最好的中秋节礼物# Biology - 生物学
s*6
1 楼
我们的agent很热心地希望在inspection最后出现，和inspector聊聊，看看inspection
的情况。
应该让她来吗？我总觉得她来就不够客观了吧，会影响inspector客观地给我们
inspection report吧？
的情况。
应该让她来吗？我总觉得她来就不够客观了吧，会影响inspector客观地给我们
inspection report吧？
m*D
2 楼
呵呵，今天收到通知，送Nature子刊的文章终于接受了。
这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作，到我说服他就好
几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验，能想到的可能
改进成功率的方式都加进去了。几个月后，终于作完了第一轮，还差点就没拿到我要的
东西。在显微镜下找得头昏眼花，没结果，给老板打个招呼正准备放弃呢，扔细胞培养
皿的那一瞬间，突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下，一个克隆就在培养皿的最边
沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。
这一年来，又是衣原体污染（实验室的host cell line本身就污染了！），又是克隆不
纯，搞得好头疼。最后稿子送出去了，作science这边的reviewer对突变子有兴趣，对
方法没兴趣，意见一堆；作方法的reviewer对突变子本身没兴趣，对方法上所有改进作
用的思路都感兴趣，但对我们没有和其它方法进行试验比较很失望，觉得作为方法的文
章发表有欠缺。。。
老板说：你也好多年没发第一作者的文章了（上次发是2008年，JBC,还好被Faculty
1000选中了），今天回家开瓶酒喝吧。
不错不错，了结了这个，就可以全心全意接一个马上毕业学生的project了。学生这个
project刚发了Nature子刊，看能不能搞个grant。近十年实验室的所有grant都有我的
影子。一个RO1的renewal全靠我筛出来的compound;一个R21在第一次申请失败后我插进
去补数据，第二轮成功；一个DOD的grant虽然是学生为主，但筛选的第二轮的方法就是
我花了几个月来为他develop的；最新的RO1 renewal也是把我上面的mutant cell
lines的数据加进去，并且根据我的方法再提出新的idea后，第三轮才拿下来的。学生
的这个project写了一个proposal,可惜没拿到钱。希望我接手后，文章也发表了，能和
过去十年一样，有奇迹发生。我还需要5-6年的饭碗，把儿子的大学学费解决呢。
我的CRISPR/HDR方法可能对大多数人没有帮助。我是利用mutant的一个特点来筛选的。
我用两个guide sequences把我的基因功能搞掉（我的细胞靠这个基因才能生长）, 先
筛transfected细胞，再用mutant的特性来筛选我要的克隆，成功率很高。挑选出来的
克隆，70%是带mutation的。大约1/4是两个copy都按我设计的突变，1/2是有一个copy
按我设计的突变，另外1/4原因不明。因NPG问我们有没有兴趣把方法发表在Scientific
Data上，细节我等老板决定是不是发Scientific Data后，再考虑是不是post到这里。
祝各位同行中秋快乐！
这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作，到我说服他就好
几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验，能想到的可能
改进成功率的方式都加进去了。几个月后，终于作完了第一轮，还差点就没拿到我要的
东西。在显微镜下找得头昏眼花，没结果，给老板打个招呼正准备放弃呢，扔细胞培养
皿的那一瞬间，突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下，一个克隆就在培养皿的最边
沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。
这一年来，又是衣原体污染（实验室的host cell line本身就污染了！），又是克隆不
纯，搞得好头疼。最后稿子送出去了，作science这边的reviewer对突变子有兴趣，对
方法没兴趣，意见一堆；作方法的reviewer对突变子本身没兴趣，对方法上所有改进作
用的思路都感兴趣，但对我们没有和其它方法进行试验比较很失望，觉得作为方法的文
章发表有欠缺。。。
老板说：你也好多年没发第一作者的文章了（上次发是2008年，JBC,还好被Faculty
1000选中了），今天回家开瓶酒喝吧。
不错不错，了结了这个，就可以全心全意接一个马上毕业学生的project了。学生这个
project刚发了Nature子刊，看能不能搞个grant。近十年实验室的所有grant都有我的
影子。一个RO1的renewal全靠我筛出来的compound;一个R21在第一次申请失败后我插进
去补数据，第二轮成功；一个DOD的grant虽然是学生为主，但筛选的第二轮的方法就是
我花了几个月来为他develop的；最新的RO1 renewal也是把我上面的mutant cell
lines的数据加进去，并且根据我的方法再提出新的idea后，第三轮才拿下来的。学生
的这个project写了一个proposal,可惜没拿到钱。希望我接手后，文章也发表了，能和
过去十年一样，有奇迹发生。我还需要5-6年的饭碗，把儿子的大学学费解决呢。
我的CRISPR/HDR方法可能对大多数人没有帮助。我是利用mutant的一个特点来筛选的。
我用两个guide sequences把我的基因功能搞掉（我的细胞靠这个基因才能生长）, 先
筛transfected细胞，再用mutant的特性来筛选我要的克隆，成功率很高。挑选出来的
克隆，70%是带mutation的。大约1/4是两个copy都按我设计的突变，1/2是有一个copy
按我设计的突变，另外1/4原因不明。因NPG问我们有没有兴趣把方法发表在Scientific
Data上，细节我等老板决定是不是发Scientific Data后，再考虑是不是post到这里。
祝各位同行中秋快乐！
C*r
3 楼
最后出现没什么影响。关键是你在inspection的过程中要多问多看。
inspection
【在 s**********6 的大作中提到】
: 我们的agent很热心地希望在inspection最后出现，和inspector聊聊，看看inspection
: 的情况。
: 应该让她来吗？我总觉得她来就不够客观了吧，会影响inspector客观地给我们
: inspection report吧？
inspection
【在 s**********6 的大作中提到】
: 我们的agent很热心地希望在inspection最后出现，和inspector聊聊，看看inspection
: 的情况。
: 应该让她来吗？我总觉得她来就不够客观了吧，会影响inspector客观地给我们
: inspection report吧？
s*i
4 楼
恭喜！中秋快乐？
【在 m*********D 的大作中提到】
: 呵呵，今天收到通知，送Nature子刊的文章终于接受了。
: 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作，到我说服他就好
: 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验，能想到的可能
: 改进成功率的方式都加进去了。几个月后，终于作完了第一轮，还差点就没拿到我要的
: 东西。在显微镜下找得头昏眼花，没结果，给老板打个招呼正准备放弃呢，扔细胞培养
: 皿的那一瞬间，突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下，一个克隆就在培养皿的最边
: 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。
: 这一年来，又是衣原体污染（实验室的host cell line本身就污染了！），又是克隆不
: 纯，搞得好头疼。最后稿子送出去了，作science这边的reviewer对突变子有兴趣，对
: 方法没兴趣，意见一堆；作方法的reviewer对突变子本身没兴趣，对方法上所有改进作
【在 m*********D 的大作中提到】
: 呵呵，今天收到通知，送Nature子刊的文章终于接受了。
: 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作，到我说服他就好
