃尼
: ，，
的 ，，算了，算是帮助一下那些问题孩子吧。 难道这次，再放弃一只小羊，，，
【在 x******2 的大作中提到】
: 咳，上次，俺家领导把那辆老车给捐了，其实卖的话，还是可以回收更多的现大 羊的
: ，，算了，算是帮助一下那些问题孩子吧。 难道这次，再放弃一只小羊，，给谁吃尼
: ，，
z*t
13 楼
那看来还是包病毒的问题
上次derrick rossi 来做报告讲到他那篇cell stem cell也说他们用了质粒而不是病毒
primary
【在 d****u 的大作中提到】
: 张峰实验室的V1 plentiCRISPR感染效率不算高，毒性很大；加多了细胞尤其是primary
: cell死得很厉害。V2 vector他们号称感染效率高很多倍，但是实际用的时候并没有那
: 么明显，但是毒性明显下来了。
上次derrick rossi 来做报告讲到他那篇cell stem cell也说他们用了质粒而不是病毒
primary
【在 d****u 的大作中提到】
: 张峰实验室的V1 plentiCRISPR感染效率不算高，毒性很大；加多了细胞尤其是primary
: cell死得很厉害。V2 vector他们号称感染效率高很多倍，但是实际用的时候并没有那
: 么明显，但是毒性明显下来了。
x*2
14 楼
还是可以开的，至少开个3/5年是没问题的，只是没有通过SMOG CHECK，但要是到别的
地方CHECK的话，可以通过的。后来嫌麻烦，就算了。这个老车是LD带狗去自然公园去
小河专用的，狗乱跑，老是一身泥。
【在 T*******m 的大作中提到】
: 老车有人要，可以用零部件。坏电视剧就不一样了。
:
: 的 ，，算了，算是帮助一下那些问题孩子吧。 难道这次，再放弃一只小羊，，，
地方CHECK的话，可以通过的。后来嫌麻烦，就算了。这个老车是LD带狗去自然公园去
小河专用的，狗乱跑，老是一身泥。
【在 T*******m 的大作中提到】
: 老车有人要，可以用零部件。坏电视剧就不一样了。
:
: 的 ，，算了，算是帮助一下那些问题孩子吧。 难道这次，再放弃一只小羊，，，
m*2
15 楼
Nat Biotechnol. 2014 Sep;32(9):941-6. doi: 10.1038/nbt.2951. Epub 2014 Jun
22.
Generation of mouse models of myeloid malignancy with combinatorial genetic
lesions using CRISPR-Cas9 genome editing.
给通讯作者写信问了，然后第一作者的回复是这样的:
for the original virus we have been using standard calcium phosphate
transfection wit plasmid ratios of 6:10:1.5 (all ug per 10 cm dish) for
vector:psPAX2:pMD2.G.
The virus was collected at around 24-28h and 36-40h post transfection and
concentrated 50-100x with ultrazentrifugation at approx 100k x g for 2h.
Infektion of LSK or cKit+ cells was performed by plating the cells on
Retronectin coated plates followed by direct infection with MOI of approx 50
(Titer determined on HEL cells). For LSK culture Scf/thpo (50ng/ml each)
starting 48h prior to infection works well with balanced proliferation and
maintained stemness.
Unfortunately production of virus is highly dependent on local factors like
the actual batch of 293T cells, supplier of medium and supplements, FBS and
potentially many more factors.
We did spend quite some time till it was optimized and from my own
experience I can unfortunately tell you that producing virus with 1kb insert
size or 5.5kb insert size are completely different things.
This also means that there was no miracle to the protocols we used to
generate the virus but optimization of the most influential factors was
needed.
我还要继续追着刨根问底吗?
22.
Generation of mouse models of myeloid malignancy with combinatorial genetic
lesions using CRISPR-Cas9 genome editing.
给通讯作者写信问了，然后第一作者的回复是这样的:
for the original virus we have been using standard calcium phosphate
transfection wit plasmid ratios of 6:10:1.5 (all ug per 10 cm dish) for
vector:psPAX2:pMD2.G.
The virus was collected at around 24-28h and 36-40h post transfection and
concentrated 50-100x with ultrazentrifugation at approx 100k x g for 2h.
Infektion of LSK or cKit+ cells was performed by plating the cells on
Retronectin coated plates followed by direct infection with MOI of approx 50
(Titer determined on HEL cells). For LSK culture Scf/thpo (50ng/ml each)
starting 48h prior to infection works well with balanced proliferation and
maintained stemness.
Unfortunately production of virus is highly dependent on local factors like
the actual batch of 293T cells, supplier of medium and supplements, FBS and
potentially many more factors.
We did spend quite some time till it was optimized and from my own
experience I can unfortunately tell you that producing virus with 1kb insert
size or 5.5kb insert size are completely different things.
This also means that there was no miracle to the protocols we used to
generate the virus but optimization of the most influential factors was
needed.
我还要继续追着刨根问底吗?
x*2
16 楼
决定买个新的了，现在就去BEST BUY看去，，，
【在 T*******m 的大作中提到】
: 老车有人要，可以用零部件。坏电视剧就不一样了。
:
: 的 ，，算了，算是帮助一下那些问题孩子吧。 难道这次，再放弃一只小羊，，，
【在 T*******m 的大作中提到】
: 老车有人要，可以用零部件。坏电视剧就不一样了。
:
: 的 ，，算了，算是帮助一下那些问题孩子吧。 难道这次，再放弃一只小羊，，，
z*t
17 楼
我觉得是系统性问题...基本和我们的经验一致
genetic
【在 m********2 的大作中提到】
: Nat Biotechnol. 2014 Sep;32(9):941-6. doi: 10.1038/nbt.2951. Epub 2014 Jun
: 22.
: Generation of mouse models of myeloid malignancy with combinatorial genetic
: lesions using CRISPR-Cas9 genome editing.
: 给通讯作者写信问了，然后第一作者的回复是这样的:
: for the original virus we have been using standard calcium phosphate
: transfection wit plasmid ratios of 6:10:1.5 (all ug per 10 cm dish) for
: vector:psPAX2:pMD2.G.
