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怎样从细胞培养板上收获细胞用于SDS-PAGE?

怎样从细胞培养板上收获细胞用于SDS-PAGE?# Biology - 生物学

d*t2016-04-01 07:04

1 楼

公司不让用offer letter，说是commercial confidential。然后别的文件到现在还没
搞好。想在圣诞节前把OPT申请寄出去，能把那个发PDF版本offer letter的Email放在
OPT申请材料里吗？
谢谢！

v*a2016-04-01 07:04

2 楼

请问大家都是怎样从96孔～12孔板上收获细胞，用来裂解做WB?
不考虑靶蛋白的丰度，一般24孔板用多少微升裂解液裂解，并从中取多少跑SDS-PAGE?
Thanks.

c*a2016-04-01 07:04

3 楼

offer letter不是申请材料必须的啊。
而且你去考古下交流贴，没看出来附上offer letter会加快处理速度。相反还看到很多
抱怨，说跟老婆一起申的，有offer letter的还没批，没offer的先批了。

【在 d********t 的大作中提到】

: 公司不让用offer letter，说是commercial confidential。然后别的文件到现在还没
: 搞好。想在圣诞节前把OPT申请寄出去，能把那个发PDF版本offer letter的Email放在
: OPT申请材料里吗？
: 谢谢！

a*r2016-04-01 07:04

4 楼

我觉得细胞量可能不够做wb
我用那种大dish的也就做个五六次次吧

d*t2016-04-01 07:04

5 楼

Thanks! Just send it. UPS guy said it can only be delivered on Tues.

【在 c*********a 的大作中提到】

: offer letter不是申请材料必须的啊。
: 而且你去考古下交流贴，没看出来附上offer letter会加快处理速度。相反还看到很多
: 抱怨，说跟老婆一起申的，有offer letter的还没批，没offer的先批了。

m*D2016-04-01 07:04

6 楼

6-wellplate， 0.2 m 细胞，一般我用80 ul，最后能有300 ug totalprotein，大约
是15次wb。

x*g2016-04-01 07:04

7 楼

cong zhan

【在 d********t 的大作中提到】

: Thanks! Just send it. UPS guy said it can only be delivered on Tues.

v*e2016-04-01 07:04

8 楼

NP-40 BUFFER
1% NP-40
2 mM EDTA
10% glycerol
150 mM NaCl
50 mM Tris pH 8.0
1 tablet of Roche protease inhibitors per 10 mLs of the buffer.
400ul for 6-well; 200ul for 12-well plate, 120ul for 24-well plate

d*t2016-04-01 07:04

9 楼

Hope I can still hold the job when I got my EAD.

【在 x****g 的大作中提到】

: cong zhan

v*e2016-04-01 07:04

10 楼

wash cell by PBS, add NP-40 buffer in wells, suspend the cell by 200ul
peptide, on ice 20min. collect sup to ep tube, centrifuge at >14000xg at 4
degree, 20 min, harvest the sup

x*g2016-04-01 07:04

11 楼

hopes so, also hope i can get the job soon

【在 d********t 的大作中提到】

: Hope I can still hold the job when I got my EAD.