: 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验，能想到的可能
: 改进成功率的方式都加进去了。几个月后，终于作完了第一轮，还差点就没拿到我要的
: 东西。在显微镜下找得头昏眼花，没结果，给老板打个招呼正准备放弃呢，扔细胞培养
: 皿的那一瞬间，突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下，一个克隆就在培养皿的最边
: 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。
: 这一年来，又是衣原体污染（实验室的host cell line本身就污染了！），又是克隆不
: 纯，搞得好头疼。最后稿子送出去了，作science这边的reviewer对突变子有兴趣，对
: 方法没兴趣，意见一堆；作方法的reviewer对突变子本身没兴趣，对方法上所有改进作
r*a
5 楼
我们的来了
你信任她就让她来，而且这个关键得看inspector
inspection
【在 s**********6 的大作中提到】
: 我们的agent很热心地希望在inspection最后出现，和inspector聊聊，看看inspection
: 的情况。
: 应该让她来吗？我总觉得她来就不够客观了吧，会影响inspector客观地给我们
: inspection report吧？
你信任她就让她来，而且这个关键得看inspector
inspection
【在 s**********6 的大作中提到】
: 我们的agent很热心地希望在inspection最后出现，和inspector聊聊，看看inspection
: 的情况。
: 应该让她来吗？我总觉得她来就不够客观了吧，会影响inspector客观地给我们
: inspection report吧？
m*a
6 楼
恭喜midwestPstD老师！中秋节快乐！
听说过支原体污染，细菌污染，真菌污染，衣原体污染还是第一次听说。
【在 m*********D 的大作中提到】
: 呵呵，今天收到通知，送Nature子刊的文章终于接受了。
: 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作，到我说服他就好
: 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验，能想到的可能
: 改进成功率的方式都加进去了。几个月后，终于作完了第一轮，还差点就没拿到我要的
: 东西。在显微镜下找得头昏眼花，没结果，给老板打个招呼正准备放弃呢，扔细胞培养
: 皿的那一瞬间，突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下，一个克隆就在培养皿的最边
: 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。
: 这一年来，又是衣原体污染（实验室的host cell line本身就污染了！），又是克隆不
: 纯，搞得好头疼。最后稿子送出去了，作science这边的reviewer对突变子有兴趣，对
: 方法没兴趣，意见一堆；作方法的reviewer对突变子本身没兴趣，对方法上所有改进作
听说过支原体污染，细菌污染，真菌污染，衣原体污染还是第一次听说。
【在 m*********D 的大作中提到】
: 呵呵，今天收到通知，送Nature子刊的文章终于接受了。
: 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作，到我说服他就好
: 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验，能想到的可能
: 改进成功率的方式都加进去了。几个月后，终于作完了第一轮，还差点就没拿到我要的
: 东西。在显微镜下找得头昏眼花，没结果，给老板打个招呼正准备放弃呢，扔细胞培养
: 皿的那一瞬间，突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下，一个克隆就在培养皿的最边
: 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。
: 这一年来，又是衣原体污染（实验室的host cell line本身就污染了！），又是克隆不
: 纯，搞得好头疼。最后稿子送出去了，作science这边的reviewer对突变子有兴趣，对
: 方法没兴趣，意见一堆；作方法的reviewer对突变子本身没兴趣，对方法上所有改进作
n*9
7 楼
你的agent不来谁给你开门？listing agent?!
inspection
【在 s**********6 的大作中提到】
: 我们的agent很热心地希望在inspection最后出现，和inspector聊聊，看看inspection
: 的情况。
: 应该让她来吗？我总觉得她来就不够客观了吧，会影响inspector客观地给我们
: inspection report吧？
inspection
【在 s**********6 的大作中提到】
: 我们的agent很热心地希望在inspection最后出现，和inspector聊聊，看看inspection
: 的情况。
: 应该让她来吗？我总觉得她来就不够客观了吧，会影响inspector客观地给我们
: inspection report吧？
m*D
8 楼
谢谢！
【在 s*****i 的大作中提到】
: 恭喜！中秋快乐？
【在 s*****i 的大作中提到】
: 恭喜！中秋快乐？
m*D
9 楼
哈哈，你可能是对的。我也不记得中文了-mycoplasma，就是支原体吧。：（。
多谢！
【在 m****a 的大作中提到】
: 恭喜midwestPstD老师！中秋节快乐！
: 听说过支原体污染，细菌污染，真菌污染，衣原体污染还是第一次听说。
多谢！
【在 m****a 的大作中提到】
: 恭喜midwestPstD老师！中秋节快乐！
: 听说过支原体污染，细菌污染，真菌污染，衣原体污染还是第一次听说。
G*G
10 楼
congrats.
【在 m*********D 的大作中提到】
: 呵呵，今天收到通知，送Nature子刊的文章终于接受了。
: 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作，到我说服他就好
: 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验，能想到的可能
: 改进成功率的方式都加进去了。几个月后，终于作完了第一轮，还差点就没拿到我要的
: 东西。在显微镜下找得头昏眼花，没结果，给老板打个招呼正准备放弃呢，扔细胞培养
: 皿的那一瞬间，突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下，一个克隆就在培养皿的最边
: 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。
: 这一年来，又是衣原体污染（实验室的host cell line本身就污染了！），又是克隆不
: 纯，搞得好头疼。最后稿子送出去了，作science这边的reviewer对突变子有兴趣，对
: 方法没兴趣，意见一堆；作方法的reviewer对突变子本身没兴趣，对方法上所有改进作
【在 m*********D 的大作中提到】
: 呵呵，今天收到通知，送Nature子刊的文章终于接受了。
: 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作，到我说服他就好
: 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验，能想到的可能
: 改进成功率的方式都加进去了。几个月后，终于作完了第一轮，还差点就没拿到我要的
: 东西。在显微镜下找得头昏眼花，没结果，给老板打个招呼正准备放弃呢，扔细胞培养
: 皿的那一瞬间，突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下，一个克隆就在培养皿的最边
: 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。
: 这一年来，又是衣原体污染（实验室的host cell line本身就污染了！），又是克隆不
: 纯，搞得好头疼。最后稿子送出去了，作science这边的reviewer对突变子有兴趣，对
: 方法没兴趣，意见一堆；作方法的reviewer对突变子本身没兴趣，对方法上所有改进作
d*m
11 楼
congrats.