: The virus was collected at around 24-28h and 36-40h post transfection and
: concentrated 50-100x with ultrazentrifugation at approx 100k x g for 2h.
genetic
【在 m********2 的大作中提到】
: Nat Biotechnol. 2014 Sep;32(9):941-6. doi: 10.1038/nbt.2951. Epub 2014 Jun
: 22.
: Generation of mouse models of myeloid malignancy with combinatorial genetic
: lesions using CRISPR-Cas9 genome editing.
: 给通讯作者写信问了，然后第一作者的回复是这样的:
: for the original virus we have been using standard calcium phosphate
: transfection wit plasmid ratios of 6:10:1.5 (all ug per 10 cm dish) for
: vector:psPAX2:pMD2.G.
: The virus was collected at around 24-28h and 36-40h post transfection and
: concentrated 50-100x with ultrazentrifugation at approx 100k x g for 2h.
T*m
18 楼
也去Costco看看。
【在 x******2 的大作中提到】
: 决定买个新的了，现在就去BEST BUY看去，，，
【在 x******2 的大作中提到】
: 决定买个新的了，现在就去BEST BUY看去，，，
m*2
19 楼
那他们文章上面显示的转染效率很高啊，达到40％.
那个第一作者说，现在他们的转染效率也很稳定在20％左右，为什么我从来没有达到过
，我也做了几年慢病毒了
【在 z*t 的大作中提到】
: 我觉得是系统性问题...基本和我们的经验一致
:
: genetic
那个第一作者说，现在他们的转染效率也很稳定在20％左右，为什么我从来没有达到过
，我也做了几年慢病毒了
【在 z*t 的大作中提到】
: 我觉得是系统性问题...基本和我们的经验一致
:
: genetic
m*6
20 楼
07年买的，是可以换了。最近刚买了一个60寸的，999刀。
还是薄型的，07那个，背后有个大肚子吧。
另外，可能是灯泡坏了，网上买的话，150刀左右吧，装的话，难度不大。我家儿子曾
经装过。
还是薄型的，07那个，背后有个大肚子吧。
另外，可能是灯泡坏了，网上买的话，150刀左右吧，装的话，难度不大。我家儿子曾
经装过。
m*2
21 楼
我觉得这种回答是非常不负责任的方式，当然也是非常常用的。
既然文章里的转染效率那么好，其他人也应该能做出来，如果有什么窍门，应该把
protocol写出来，到底用的什么293细胞，什么牌子的PBS，catalog number等等都列出
来，现在nature系列杂志不是都要求列出catalog number吗。
Unfortunately production of virus is highly dependent on local factors like
the actual batch of 293T cells, supplier of medium and supplements, FBS and
potentially many more factors.
We did spend quite some time till it was optimized and from my own
experience I can unfortunately tell you that producing virus with 1kb insert
size or 5.5kb insert size are completely different things.
This also means that there was no miracle to the protocols we used to
generate the virus but optimization of the most influential factors was
needed.
既然文章里的转染效率那么好，其他人也应该能做出来，如果有什么窍门，应该把
protocol写出来，到底用的什么293细胞，什么牌子的PBS，catalog number等等都列出
来，现在nature系列杂志不是都要求列出catalog number吗。
Unfortunately production of virus is highly dependent on local factors like
the actual batch of 293T cells, supplier of medium and supplements, FBS and
potentially many more factors.
We did spend quite some time till it was optimized and from my own
experience I can unfortunately tell you that producing virus with 1kb insert
size or 5.5kb insert size are completely different things.
This also means that there was no miracle to the protocols we used to
generate the virus but optimization of the most influential factors was
needed.
h*e
22 楼
货比3家，也可以在amazon看看， 我们家两个电视都是amazon买的，不过那时的amazon
不charge sale tax， 买大件合算，现在没这个优势了。
【在 x******2 的大作中提到】
: 决定买个新的了，现在就去BEST BUY看去，，，
不charge sale tax， 买大件合算，现在没这个优势了。
【在 x******2 的大作中提到】
: 决定买个新的了，现在就去BEST BUY看去，，，
j*i
23 楼
生物里边有一种造假就是数据夸大，提高20%说成90%，2倍说成10倍。你还不好证实他
造假，毕竟是有提高的。
造假，毕竟是有提高的。
M*t
24 楼
我勒个去，一台电视居然看那么久？我每三年不换个大的就心痒痒。
这电视的情况说是显像管被烧了其实错的也没有那么远，呵呵，你LD是文科生吧？显像
没有数码一说，要么是等离子plasma要么是LCD要么是LED。
说白了，现在的平板电视是里面有个灯，往屏幕上打白光，通过不同的技术，使白光分
离出不同的色彩，成像。所谓的LCD或LED，无非就是里面那个灯是怎么发光的。
你们家这个明显就是光源坏了，可以修，不过没啥必要。56寸的有丢的时候也就800-10
00。话又说回来，你07年就能买得起2000的大彩电，不会越过越回去了吧？如果我是你
，就整个70-80寸的，也就3000多4000的样子。
DONATE
【在 x******2 的大作中提到】
: 前天，我们的电视正看着时，画面就突然模糊了，不到1分钟的时间，图像就不显示了
: ，但声音依旧。我马上反应，是显像管被烧了，但LD说，这是数码电视，没有显现管之
: 说。OK，，
: 这个电视是2007年买的，56IN，当时买时是2千多点。其中长途搬家2次，虽然是专业的
: 搬家公司有专门的包装保护，颠簸震动是难免的。现在，我家LD的意见是把电视DONATE
: ,再买个新的。新的这么大，现在只要800刀就可以买到。（我 怀疑中）
: 请懂的同学帮我分析分析：修理要花多少钱？新的56IN 数码电视800刀真能搞定？
这电视的情况说是显像管被烧了其实错的也没有那么远，呵呵，你LD是文科生吧？显像
没有数码一说，要么是等离子plasma要么是LCD要么是LED。
说白了，现在的平板电视是里面有个灯，往屏幕上打白光，通过不同的技术，使白光分
离出不同的色彩，成像。所谓的LCD或LED，无非就是里面那个灯是怎么发光的。
你们家这个明显就是光源坏了，可以修，不过没啥必要。56寸的有丢的时候也就800-10
00。话又说回来，你07年就能买得起2000的大彩电，不会越过越回去了吧？如果我是你
，就整个70-80寸的，也就3000多4000的样子。
DONATE
【在 x******2 的大作中提到】
: 前天，我们的电视正看着时，画面就突然模糊了，不到1分钟的时间，图像就不显示了
: ，但声音依旧。我马上反应，是显像管被烧了，但LD说，这是数码电视，没有显现管之
: 说。OK，，
: 这个电视是2007年买的，56IN，当时买时是2千多点。其中长途搬家2次，虽然是专业的
: 搬家公司有专门的包装保护，颠簸震动是难免的。现在，我家LD的意见是把电视DONATE
: ,再买个新的。新的这么大，现在只要800刀就可以买到。（我 怀疑中）
: 请懂的同学帮我分析分析：修理要花多少钱？新的56IN 数码电视800刀真能搞定？
j*i
25 楼
如果楼主能顺利包出一个普通的lenti gfp的话，那以下这句话是不成立的－
Unfortunately production of virus is highly dependent on local factors like
the actual batch of 293T cells, supplier of medium and supplements, FBS and
potentially many more factors.
Unfortunately production of virus is highly dependent on local factors like
the actual batch of 293T cells, supplier of medium and supplements, FBS and
potentially many more factors.
M*t
26 楼
现在买还是划算，免费送到你家。
amazon
【在 h******e 的大作中提到】
: 货比3家，也可以在amazon看看， 我们家两个电视都是amazon买的，不过那时的amazon
: 不charge sale tax， 买大件合算，现在没这个优势了。
amazon
【在 h******e 的大作中提到】
: 货比3家，也可以在amazon看看， 我们家两个电视都是amazon买的，不过那时的amazon
: 不charge sale tax， 买大件合算，现在没这个优势了。
z*t
27 楼
他们好像是Ko 了某个gene?或者select了好的data show出来
我的经验是一般没有advantage 的话HSC transduction在20%左右
【在 m********2 的大作中提到】
: 那他们文章上面显示的转染效率很高啊，达到40％.
: 那个第一作者说，现在他们的转染效率也很稳定在20％左右，为什么我从来没有达到过
: ，我也做了几年慢病毒了
我的经验是一般没有advantage 的话HSC transduction在20%左右
【在 m********2 的大作中提到】
: 那他们文章上面显示的转染效率很高啊，达到40％.
: 那个第一作者说，现在他们的转染效率也很稳定在20％左右，为什么我从来没有达到过
: ，我也做了几年慢病毒了
M*t
28 楼
对，还是女人心细。07年的估计是背投，背后有个大屁肚(你见过谁的肚子长背后？)
那个技术很烂，成像贼不清楚，色彩失真严重，体积巨大且重，而且耗电也比LCD和LED
的大。
【在 m**6 的大作中提到】
: 07年买的，是可以换了。最近刚买了一个60寸的，999刀。
: 还是薄型的，07那个，背后有个大肚子吧。
: 另外，可能是灯泡坏了，网上买的话，150刀左右吧，装的话，难度不大。我家儿子曾
: 经装过。
那个技术很烂，成像贼不清楚，色彩失真严重，体积巨大且重，而且耗电也比LCD和LED
的大。
【在 m**6 的大作中提到】
: 07年买的，是可以换了。最近刚买了一个60寸的，999刀。
: 还是薄型的，07那个，背后有个大肚子吧。
: 另外，可能是灯泡坏了，网上买的话，150刀左右吧，装的话，难度不大。我家儿子曾
: 经装过。
m*2
29 楼
我在用他们的质粒的同时一直有一个阳性对照，也是lenti backbone，阳性对照工作非
常好。
看看通讯作者，还挺厉害的，算是个rising star，说不定以后还要审我的文章呢，忍了
like
and
【在 j******i 的大作中提到】
: 如果楼主能顺利包出一个普通的lenti gfp的话，那以下这句话是不成立的－
: Unfortunately production of virus is highly dependent on local factors like
: the actual batch of 293T cells, supplier of medium and supplements, FBS and
: potentially many more factors.
常好。
看看通讯作者，还挺厉害的，算是个rising star，说不定以后还要审我的文章呢，忍了
like
and
【在 j******i 的大作中提到】
: 如果楼主能顺利包出一个普通的lenti gfp的话，那以下这句话是不成立的－
: Unfortunately production of virus is highly dependent on local factors like
: the actual batch of 293T cells, supplier of medium and supplements, FBS and
: potentially many more factors.