c*6
12 楼
恭喜恭喜啊 什么时候在线呢 一定要拜读一下
s*y
13 楼
恭喜恭喜，发paper绝对值得庆贺
F*6
14 楼
恭喜恭喜，的确是绝好的中秋节礼物
btw,每每读到 midwestPstD的帖子，都能感受到强烈的科研热情
我们系里曾经也有一位年长的postdoc（45左右？），也是每天十分有激情的做科研
同为postdoc，也在中西部（I am in texas），很难理解在渺茫的postdoc路上中哪里
来的这些正能量，但自己的状态的确达不到这样，也常常把实验室和学校的压力带回家
，真是自愧不如啊。。。
Anyway, supercongrats！
btw,每每读到 midwestPstD的帖子，都能感受到强烈的科研热情
我们系里曾经也有一位年长的postdoc（45左右？），也是每天十分有激情的做科研
同为postdoc，也在中西部（I am in texas），很难理解在渺茫的postdoc路上中哪里
来的这些正能量，但自己的状态的确达不到这样，也常常把实验室和学校的压力带回家
，真是自愧不如啊。。。
Anyway, supercongrats！
m*r
15 楼
恭喜！
S*e
16 楼
你这完全是走钢丝似的成功，假如没有compound，假如grant得不到，你可能就失业了
。其实认真做科学就是你这种情况，出好结果全凭运气。那种做课题成功效率极其高的
往往都是造假。只是这个社会对科学家太不公平了，没有任何保障。你可以写小说了。
hcy除了和本科生谈心，玩古琴，能有这些体会吗？
【在 m*********D 的大作中提到】
: 呵呵，今天收到通知，送Nature子刊的文章终于接受了。
: 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作，到我说服他就好
: 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验，能想到的可能
: 改进成功率的方式都加进去了。几个月后，终于作完了第一轮，还差点就没拿到我要的
: 东西。在显微镜下找得头昏眼花，没结果，给老板打个招呼正准备放弃呢，扔细胞培养
: 皿的那一瞬间，突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下，一个克隆就在培养皿的最边
: 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。
: 这一年来，又是衣原体污染（实验室的host cell line本身就污染了！），又是克隆不
: 纯，搞得好头疼。最后稿子送出去了，作science这边的reviewer对突变子有兴趣，对
: 方法没兴趣，意见一堆；作方法的reviewer对突变子本身没兴趣，对方法上所有改进作
。其实认真做科学就是你这种情况，出好结果全凭运气。那种做课题成功效率极其高的
往往都是造假。只是这个社会对科学家太不公平了，没有任何保障。你可以写小说了。
hcy除了和本科生谈心，玩古琴，能有这些体会吗？
【在 m*********D 的大作中提到】
: 呵呵，今天收到通知，送Nature子刊的文章终于接受了。
: 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作，到我说服他就好
: 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验，能想到的可能
: 改进成功率的方式都加进去了。几个月后，终于作完了第一轮，还差点就没拿到我要的
: 东西。在显微镜下找得头昏眼花，没结果，给老板打个招呼正准备放弃呢，扔细胞培养
: 皿的那一瞬间，突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下，一个克隆就在培养皿的最边
: 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。
: 这一年来，又是衣原体污染（实验室的host cell line本身就污染了！），又是克隆不
: 纯，搞得好头疼。最后稿子送出去了，作science这边的reviewer对突变子有兴趣，对
: 方法没兴趣，意见一堆；作方法的reviewer对突变子本身没兴趣，对方法上所有改进作
c*n
17 楼
赞！
【在 m*********D 的大作中提到】
: 呵呵，今天收到通知，送Nature子刊的文章终于接受了。
: 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作，到我说服他就好
: 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验，能想到的可能
: 改进成功率的方式都加进去了。几个月后，终于作完了第一轮，还差点就没拿到我要的
: 东西。在显微镜下找得头昏眼花，没结果，给老板打个招呼正准备放弃呢，扔细胞培养
: 皿的那一瞬间，突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下，一个克隆就在培养皿的最边
: 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。
: 这一年来，又是衣原体污染（实验室的host cell line本身就污染了！），又是克隆不
: 纯，搞得好头疼。最后稿子送出去了，作science这边的reviewer对突变子有兴趣，对
: 方法没兴趣，意见一堆；作方法的reviewer对突变子本身没兴趣，对方法上所有改进作
【在 m*********D 的大作中提到】
: 呵呵，今天收到通知，送Nature子刊的文章终于接受了。
: 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作，到我说服他就好
: 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验，能想到的可能
: 改进成功率的方式都加进去了。几个月后，终于作完了第一轮，还差点就没拿到我要的
: 东西。在显微镜下找得头昏眼花，没结果，给老板打个招呼正准备放弃呢，扔细胞培养
: 皿的那一瞬间，突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下，一个克隆就在培养皿的最边
: 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。
: 这一年来，又是衣原体污染（实验室的host cell line本身就污染了！），又是克隆不
: 纯，搞得好头疼。最后稿子送出去了，作science这边的reviewer对突变子有兴趣，对
: 方法没兴趣，意见一堆；作方法的reviewer对突变子本身没兴趣，对方法上所有改进作
e*s
18 楼
难得有如此之热情，蝼蚁撼树 一定要有信心
【在 m*********D 的大作中提到】
: 呵呵，今天收到通知，送Nature子刊的文章终于接受了。
: 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作，到我说服他就好
: 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验，能想到的可能
: 改进成功率的方式都加进去了。几个月后，终于作完了第一轮，还差点就没拿到我要的
: 东西。在显微镜下找得头昏眼花，没结果，给老板打个招呼正准备放弃呢，扔细胞培养
: 皿的那一瞬间，突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下，一个克隆就在培养皿的最边
: 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。
: 这一年来，又是衣原体污染（实验室的host cell line本身就污染了！），又是克隆不
: 纯，搞得好头疼。最后稿子送出去了，作science这边的reviewer对突变子有兴趣，对
: 方法没兴趣，意见一堆；作方法的reviewer对突变子本身没兴趣，对方法上所有改进作
【在 m*********D 的大作中提到】
: 呵呵，今天收到通知，送Nature子刊的文章终于接受了。
: 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作，到我说服他就好
: 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验，能想到的可能
: 改进成功率的方式都加进去了。几个月后，终于作完了第一轮，还差点就没拿到我要的
: 东西。在显微镜下找得头昏眼花，没结果，给老板打个招呼正准备放弃呢，扔细胞培养