c*p
30 楼
真土豪啊
56寸的现在800多肯定能买到
10
【在 M*****t 的大作中提到】
: 我勒个去，一台电视居然看那么久？我每三年不换个大的就心痒痒。
: 这电视的情况说是显像管被烧了其实错的也没有那么远，呵呵，你LD是文科生吧？显像
: 没有数码一说，要么是等离子plasma要么是LCD要么是LED。
: 说白了，现在的平板电视是里面有个灯，往屏幕上打白光，通过不同的技术，使白光分
: 离出不同的色彩，成像。所谓的LCD或LED，无非就是里面那个灯是怎么发光的。
: 你们家这个明显就是光源坏了，可以修，不过没啥必要。56寸的有丢的时候也就800-10
: 00。话又说回来，你07年就能买得起2000的大彩电，不会越过越回去了吧？如果我是你
: ，就整个70-80寸的，也就3000多4000的样子。
:
: DONATE
56寸的现在800多肯定能买到
10
【在 M*****t 的大作中提到】
: 我勒个去，一台电视居然看那么久？我每三年不换个大的就心痒痒。
: 这电视的情况说是显像管被烧了其实错的也没有那么远，呵呵，你LD是文科生吧？显像
: 没有数码一说，要么是等离子plasma要么是LCD要么是LED。
: 说白了，现在的平板电视是里面有个灯，往屏幕上打白光，通过不同的技术，使白光分
: 离出不同的色彩，成像。所谓的LCD或LED，无非就是里面那个灯是怎么发光的。
: 你们家这个明显就是光源坏了，可以修，不过没啥必要。56寸的有丢的时候也就800-10
: 00。话又说回来，你07年就能买得起2000的大彩电，不会越过越回去了吧？如果我是你
: ，就整个70-80寸的，也就3000多4000的样子。
:
: DONATE
m*2
31 楼
请转方舟子
M*t
32 楼
妹纸，人家2007年是$2K的水平，现在过了这么多年，还不该涨点儿？
【在 c***p 的大作中提到】
: 真土豪啊
: 56寸的现在800多肯定能买到
:
: 10
【在 c***p 的大作中提到】
: 真土豪啊
: 56寸的现在800多肯定能买到
:
: 10
m*2
33 楼
问题是我用他的质粒，用了不同的方法转染HSC，根本就没有成功。
转染一些细胞系倒是能看到绿色细胞。
【在 z*t 的大作中提到】
: 他们好像是Ko 了某个gene?或者select了好的data show出来
: 我的经验是一般没有advantage 的话HSC transduction在20%左右
转染一些细胞系倒是能看到绿色细胞。
【在 z*t 的大作中提到】
: 他们好像是Ko 了某个gene?或者select了好的data show出来
: 我的经验是一般没有advantage 的话HSC transduction在20%左右
c*p
34 楼
那不如直接搞个投影看算了
【在 M*****t 的大作中提到】
: 妹纸，人家2007年是$2K的水平，现在过了这么多年，还不该涨点儿？
【在 M*****t 的大作中提到】
: 妹纸，人家2007年是$2K的水平，现在过了这么多年，还不该涨点儿？
j*i
35 楼
有用Retronectin吗？有Retronectin的话，用普通的gfp virus转20-40%还是很容易的。
【在 m********2 的大作中提到】
: 问题是我用他的质粒，用了不同的方法转染HSC，根本就没有成功。
: 转染一些细胞系倒是能看到绿色细胞。
【在 m********2 的大作中提到】
: 问题是我用他的质粒，用了不同的方法转染HSC，根本就没有成功。
: 转染一些细胞系倒是能看到绿色细胞。
M*t
36 楼
no no no.. 投影成本太高效果一般，因为哥也玩儿过。
如果不买好的屏幕，基本就是废的，因为对环境弱光的要求相当高，不然画质很糙。
好的屏幕就很贵了。
【在 c***p 的大作中提到】
: 那不如直接搞个投影看算了
如果不买好的屏幕，基本就是废的，因为对环境弱光的要求相当高，不然画质很糙。
好的屏幕就很贵了。
【在 c***p 的大作中提到】
: 那不如直接搞个投影看算了
m*2
37 楼
我们自己修饰了一个慢病毒载体，不用retronectin，也不用polybrene，转染
HSC轻轻松松能达到60％.
他的那个载体我浓缩了500倍，用了retronectin，根本没有GFP阳性细胞
的。
【在 j******i 的大作中提到】
: 有用Retronectin吗？有Retronectin的话，用普通的gfp virus转20-40%还是很容易的。
HSC轻轻松松能达到60％.
他的那个载体我浓缩了500倍，用了retronectin，根本没有GFP阳性细胞
的。
【在 j******i 的大作中提到】
: 有用Retronectin吗？有Retronectin的话，用普通的gfp virus转20-40%还是很容易的。
c*p
38 楼
贵怕啥，你土豪嘛 lol
我觉得电视60左右就不错了，太大了看起来费尽
【在 M*****t 的大作中提到】
: no no no.. 投影成本太高效果一般，因为哥也玩儿过。
: 如果不买好的屏幕，基本就是废的，因为对环境弱光的要求相当高，不然画质很糙。
: 好的屏幕就很贵了。
我觉得电视60左右就不错了，太大了看起来费尽
【在 M*****t 的大作中提到】
: no no no.. 投影成本太高效果一般，因为哥也玩儿过。
: 如果不买好的屏幕，基本就是废的，因为对环境弱光的要求相当高，不然画质很糙。
: 好的屏幕就很贵了。
j*i
39 楼
😓
【在 m********2 的大作中提到】
: 我们自己修饰了一个慢病毒载体，不用retronectin，也不用polybrene，转染
: HSC轻轻松松能达到60％.
: 他的那个载体我浓缩了500倍，用了retronectin，根本没有GFP阳性细胞
:
: 的。
【在 m********2 的大作中提到】
: 我们自己修饰了一个慢病毒载体，不用retronectin，也不用polybrene，转染
: HSC轻轻松松能达到60％.
: 他的那个载体我浓缩了500倍，用了retronectin，根本没有GFP阳性细胞
:
: 的。
h*e
40 楼
不如不看电视
【在 c***p 的大作中提到】
: 那不如直接搞个投影看算了
【在 c***p 的大作中提到】
: 那不如直接搞个投影看算了
z*u
41 楼
借问一下有人使用过 R26-CMV-CAS9 老鼠 JAX 024858 做过比如knockin 或者knockout
老鼠不。感觉好用不。
老鼠不。感觉好用不。
h*e
42 楼
我家56inch的电视机才1200， 但是去买了个配套的电视机架子却花了600刀，这是什么
世道，那么复杂的电子玩意也就是一个木头架子的两倍的价格
【在 M*****t 的大作中提到】
: 妹纸，人家2007年是$2K的水平，现在过了这么多年，还不该涨点儿？
世道，那么复杂的电子玩意也就是一个木头架子的两倍的价格
【在 M*****t 的大作中提到】
: 妹纸，人家2007年是$2K的水平，现在过了这么多年，还不该涨点儿？
m*2
43 楼
是个好工具，但是如果想用人的细胞就还需要cas9病毒了
这个小鼠也有个问题就是，不知道CAG promoter是不是universe表达的
knockout
【在 z****u 的大作中提到】
: 借问一下有人使用过 R26-CMV-CAS9 老鼠 JAX 024858 做过比如knockin 或者knockout
: 老鼠不。感觉好用不。
这个小鼠也有个问题就是，不知道CAG promoter是不是universe表达的
knockout
【在 z****u 的大作中提到】
: 借问一下有人使用过 R26-CMV-CAS9 老鼠 JAX 024858 做过比如knockin 或者knockout
: 老鼠不。感觉好用不。
M*t
44 楼
我是不怕，我不是替人家着想吗？
【在 c***p 的大作中提到】
: 贵怕啥，你土豪嘛 lol
: 我觉得电视60左右就不错了，太大了看起来费尽
【在 c***p 的大作中提到】
: 贵怕啥，你土豪嘛 lol
: 我觉得电视60左右就不错了，太大了看起来费尽
z*t
45 楼
我觉得是系统性问题...基本和我们的经验一致
genetic
【在 m********2 的大作中提到】
: Nat Biotechnol. 2014 Sep;32(9):941-6. doi: 10.1038/nbt.2951. Epub 2014 Jun
: 22.