: 皿的那一瞬间，突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下，一个克隆就在培养皿的最边
: 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。
: 这一年来，又是衣原体污染（实验室的host cell line本身就污染了！），又是克隆不
: 纯，搞得好头疼。最后稿子送出去了，作science这边的reviewer对突变子有兴趣，对
: 方法没兴趣，意见一堆；作方法的reviewer对突变子本身没兴趣，对方法上所有改进作
t*k
19 楼
恭喜恭喜，赶快让我沾点喜气
l*7
20 楼
真心祝福楼主，这是楼主对科研多年的积累的结果。一般来讲，新的薄厚还真心没有到
这个层次。实验室招薄厚，十分之一人的能到楼主这个层次就算是实验室烧高香了。
这个层次。实验室招薄厚，十分之一人的能到楼主这个层次就算是实验室烧高香了。
b*s
21 楼
恭喜，正能量
【在 m*********D 的大作中提到】
: 呵呵，今天收到通知，送Nature子刊的文章终于接受了。
: 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作，到我说服他就好
: 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验，能想到的可能
: 改进成功率的方式都加进去了。几个月后，终于作完了第一轮，还差点就没拿到我要的
: 东西。在显微镜下找得头昏眼花，没结果，给老板打个招呼正准备放弃呢，扔细胞培养
: 皿的那一瞬间，突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下，一个克隆就在培养皿的最边
: 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。
: 这一年来，又是衣原体污染（实验室的host cell line本身就污染了！），又是克隆不
: 纯，搞得好头疼。最后稿子送出去了，作science这边的reviewer对突变子有兴趣，对
: 方法没兴趣，意见一堆；作方法的reviewer对突变子本身没兴趣，对方法上所有改进作
【在 m*********D 的大作中提到】
: 呵呵，今天收到通知，送Nature子刊的文章终于接受了。
: 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作，到我说服他就好
: 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验，能想到的可能
: 改进成功率的方式都加进去了。几个月后，终于作完了第一轮，还差点就没拿到我要的
: 东西。在显微镜下找得头昏眼花，没结果，给老板打个招呼正准备放弃呢，扔细胞培养
: 皿的那一瞬间，突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下，一个克隆就在培养皿的最边
: 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。
: 这一年来，又是衣原体污染（实验室的host cell line本身就污染了！），又是克隆不
: 纯，搞得好头疼。最后稿子送出去了，作science这边的reviewer对突变子有兴趣，对
: 方法没兴趣，意见一堆；作方法的reviewer对突变子本身没兴趣，对方法上所有改进作
O*e
22 楼
恭喜，恭喜！
【在 m*********D 的大作中提到】
: 呵呵，今天收到通知，送Nature子刊的文章终于接受了。
: 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作，到我说服他就好
: 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验，能想到的可能
: 改进成功率的方式都加进去了。几个月后，终于作完了第一轮，还差点就没拿到我要的
: 东西。在显微镜下找得头昏眼花，没结果，给老板打个招呼正准备放弃呢，扔细胞培养
: 皿的那一瞬间，突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下，一个克隆就在培养皿的最边
: 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。
: 这一年来，又是衣原体污染（实验室的host cell line本身就污染了！），又是克隆不
: 纯，搞得好头疼。最后稿子送出去了，作science这边的reviewer对突变子有兴趣，对
: 方法没兴趣，意见一堆；作方法的reviewer对突变子本身没兴趣，对方法上所有改进作
【在 m*********D 的大作中提到】
: 呵呵，今天收到通知，送Nature子刊的文章终于接受了。
: 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作，到我说服他就好
: 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验，能想到的可能
: 改进成功率的方式都加进去了。几个月后，终于作完了第一轮，还差点就没拿到我要的
: 东西。在显微镜下找得头昏眼花，没结果，给老板打个招呼正准备放弃呢，扔细胞培养
: 皿的那一瞬间，突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下，一个克隆就在培养皿的最边
: 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。
: 这一年来，又是衣原体污染（实验室的host cell line本身就污染了！），又是克隆不
: 纯，搞得好头疼。最后稿子送出去了，作science这边的reviewer对突变子有兴趣，对
: 方法没兴趣，意见一堆；作方法的reviewer对突变子本身没兴趣，对方法上所有改进作
b*1
23 楼
恭喜恭喜，都是你努力的回报啊，这下放心啦，也可以抽空多钓鱼了：）
【在 m*********D 的大作中提到】
: 呵呵，今天收到通知，送Nature子刊的文章终于接受了。
: 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作，到我说服他就好
: 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验，能想到的可能
: 改进成功率的方式都加进去了。几个月后，终于作完了第一轮，还差点就没拿到我要的
: 东西。在显微镜下找得头昏眼花，没结果，给老板打个招呼正准备放弃呢，扔细胞培养
: 皿的那一瞬间，突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下，一个克隆就在培养皿的最边
: 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。
: 这一年来，又是衣原体污染（实验室的host cell line本身就污染了！），又是克隆不
: 纯，搞得好头疼。最后稿子送出去了，作science这边的reviewer对突变子有兴趣，对
: 方法没兴趣，意见一堆；作方法的reviewer对突变子本身没兴趣，对方法上所有改进作
【在 m*********D 的大作中提到】
: 呵呵，今天收到通知，送Nature子刊的文章终于接受了。
: 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作，到我说服他就好
: 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验，能想到的可能
: 改进成功率的方式都加进去了。几个月后，终于作完了第一轮，还差点就没拿到我要的
: 东西。在显微镜下找得头昏眼花，没结果，给老板打个招呼正准备放弃呢，扔细胞培养
: 皿的那一瞬间，突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下，一个克隆就在培养皿的最边
: 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。
: 这一年来，又是衣原体污染（实验室的host cell line本身就污染了！），又是克隆不
: 纯，搞得好头疼。最后稿子送出去了，作science这边的reviewer对突变子有兴趣，对
: 方法没兴趣，意见一堆；作方法的reviewer对突变子本身没兴趣，对方法上所有改进作
x*5
24 楼
congrats!