: Generation of mouse models of myeloid malignancy with combinatorial genetic
: lesions using CRISPR-Cas9 genome editing.
: 给通讯作者写信问了，然后第一作者的回复是这样的:
: for the original virus we have been using standard calcium phosphate
: transfection wit plasmid ratios of 6:10:1.5 (all ug per 10 cm dish) for
: vector:psPAX2:pMD2.G.
: The virus was collected at around 24-28h and 36-40h post transfection and
: concentrated 50-100x with ultrazentrifugation at approx 100k x g for 2h.
genetic
【在 m********2 的大作中提到】
: Nat Biotechnol. 2014 Sep;32(9):941-6. doi: 10.1038/nbt.2951. Epub 2014 Jun
: 22.
: Generation of mouse models of myeloid malignancy with combinatorial genetic
: lesions using CRISPR-Cas9 genome editing.
: 给通讯作者写信问了，然后第一作者的回复是这样的:
: for the original virus we have been using standard calcium phosphate
: transfection wit plasmid ratios of 6:10:1.5 (all ug per 10 cm dish) for
: vector:psPAX2:pMD2.G.
: The virus was collected at around 24-28h and 36-40h post transfection and
: concentrated 50-100x with ultrazentrifugation at approx 100k x g for 2h.
M*t
46 楼
电子玩意儿的制造成本并不高。
【在 h******e 的大作中提到】
: 我家56inch的电视机才1200， 但是去买了个配套的电视机架子却花了600刀，这是什么
: 世道，那么复杂的电子玩意也就是一个木头架子的两倍的价格
【在 h******e 的大作中提到】
: 我家56inch的电视机才1200， 但是去买了个配套的电视机架子却花了600刀，这是什么
: 世道，那么复杂的电子玩意也就是一个木头架子的两倍的价格
z*t
47 楼
我觉得是系统性问题...基本和我们的经验一致
genetic
【在 m********2 的大作中提到】
: Nat Biotechnol. 2014 Sep;32(9):941-6. doi: 10.1038/nbt.2951. Epub 2014 Jun
: 22.
: Generation of mouse models of myeloid malignancy with combinatorial genetic
: lesions using CRISPR-Cas9 genome editing.
: 给通讯作者写信问了，然后第一作者的回复是这样的:
: for the original virus we have been using standard calcium phosphate
: transfection wit plasmid ratios of 6:10:1.5 (all ug per 10 cm dish) for
: vector:psPAX2:pMD2.G.
: The virus was collected at around 24-28h and 36-40h post transfection and
: concentrated 50-100x with ultrazentrifugation at approx 100k x g for 2h.
genetic
【在 m********2 的大作中提到】
: Nat Biotechnol. 2014 Sep;32(9):941-6. doi: 10.1038/nbt.2951. Epub 2014 Jun
: 22.
: Generation of mouse models of myeloid malignancy with combinatorial genetic
: lesions using CRISPR-Cas9 genome editing.
: 给通讯作者写信问了，然后第一作者的回复是这样的:
: for the original virus we have been using standard calcium phosphate
: transfection wit plasmid ratios of 6:10:1.5 (all ug per 10 cm dish) for
: vector:psPAX2:pMD2.G.
: The virus was collected at around 24-28h and 36-40h post transfection and
: concentrated 50-100x with ultrazentrifugation at approx 100k x g for 2h.
x*2
48 楼
我是急性子，看中了就算，不爱货比。 -扪头一个。 --LOL
【在 T*******m 的大作中提到】
: 也去Costco看看。
【在 T*******m 的大作中提到】
: 也去Costco看看。
j*i
49 楼
系统性问题是什么意思？
【在 z*t 的大作中提到】
: 我觉得是系统性问题...基本和我们的经验一致
:
: genetic
【在 z*t 的大作中提到】
: 我觉得是系统性问题...基本和我们的经验一致
:
: genetic
x*2
50 楼
不是大肚子，是薄型的。 7年了，也值啦。
你儿子真棒啊，希望我儿子再过几年，也可以修电器。目前，家里要安装小物件，他是
总工程师。