【在 m*********D 的大作中提到】
: 呵呵，今天收到通知，送Nature子刊的文章终于接受了。
: 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作，到我说服他就好
: 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验，能想到的可能
: 改进成功率的方式都加进去了。几个月后，终于作完了第一轮，还差点就没拿到我要的
: 东西。在显微镜下找得头昏眼花，没结果，给老板打个招呼正准备放弃呢，扔细胞培养
: 皿的那一瞬间，突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下，一个克隆就在培养皿的最边
: 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。
: 这一年来，又是衣原体污染（实验室的host cell line本身就污染了！），又是克隆不
: 纯，搞得好头疼。最后稿子送出去了，作science这边的reviewer对突变子有兴趣，对
: 方法没兴趣，意见一堆；作方法的reviewer对突变子本身没兴趣，对方法上所有改进作
【在 m*********D 的大作中提到】
: 呵呵，今天收到通知，送Nature子刊的文章终于接受了。
: 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作，到我说服他就好
: 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验，能想到的可能
: 改进成功率的方式都加进去了。几个月后，终于作完了第一轮，还差点就没拿到我要的
: 东西。在显微镜下找得头昏眼花，没结果，给老板打个招呼正准备放弃呢，扔细胞培养
: 皿的那一瞬间，突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下，一个克隆就在培养皿的最边
: 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。
: 这一年来，又是衣原体污染（实验室的host cell line本身就污染了！），又是克隆不
: 纯，搞得好头疼。最后稿子送出去了，作science这边的reviewer对突变子有兴趣，对
: 方法没兴趣，意见一堆；作方法的reviewer对突变子本身没兴趣，对方法上所有改进作
t*t
25 楼
恭喜！ 沾点喜气！ 祝中秋快乐！
n*7
26 楼
恭喜
你心态真是好
做科研还是要沉得住气
你心态真是好
做科研还是要沉得住气
m*D
27 楼
多谢上面各位同行！这大家心想事成！
回Shangxuanyue：你说的都市大路货，每人不知道。我自己还经历过老板没钱自谋出路
呢。你看懂了我这句的潜台词：“你也好多年没发第一作者的文章了（上次发是2008年
，JBC,还好被Faculty 1000选中了）。。。”
回Fan2016：年青的时候担忧多一些是肯定的。但随着时间的推移，生活的稳定，担忧
就会少很多。不管你改不改行，personal finance一定要放在最重要的位置。而
personal finance的改善，是需要时间和计划的。
回laodao2007：我可能对自己的个性能力比较了解，所以，选择的时候就不会好高骛远
，而是脚踏实地。
回benxiong811：差不到秋钓的季节了。我菜园子也打理得差不多了，就房子周围需要
买点top soil垫高一点，解决房子周边的积水问题，然后就可以钓两个月了。春天的鱼
还有几十斤呢。秋天的鱼经过一个夏天的饱食，比较肥美，争取搞几十斤过冬。：）。
回nowhere7：要心平气和，还是要从钱上入手。没有我十几年的计划把退休生活安排好
，我估计我今天也不会这么从容。
回Shangxuanyue：你说的都市大路货，每人不知道。我自己还经历过老板没钱自谋出路
呢。你看懂了我这句的潜台词：“你也好多年没发第一作者的文章了（上次发是2008年
，JBC,还好被Faculty 1000选中了）。。。”
回Fan2016：年青的时候担忧多一些是肯定的。但随着时间的推移，生活的稳定，担忧
就会少很多。不管你改不改行，personal finance一定要放在最重要的位置。而
personal finance的改善，是需要时间和计划的。
回laodao2007：我可能对自己的个性能力比较了解，所以，选择的时候就不会好高骛远
，而是脚踏实地。
回benxiong811：差不到秋钓的季节了。我菜园子也打理得差不多了，就房子周围需要
买点top soil垫高一点，解决房子周边的积水问题，然后就可以钓两个月了。春天的鱼
还有几十斤呢。秋天的鱼经过一个夏天的饱食，比较肥美，争取搞几十斤过冬。：）。
回nowhere7：要心平气和，还是要从钱上入手。没有我十几年的计划把退休生活安排好
，我估计我今天也不会这么从容。
d*i
28 楼
恭喜楼主！佩服佩服！
m*g
29 楼
恭喜，恭喜。
c*4
30 楼
这个才是科研精神！要是社会对这样的人再多点扶持就好了。
F*Q
31 楼
恭喜楼主！还能保持那份天真和激情，真不简单。
w*c
32 楼
big cong
a*p
33 楼
Congrats!
【在 m*********D 的大作中提到】
: 呵呵，今天收到通知，送Nature子刊的文章终于接受了。
: 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作，到我说服他就好
: 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验，能想到的可能
: 改进成功率的方式都加进去了。几个月后，终于作完了第一轮，还差点就没拿到我要的
: 东西。在显微镜下找得头昏眼花，没结果，给老板打个招呼正准备放弃呢，扔细胞培养
: 皿的那一瞬间，突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下，一个克隆就在培养皿的最边
: 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。
: 这一年来，又是衣原体污染（实验室的host cell line本身就污染了！），又是克隆不
: 纯，搞得好头疼。最后稿子送出去了，作science这边的reviewer对突变子有兴趣，对
: 方法没兴趣，意见一堆；作方法的reviewer对突变子本身没兴趣，对方法上所有改进作
【在 m*********D 的大作中提到】
: 呵呵，今天收到通知，送Nature子刊的文章终于接受了。
: 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作，到我说服他就好
: 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验，能想到的可能
: 改进成功率的方式都加进去了。几个月后，终于作完了第一轮，还差点就没拿到我要的
: 东西。在显微镜下找得头昏眼花，没结果，给老板打个招呼正准备放弃呢，扔细胞培养
: 皿的那一瞬间，突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下，一个克隆就在培养皿的最边
: 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。
: 这一年来，又是衣原体污染（实验室的host cell line本身就污染了！），又是克隆不
: 纯，搞得好头疼。最后稿子送出去了，作science这边的reviewer对突变子有兴趣，对
: 方法没兴趣，意见一堆；作方法的reviewer对突变子本身没兴趣，对方法上所有改进作
F*Q
34 楼
好奇一下，楼主的技术那么牛，为什么没在早年的时候找个牛老板整一两篇CNS然后独
立呢？
立呢？
m*D
35 楼
多谢上面几位。大家中秋快乐！
回FAQ--生物bench就是熟能生巧，没什么牛或者不牛的。我作这个，很多经验是当年作
knock-out老鼠的时候积累的。我作knock-out老鼠的那几年，和老板相处很不愉快，但
确实学了很多bench上的东西。老板是new faculty,我从来没作过tissue culture。所
以，老板除了手把手教我（我是实验室里唯一能干点事的），我们一起从空房间到建立
一个完整的实验室，你想我经历有多少？我比老板还先到位三个月，也就是我一个人干
了三个月之后，老板才来上班。。。除了practice,我还要读protocol,不仅要会作，还
要懂为啥这么作。
作老板有作老板的要求。我写就远远不如我现在的老板。每个人找对自己的位置就好。
基础知识也没有老板扎实。一个实验室的远景往往也不是技术先进就能左右的。
【在 F*Q 的大作中提到】
: 好奇一下，楼主的技术那么牛，为什么没在早年的时候找个牛老板整一两篇CNS然后独
: 立呢？
回FAQ--生物bench就是熟能生巧，没什么牛或者不牛的。我作这个，很多经验是当年作
knock-out老鼠的时候积累的。我作knock-out老鼠的那几年，和老板相处很不愉快，但
确实学了很多bench上的东西。老板是new faculty,我从来没作过tissue culture。所
以，老板除了手把手教我（我是实验室里唯一能干点事的），我们一起从空房间到建立
一个完整的实验室，你想我经历有多少？我比老板还先到位三个月，也就是我一个人干
了三个月之后，老板才来上班。。。除了practice,我还要读protocol,不仅要会作，还
要懂为啥这么作。
作老板有作老板的要求。我写就远远不如我现在的老板。每个人找对自己的位置就好。
基础知识也没有老板扎实。一个实验室的远景往往也不是技术先进就能左右的。
【在 F*Q 的大作中提到】
: 好奇一下，楼主的技术那么牛，为什么没在早年的时候找个牛老板整一两篇CNS然后独
: 立呢？
F*Q
36 楼
明白。做独立研究光技术是不够，不过大部分独立研究的也就是跟风，技术好跟得快。
曾经剽窃我的那位也算是技术牛人了，见了我的数据后甚至没问我细节就很快用自己的
技术重复出来了，然后发了PNAS。 LOL
: 多谢上面几位。大家中秋快乐！
: 回FAQ--生物bench就是熟能生巧，没什么牛或者不牛的。我作这个，很多
经验是
当年作
: knock-out老鼠的时候积累的。我作knock-out老鼠的那几年，和老板相处
很不愉
快，但
: 确实学了很多bench上的东西。老板是new faculty,我从来没作过tissue
culture。所
: 以，老板除了手把手教我（我是实验室里唯一能干点事的），我们一起从
空房间
到建立
: 一个完整的实验室，你想我经历有多少？我比老板还先到位三个月，也就
是我一
个人干
: 了三个月之后，老板才来上班。。。除了practice,我还要读protocol,不
仅要会
作，还
: 要懂为啥这么作。
: 作老板有作老板的要求。我写就远远不如我现在的老板。每个人找对自己
的位置
就好。
: 基础知识也没有老板扎实。一个实验室的远景往往也不是技术先进就能左
右的。
【在 m*********D 的大作中提到】
: 多谢上面几位。大家中秋快乐！
: 回FAQ--生物bench就是熟能生巧，没什么牛或者不牛的。我作这个，很多经验是当年作
: knock-out老鼠的时候积累的。我作knock-out老鼠的那几年，和老板相处很不愉快，但
: 确实学了很多bench上的东西。老板是new faculty,我从来没作过tissue culture。所
: 以，老板除了手把手教我（我是实验室里唯一能干点事的），我们一起从空房间到建立
: 一个完整的实验室，你想我经历有多少？我比老板还先到位三个月，也就是我一个人干
: 了三个月之后，老板才来上班。。。除了practice,我还要读protocol,不仅要会作，还
: 要懂为啥这么作。
: 作老板有作老板的要求。我写就远远不如我现在的老板。每个人找对自己的位置就好。
: 基础知识也没有老板扎实。一个实验室的远景往往也不是技术先进就能左右的。
曾经剽窃我的那位也算是技术牛人了，见了我的数据后甚至没问我细节就很快用自己的
技术重复出来了，然后发了PNAS。 LOL
: 多谢上面几位。大家中秋快乐！
: 回FAQ--生物bench就是熟能生巧，没什么牛或者不牛的。我作这个，很多
经验是
当年作
: knock-out老鼠的时候积累的。我作knock-out老鼠的那几年，和老板相处
很不愉
快，但
: 确实学了很多bench上的东西。老板是new faculty,我从来没作过tissue
culture。所
: 以，老板除了手把手教我（我是实验室里唯一能干点事的），我们一起从
空房间
到建立
: 一个完整的实验室，你想我经历有多少？我比老板还先到位三个月，也就
是我一
个人干
: 了三个月之后，老板才来上班。。。除了practice,我还要读protocol,不
仅要会
作，还
: 要懂为啥这么作。
: 作老板有作老板的要求。我写就远远不如我现在的老板。每个人找对自己
的位置
就好。
: 基础知识也没有老板扎实。一个实验室的远景往往也不是技术先进就能左
右的。
【在 m*********D 的大作中提到】
: 多谢上面几位。大家中秋快乐！
: 回FAQ--生物bench就是熟能生巧，没什么牛或者不牛的。我作这个，很多经验是当年作