但是，上次，那个篮球架，他指挥错了，把升降的给安反啦，不过塞个东西咔住，也问
题不大。
正好借此教育一番，要是以后设计大楼大桥，要是反了，那可是非常严肃的问题了。
【在 m**6 的大作中提到】
: 07年买的，是可以换了。最近刚买了一个60寸的，999刀。
: 还是薄型的，07那个，背后有个大肚子吧。
: 另外，可能是灯泡坏了，网上买的话，150刀左右吧，装的话，难度不大。我家儿子曾
: 经装过。
你儿子真棒啊，希望我儿子再过几年，也可以修电器。目前，家里要安装小物件，他是
总工程师。
但是，上次，那个篮球架，他指挥错了，把升降的给安反啦，不过塞个东西咔住，也问
题不大。
正好借此教育一番，要是以后设计大楼大桥，要是反了，那可是非常严肃的问题了。
【在 m**6 的大作中提到】
: 07年买的，是可以换了。最近刚买了一个60寸的，999刀。
: 还是薄型的，07那个，背后有个大肚子吧。
: 另外，可能是灯泡坏了，网上买的话，150刀左右吧，装的话，难度不大。我家儿子曾
: 经装过。
x*2
51 楼
报告辣酱，俺已经在BEST BUY订了货啦，这个星期5送来。 SHARP,60IN,原价1200，买
成1000，他们刚好有SALE,省了200刀。
amazon
【在 h******e 的大作中提到】
: 货比3家，也可以在amazon看看， 我们家两个电视都是amazon买的，不过那时的amazon
: 不charge sale tax， 买大件合算，现在没这个优势了。
成1000，他们刚好有SALE,省了200刀。
amazon
【在 h******e 的大作中提到】
: 货比3家，也可以在amazon看看， 我们家两个电视都是amazon买的，不过那时的amazon
: 不charge sale tax， 买大件合算，现在没这个优势了。
l*d
52 楼
强RE，我们家还向往有个家庭影院！
我家都是每人一个电脑，很少有人看电视了，电视有广告，太不爽了。Ipad 也好几
个，根本没人看电视了。
【在 c***p 的大作中提到】
: 那不如直接搞个投影看算了
我家都是每人一个电脑，很少有人看电视了，电视有广告，太不爽了。Ipad 也好几
个，根本没人看电视了。
【在 c***p 的大作中提到】
: 那不如直接搞个投影看算了
z*e
53 楼
实在不舍得，可以在craigslist上卖卖看。也许会摆弄的人可以买回去拆零件利用？
的，，算了，算是帮助一下那些问题孩子吧。 难道这次，再放弃一只小羊，，给谁吃
尼，，
【在 x******2 的大作中提到】
: 咳，上次，俺家领导把那辆老车给捐了，其实卖的话，还是可以回收更多的现大 羊的
: ，，算了，算是帮助一下那些问题孩子吧。 难道这次，再放弃一只小羊，，给谁吃尼
: ，，
的，，算了，算是帮助一下那些问题孩子吧。 难道这次，再放弃一只小羊，，给谁吃
尼，，
【在 x******2 的大作中提到】
: 咳，上次，俺家领导把那辆老车给捐了，其实卖的话，还是可以回收更多的现大 羊的
: ，，算了，算是帮助一下那些问题孩子吧。 难道这次，再放弃一只小羊，，给谁吃尼
: ，，
z*e
54 楼
还有hhgreg, brandsmart, tiger direct, newegg, amazon等等～
【在 x******2 的大作中提到】
: 决定买个新的了，现在就去BEST BUY看去，，，
【在 x******2 的大作中提到】
: 决定买个新的了，现在就去BEST BUY看去，，，
x*2
55 楼
土豆是土豪，还是个爱折腾的土豪。 能看就行啦，俺要求不高滴。 现在真是更新换代
的快啊，今天买的这个是SLIM LCD, 不用象先前那个看NETFILIS还有链接电脑，现在的
直接用按键就可以啦，方便啊。
10
【在 M*****t 的大作中提到】
: 我勒个去，一台电视居然看那么久？我每三年不换个大的就心痒痒。
: 这电视的情况说是显像管被烧了其实错的也没有那么远，呵呵，你LD是文科生吧？显像
: 没有数码一说，要么是等离子plasma要么是LCD要么是LED。
: 说白了，现在的平板电视是里面有个灯，往屏幕上打白光，通过不同的技术，使白光分
: 离出不同的色彩，成像。所谓的LCD或LED，无非就是里面那个灯是怎么发光的。
: 你们家这个明显就是光源坏了，可以修，不过没啥必要。56寸的有丢的时候也就800-10
: 00。话又说回来，你07年就能买得起2000的大彩电，不会越过越回去了吧？如果我是你
: ，就整个70-80寸的，也就3000多4000的样子。
:
: DONATE
的快啊，今天买的这个是SLIM LCD, 不用象先前那个看NETFILIS还有链接电脑，现在的
直接用按键就可以啦，方便啊。
10
【在 M*****t 的大作中提到】
: 我勒个去，一台电视居然看那么久？我每三年不换个大的就心痒痒。
: 这电视的情况说是显像管被烧了其实错的也没有那么远，呵呵，你LD是文科生吧？显像
: 没有数码一说，要么是等离子plasma要么是LCD要么是LED。
: 说白了，现在的平板电视是里面有个灯，往屏幕上打白光，通过不同的技术，使白光分
: 离出不同的色彩，成像。所谓的LCD或LED，无非就是里面那个灯是怎么发光的。
: 你们家这个明显就是光源坏了，可以修，不过没啥必要。56寸的有丢的时候也就800-10
: 00。话又说回来，你07年就能买得起2000的大彩电，不会越过越回去了吧？如果我是你
: ，就整个70-80寸的，也就3000多4000的样子。
:
: DONATE
z*e
56 楼
电视广告的话用DVR录下来快进就好了。我现在每次看球赛都这样，可以晚半个小时看
，看到最后进度就追上了～
个，根本没人看电视了。
【在 l*********d 的大作中提到】
: 强RE，我们家还向往有个家庭影院！
: 我家都是每人一个电脑，很少有人看电视了，电视有广告，太不爽了。Ipad 也好几
: 个，根本没人看电视了。
，看到最后进度就追上了～
个，根本没人看电视了。
【在 l*********d 的大作中提到】
: 强RE，我们家还向往有个家庭影院！
: 我家都是每人一个电脑，很少有人看电视了，电视有广告，太不爽了。Ipad 也好几
: 个，根本没人看电视了。
x*2
57 楼
07已经有超薄的啦，我那个只能说是薄的，没有屁兜。
图像色彩还是很好的，是HP的。再配2个音箱耳朵2边，造型很好看，现在几乎没有这个
造型的了。
LED
【在 M*****t 的大作中提到】
: 对，还是女人心细。07年的估计是背投，背后有个大屁肚(你见过谁的肚子长背后？)