: knock-out老鼠的时候积累的。我作knock-out老鼠的那几年，和老板相处很不愉快，但
: 确实学了很多bench上的东西。老板是new faculty,我从来没作过tissue culture。所
: 以，老板除了手把手教我（我是实验室里唯一能干点事的），我们一起从空房间到建立
: 一个完整的实验室，你想我经历有多少？我比老板还先到位三个月，也就是我一个人干
: 了三个月之后，老板才来上班。。。除了practice,我还要读protocol,不仅要会作，还
: 要懂为啥这么作。
: 作老板有作老板的要求。我写就远远不如我现在的老板。每个人找对自己的位置就好。
: 基础知识也没有老板扎实。一个实验室的远景往往也不是技术先进就能左右的。
a*8
37 楼
你老板有太幸福了！lz你对生活工作的热情太棒了。人是不是幸福心态很重要，lz生活
上的修养一级棒。
【在 m*********D 的大作中提到】
: 呵呵，今天收到通知，送Nature子刊的文章终于接受了。
: 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作，到我说服他就好
: 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验，能想到的可能
: 改进成功率的方式都加进去了。几个月后，终于作完了第一轮，还差点就没拿到我要的
: 东西。在显微镜下找得头昏眼花，没结果，给老板打个招呼正准备放弃呢，扔细胞培养
: 皿的那一瞬间，突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下，一个克隆就在培养皿的最边
: 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。
: 这一年来，又是衣原体污染（实验室的host cell line本身就污染了！），又是克隆不
: 纯，搞得好头疼。最后稿子送出去了，作science这边的reviewer对突变子有兴趣，对
: 方法没兴趣，意见一堆；作方法的reviewer对突变子本身没兴趣，对方法上所有改进作
上的修养一级棒。
【在 m*********D 的大作中提到】
: 呵呵，今天收到通知，送Nature子刊的文章终于接受了。
: 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作，到我说服他就好
: 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验，能想到的可能
: 改进成功率的方式都加进去了。几个月后，终于作完了第一轮，还差点就没拿到我要的
: 东西。在显微镜下找得头昏眼花，没结果，给老板打个招呼正准备放弃呢，扔细胞培养
: 皿的那一瞬间，突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下，一个克隆就在培养皿的最边
: 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。
: 这一年来，又是衣原体污染（实验室的host cell line本身就污染了！），又是克隆不
: 纯，搞得好头疼。最后稿子送出去了，作science这边的reviewer对突变子有兴趣，对
: 方法没兴趣，意见一堆；作方法的reviewer对突变子本身没兴趣，对方法上所有改进作
M*I
38 楼
恭喜恭喜
【在 m*********D 的大作中提到】
: 呵呵，今天收到通知，送Nature子刊的文章终于接受了。
: 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作，到我说服他就好
: 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验，能想到的可能
: 改进成功率的方式都加进去了。几个月后，终于作完了第一轮，还差点就没拿到我要的
: 东西。在显微镜下找得头昏眼花，没结果，给老板打个招呼正准备放弃呢，扔细胞培养
: 皿的那一瞬间，突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下，一个克隆就在培养皿的最边
: 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。
: 这一年来，又是衣原体污染（实验室的host cell line本身就污染了！），又是克隆不
: 纯，搞得好头疼。最后稿子送出去了，作science这边的reviewer对突变子有兴趣，对
: 方法没兴趣，意见一堆；作方法的reviewer对突变子本身没兴趣，对方法上所有改进作
【在 m*********D 的大作中提到】
: 呵呵，今天收到通知，送Nature子刊的文章终于接受了。
: 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作，到我说服他就好
: 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验，能想到的可能
: 改进成功率的方式都加进去了。几个月后，终于作完了第一轮，还差点就没拿到我要的
: 东西。在显微镜下找得头昏眼花，没结果，给老板打个招呼正准备放弃呢，扔细胞培养
: 皿的那一瞬间，突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下，一个克隆就在培养皿的最边
: 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。
: 这一年来，又是衣原体污染（实验室的host cell line本身就污染了！），又是克隆不
: 纯，搞得好头疼。最后稿子送出去了，作science这边的reviewer对突变子有兴趣，对
: 方法没兴趣，意见一堆；作方法的reviewer对突变子本身没兴趣，对方法上所有改进作
c*r
39 楼
恭喜恭喜！
j*0
40 楼
恭喜! 喜欢看你写的帖子，平淡而扎实的态度。
【在 m*********D 的大作中提到】
: 呵呵，今天收到通知，送Nature子刊的文章终于接受了。
: 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作，到我说服他就好
: 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验，能想到的可能
: 改进成功率的方式都加进去了。几个月后，终于作完了第一轮，还差点就没拿到我要的
: 东西。在显微镜下找得头昏眼花，没结果，给老板打个招呼正准备放弃呢，扔细胞培养
: 皿的那一瞬间，突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下，一个克隆就在培养皿的最边
: 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。
: 这一年来，又是衣原体污染（实验室的host cell line本身就污染了！），又是克隆不
: 纯，搞得好头疼。最后稿子送出去了，作science这边的reviewer对突变子有兴趣，对
: 方法没兴趣，意见一堆；作方法的reviewer对突变子本身没兴趣，对方法上所有改进作
【在 m*********D 的大作中提到】
: 呵呵，今天收到通知，送Nature子刊的文章终于接受了。
: 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作，到我说服他就好
: 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验，能想到的可能
: 改进成功率的方式都加进去了。几个月后，终于作完了第一轮，还差点就没拿到我要的
: 东西。在显微镜下找得头昏眼花，没结果，给老板打个招呼正准备放弃呢，扔细胞培养