: 那个技术很烂，成像贼不清楚，色彩失真严重，体积巨大且重，而且耗电也比LCD和LED
: 的大。
图像色彩还是很好的，是HP的。再配2个音箱耳朵2边，造型很好看，现在几乎没有这个
造型的了。
LED
【在 M*****t 的大作中提到】
: 对，还是女人心细。07年的估计是背投，背后有个大屁肚(你见过谁的肚子长背后？)
: 那个技术很烂，成像贼不清楚，色彩失真严重，体积巨大且重，而且耗电也比LCD和LED
: 的大。
x*2
58 楼
刚在店里看了，可以的。
【在 c***p 的大作中提到】
: 真土豪啊
: 56寸的现在800多肯定能买到
:
: 10
【在 c***p 的大作中提到】
: 真土豪啊
: 56寸的现在800多肯定能买到
:
: 10
p*y
59 楼
我家在costco新买的还不到2个月，松下的。 890块 SMART TV . 58IN .看着很爽。
best buy 没有deal的时候。还是比costco 贵一点点。虽然不是男的，也写出来供你参考
【在 x******2 的大作中提到】
: 决定买个新的了，现在就去BEST BUY看去，，，
best buy 没有deal的时候。还是比costco 贵一点点。虽然不是男的，也写出来供你参考
【在 x******2 的大作中提到】
: 决定买个新的了，现在就去BEST BUY看去，，，
x*2
60 楼
当时卖的贵啊，没办法，要省吃节用才买的起啊。
【在 M*****t 的大作中提到】
: 妹纸，人家2007年是$2K的水平，现在过了这么多年，还不该涨点儿？
【在 M*****t 的大作中提到】
: 妹纸，人家2007年是$2K的水平，现在过了这么多年，还不该涨点儿？
x*2
61 楼
你家那豪宅，配个影院更酷了。 我也不大爱看电视的，但有时看下电影。我家LD喜欢
看新闻，足球，就得要大屏幕才过瘾。
【在 l*********d 的大作中提到】
: 强RE，我们家还向往有个家庭影院！
: 我家都是每人一个电脑，很少有人看电视了，电视有广告，太不爽了。Ipad 也好几
: 个，根本没人看电视了。
看新闻，足球，就得要大屏幕才过瘾。
【在 l*********d 的大作中提到】
: 强RE，我们家还向往有个家庭影院！
: 我家都是每人一个电脑，很少有人看电视了，电视有广告，太不爽了。Ipad 也好几
: 个，根本没人看电视了。
p*y
62 楼
对了，俺家新买的电视也是超薄的，和普通中小学课本差不多厚
【在 x******2 的大作中提到】
: 当时卖的贵啊，没办法，要省吃节用才买的起啊。
【在 x******2 的大作中提到】
: 当时卖的贵啊，没办法，要省吃节用才买的起啊。
x*2
63 楼
算了，太麻烦了，找个DONATE的机构，捐了去省事。
【在 z*****e 的大作中提到】
: 实在不舍得，可以在craigslist上卖卖看。也许会摆弄的人可以买回去拆零件利用？
:
: 的，，算了，算是帮助一下那些问题孩子吧。 难道这次，再放弃一只小羊，，给谁吃
: 尼，，
【在 z*****e 的大作中提到】
: 实在不舍得，可以在craigslist上卖卖看。也许会摆弄的人可以买回去拆零件利用？
:
: 的，，算了，算是帮助一下那些问题孩子吧。 难道这次，再放弃一只小羊，，给谁吃
: 尼，，
x*2
64 楼
已经在BEST BUY买了。 韩国的SHARP，超薄型，60IN, 包税1082刀，原价1199.99,刚好
打折，省下200刀。
参考
【在 p*****y 的大作中提到】
: 我家在costco新买的还不到2个月，松下的。 890块 SMART TV . 58IN .看着很爽。
: best buy 没有deal的时候。还是比costco 贵一点点。虽然不是男的，也写出来供你参考
打折，省下200刀。
参考
【在 p*****y 的大作中提到】
: 我家在costco新买的还不到2个月，松下的。 890块 SMART TV . 58IN .看着很爽。
: best buy 没有deal的时候。还是比costco 贵一点点。虽然不是男的，也写出来供你参考
b*7
65 楼
7年了，换了吧
x*2
66 楼
报告不知道，已换！
【在 b********7 的大作中提到】
: 7年了，换了吧
【在 b********7 的大作中提到】
: 7年了，换了吧
x*2
67 楼
我家LD忙的很，要他花时间去处理这琐事，他要疯掉的。我是怕麻烦的，去看那满眼的
英文网站，我要疯掉了。 给人拿走，最方便省事。
【在 z*****e 的大作中提到】
: 还有hhgreg, brandsmart, tiger direct, newegg, amazon等等～
英文网站，我要疯掉了。 给人拿走，最方便省事。
【在 z*****e 的大作中提到】
: 还有hhgreg, brandsmart, tiger direct, newegg, amazon等等～
z*e
68 楼
土豪姐姐，我们正式交个朋友吧 ;-)
的英文网站，我要疯掉了。 给人拿走，最方便省事。
【在 x******2 的大作中提到】
: 我家LD忙的很，要他花时间去处理这琐事，他要疯掉的。我是怕麻烦的，去看那满眼的
: 英文网站，我要疯掉了。 给人拿走，最方便省事。
的英文网站，我要疯掉了。 给人拿走，最方便省事。
【在 x******2 的大作中提到】
: 我家LD忙的很，要他花时间去处理这琐事，他要疯掉的。我是怕麻烦的，去看那满眼的
: 英文网站，我要疯掉了。 给人拿走，最方便省事。
b*7
69 楼
哈哈。 求交往， 求包养
【在 z*****e 的大作中提到】
: 土豪姐姐，我们正式交个朋友吧 ;-)
:
: 的英文网站，我要疯掉了。 给人拿走，最方便省事。
【在 z*****e 的大作中提到】
: 土豪姐姐，我们正式交个朋友吧 ;-)
:
: 的英文网站，我要疯掉了。 给人拿走，最方便省事。
x*2
70 楼
俺土可不豪啊。 --LOL 最近流行这么说？好像常见这句话呀
你真想入姊妹团伙？ 我同意，非常滴同意。
【在 z*****e 的大作中提到】
: 土豪姐姐，我们正式交个朋友吧 ;-)
:
: 的英文网站，我要疯掉了。 给人拿走，最方便省事。
你真想入姊妹团伙？ 我同意，非常滴同意。
【在 z*****e 的大作中提到】
: 土豪姐姐，我们正式交个朋友吧 ;-)
:
: 的英文网站，我要疯掉了。 给人拿走，最方便省事。
x*2
71 楼
先查查俺的口袋再决定，，小伍，浮云可是真土豪哦
【在 b********7 的大作中提到】
: 哈哈。 求交往， 求包养
【在 b********7 的大作中提到】
: 哈哈。 求交往， 求包养
f*c
72 楼
我想买个70的，一直下不了手
f*c
73 楼
秋实应该买个3D电视，看故事片不错，而且已经有裸眼3D
x*2
74 楼
等你现在的坏了，再下手。
【在 f*****c 的大作中提到】
: 我想买个70的，一直下不了手
【在 f*****c 的大作中提到】
: 我想买个70的，一直下不了手
x*2
75 楼
啊，还有裸眼的3D ,我彻底的OUT了。
已经买了，也不想花太多钱电视上。我们家还是喜欢有大片时，周末在外头吃个BRUNCH
，然后去电影院里看，更有气势和氛围。
【在 f*****c 的大作中提到】
: 秋实应该买个3D电视，看故事片不错，而且已经有裸眼3D
已经买了，也不想花太多钱电视上。我们家还是喜欢有大片时，周末在外头吃个BRUNCH
，然后去电影院里看，更有气势和氛围。
【在 f*****c 的大作中提到】
: 秋实应该买个3D电视，看故事片不错，而且已经有裸眼3D
b*h
76 楼
60寸的很好！
当初我买60寸的时候觉得真大啊，现在市面上有了80寸的，就看那个60的越来越觉得小
，哈哈。
【在 x******2 的大作中提到】
: 报告辣酱，俺已经在BEST BUY订了货啦，这个星期5送来。 SHARP,60IN,原价1200，买
: 成1000，他们刚好有SALE,省了200刀。
:
: amazon
当初我买60寸的时候觉得真大啊，现在市面上有了80寸的，就看那个60的越来越觉得小
，哈哈。
【在 x******2 的大作中提到】
: 报告辣酱，俺已经在BEST BUY订了货啦，这个星期5送来。 SHARP,60IN,原价1200，买
: 成1000，他们刚好有SALE,省了200刀。
:
: amazon
h*e
77 楼
那让你lg下手
【在 f*****c 的大作中提到】
: 我想买个70的，一直下不了手
【在 f*****c 的大作中提到】
: 我想买个70的，一直下不了手
y*8
78 楼
捐给我吧！
DONATE
【在 x******2 的大作中提到】
: 前天，我们的电视正看着时，画面就突然模糊了，不到1分钟的时间，图像就不显示了
: ，但声音依旧。我马上反应，是显像管被烧了，但LD说，这是数码电视，没有显现管之
: 说。OK，，
: 这个电视是2007年买的，56IN，当时买时是2千多点。其中长途搬家2次，虽然是专业的
: 搬家公司有专门的包装保护，颠簸震动是难免的。现在，我家LD的意见是把电视DONATE
: ,再买个新的。新的这么大，现在只要800刀就可以买到。（我 怀疑中）
: 请懂的同学帮我分析分析：修理要花多少钱？新的56IN 数码电视800刀真能搞定？
DONATE
【在 x******2 的大作中提到】
: 前天，我们的电视正看着时，画面就突然模糊了，不到1分钟的时间，图像就不显示了
: ，但声音依旧。我马上反应，是显像管被烧了，但LD说，这是数码电视，没有显现管之
: 说。OK，，
: 这个电视是2007年买的，56IN，当时买时是2千多点。其中长途搬家2次，虽然是专业的
: 搬家公司有专门的包装保护，颠簸震动是难免的。现在，我家LD的意见是把电视DONATE
: ,再买个新的。新的这么大，现在只要800刀就可以买到。（我 怀疑中）
: 请懂的同学帮我分析分析：修理要花多少钱？新的56IN 数码电视800刀真能搞定？
j*s
79 楼
07年买的，坚决捐，买个更大的。60／65的都有不到1000的。
DONATE
【在 x******2 的大作中提到】
: 前天，我们的电视正看着时，画面就突然模糊了，不到1分钟的时间，图像就不显示了
: ，但声音依旧。我马上反应，是显像管被烧了，但LD说，这是数码电视，没有显现管之
: 说。OK，，
: 这个电视是2007年买的，56IN，当时买时是2千多点。其中长途搬家2次，虽然是专业的
: 搬家公司有专门的包装保护，颠簸震动是难免的。现在，我家LD的意见是把电视DONATE
: ,再买个新的。新的这么大，现在只要800刀就可以买到。（我 怀疑中）
: 请懂的同学帮我分析分析：修理要花多少钱？新的56IN 数码电视800刀真能搞定？
DONATE
【在 x******2 的大作中提到】
: 前天，我们的电视正看着时，画面就突然模糊了，不到1分钟的时间，图像就不显示了
: ，但声音依旧。我马上反应，是显像管被烧了，但LD说，这是数码电视，没有显现管之
: 说。OK，，
: 这个电视是2007年买的，56IN，当时买时是2千多点。其中长途搬家2次，虽然是专业的
: 搬家公司有专门的包装保护，颠簸震动是难免的。现在，我家LD的意见是把电视DONATE
: ,再买个新的。新的这么大，现在只要800刀就可以买到。（我 怀疑中）
: 请懂的同学帮我分析分析：修理要花多少钱？新的56IN 数码电视800刀真能搞定？
x*2
80 楼
这要看电视和沙发间的距离吧，大屏幕太近了，我会头晕。
【在 b********h 的大作中提到】
: 60寸的很好！
: 当初我买60寸的时候觉得真大啊，现在市面上有了80寸的，就看那个60的越来越觉得小
: ，哈哈。
【在 b********h 的大作中提到】
: 60寸的很好！
: 当初我买60寸的时候觉得真大啊，现在市面上有了80寸的，就看那个60的越来越觉得小
: ，哈哈。
x*2
81 楼
对，夫妻一方就得有一个能下手的，俺是说在钱方面。 --LOL
【在 h******e 的大作中提到】
: 那让你lg下手
【在 h******e 的大作中提到】
: 那让你lg下手
x*2
82 楼
你会修？
【在 y*******8 的大作中提到】
: 捐给我吧！
:
: DONATE
【在 y*******8 的大作中提到】
: 捐给我吧！
:
: DONATE
x*2
83 楼
报告COALA，已经下手。 旧的也送到了维修店。
【在 j****s 的大作中提到】
: 07年买的，坚决捐，买个更大的。60／65的都有不到1000的。
:
: DONATE
【在 j****s 的大作中提到】
: 07年买的，坚决捐，买个更大的。60／65的都有不到1000的。
:
: DONATE
f*c
84 楼
哈哈，这样也行？
【在 h******e 的大作中提到】
: 那让你lg下手
【在 h******e 的大作中提到】
: 那让你lg下手
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