: 皿的那一瞬间，突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下，一个克隆就在培养皿的最边
: 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。
: 这一年来，又是衣原体污染（实验室的host cell line本身就污染了！），又是克隆不
: 纯，搞得好头疼。最后稿子送出去了，作science这边的reviewer对突变子有兴趣，对
: 方法没兴趣，意见一堆；作方法的reviewer对突变子本身没兴趣，对方法上所有改进作
C*Y
41 楼
老板太抠了，不是应该他给你开一瓶酒庆祝吗？
D*a
42 楼
恭喜恭喜，中秋快乐啊！
s*y
43 楼
恭喜兄弟，能把博士后做到退休了。
不过要是早点就好了，现在拿着这个文章也换不成更多工钱也换不成tenure的职位，似
乎有点来的太晚。
【在 m*********D 的大作中提到】
: 呵呵，今天收到通知，送Nature子刊的文章终于接受了。
: 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作，到我说服他就好
: 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验，能想到的可能
: 改进成功率的方式都加进去了。几个月后，终于作完了第一轮，还差点就没拿到我要的
: 东西。在显微镜下找得头昏眼花，没结果，给老板打个招呼正准备放弃呢，扔细胞培养
: 皿的那一瞬间，突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下，一个克隆就在培养皿的最边
: 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。
: 这一年来，又是衣原体污染（实验室的host cell line本身就污染了！），又是克隆不
: 纯，搞得好头疼。最后稿子送出去了，作science这边的reviewer对突变子有兴趣，对
: 方法没兴趣，意见一堆；作方法的reviewer对突变子本身没兴趣，对方法上所有改进作
不过要是早点就好了，现在拿着这个文章也换不成更多工钱也换不成tenure的职位，似
乎有点来的太晚。
【在 m*********D 的大作中提到】
: 呵呵，今天收到通知，送Nature子刊的文章终于接受了。
: 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作，到我说服他就好
: 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验，能想到的可能
: 改进成功率的方式都加进去了。几个月后，终于作完了第一轮，还差点就没拿到我要的
: 东西。在显微镜下找得头昏眼花，没结果，给老板打个招呼正准备放弃呢，扔细胞培养
: 皿的那一瞬间，突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下，一个克隆就在培养皿的最边
: 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。
: 这一年来，又是衣原体污染（实验室的host cell line本身就污染了！），又是克隆不
: 纯，搞得好头疼。最后稿子送出去了，作science这边的reviewer对突变子有兴趣，对
: 方法没兴趣，意见一堆；作方法的reviewer对突变子本身没兴趣，对方法上所有改进作
m*D
44 楼
多谢多谢上面各位！昨晚回家忙儿子的事，没喝酒。今晚可以开一瓶。太太昨晚把我春
天钓的crappie拿出来了，准备今晚清蒸和作辣椒鱼。我还有上礼拜老同学女儿送的白
葡萄酒，正好喝一杯。
回CRESTY：记住你今天的话。等你当了老板别忘了。我们的规矩是组会的时候庆祝一下
，老板给实验室买吃的。下礼拜他会的。他知道我喝咖啡，经常想起来了在他买茶叶的
时候就给我买点bean回来。我自己有grinder，随时可以煮。小气他还真不是。
回snowyday:这么一篇距拿教授位置早着呢，就是20年前也没戏。从没这么指望过。能
保证五年的工作，我就满足了。所以，还得搞个grant才行。说实话，到我这个年龄，
如何少操心又有工作才是最实惠的。你转行后新工作顺利？祝平安！
天钓的crappie拿出来了，准备今晚清蒸和作辣椒鱼。我还有上礼拜老同学女儿送的白
葡萄酒，正好喝一杯。
回CRESTY：记住你今天的话。等你当了老板别忘了。我们的规矩是组会的时候庆祝一下
，老板给实验室买吃的。下礼拜他会的。他知道我喝咖啡，经常想起来了在他买茶叶的
时候就给我买点bean回来。我自己有grinder，随时可以煮。小气他还真不是。
回snowyday:这么一篇距拿教授位置早着呢，就是20年前也没戏。从没这么指望过。能
保证五年的工作，我就满足了。所以，还得搞个grant才行。说实话，到我这个年龄，
如何少操心又有工作才是最实惠的。你转行后新工作顺利？祝平安！
s*y
45 楼
你要求真低，看得开，反正孩子也上大学了，无所谓了，估计很多千老就没那么容易了
。我还行，拿了几个面试，先试试水。博士后是不做了，不过工钱还领俩月。
【在 m*********D 的大作中提到】
: 多谢多谢上面各位！昨晚回家忙儿子的事，没喝酒。今晚可以开一瓶。太太昨晚把我春
: 天钓的crappie拿出来了，准备今晚清蒸和作辣椒鱼。我还有上礼拜老同学女儿送的白
: 葡萄酒，正好喝一杯。
: 回CRESTY：记住你今天的话。等你当了老板别忘了。我们的规矩是组会的时候庆祝一下
: ，老板给实验室买吃的。下礼拜他会的。他知道我喝咖啡，经常想起来了在他买茶叶的
: 时候就给我买点bean回来。我自己有grinder，随时可以煮。小气他还真不是。
: 回snowyday:这么一篇距拿教授位置早着呢，就是20年前也没戏。从没这么指望过。能
: 保证五年的工作，我就满足了。所以，还得搞个grant才行。说实话，到我这个年龄，
: 如何少操心又有工作才是最实惠的。你转行后新工作顺利？祝平安！
。我还行，拿了几个面试，先试试水。博士后是不做了，不过工钱还领俩月。
【在 m*********D 的大作中提到】
: 多谢多谢上面各位！昨晚回家忙儿子的事，没喝酒。今晚可以开一瓶。太太昨晚把我春
: 天钓的crappie拿出来了，准备今晚清蒸和作辣椒鱼。我还有上礼拜老同学女儿送的白
: 葡萄酒，正好喝一杯。
: 回CRESTY：记住你今天的话。等你当了老板别忘了。我们的规矩是组会的时候庆祝一下
: ，老板给实验室买吃的。下礼拜他会的。他知道我喝咖啡，经常想起来了在他买茶叶的
: 时候就给我买点bean回来。我自己有grinder，随时可以煮。小气他还真不是。
: 回snowyday:这么一篇距拿教授位置早着呢，就是20年前也没戏。从没这么指望过。能
: 保证五年的工作，我就满足了。所以，还得搞个grant才行。说实话，到我这个年龄，
: 如何少操心又有工作才是最实惠的。你转行后新工作顺利？祝平安！
v*e
46 楼
赶快登陆上来恭喜一下！
i*0
47 楼
恭喜！坐等大作！
O*e
48 楼
其实这行，如果博士后1/3可以独立当PI，1/3转title接着干，1/3转行，那就差不多
正常了。
【在 s******y 的大作中提到】
: 你要求真低，看得开，反正孩子也上大学了，无所谓了，估计很多千老就没那么容易了
: 。我还行，拿了几个面试，先试试水。博士后是不做了，不过工钱还领俩月。
正常了。
【在 s******y 的大作中提到】
: 你要求真低，看得开，反正孩子也上大学了，无所谓了，估计很多千老就没那么容易了
: 。我还行，拿了几个面试，先试试水。博士后是不做了，不过工钱还领俩月。
t*g
49 楼
恭喜恭喜。
r*n
50 楼
congrats
【在 m*********D 的大作中提到】
: 呵呵，今天收到通知，送Nature子刊的文章终于接受了。
: 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作，到我说服他就好
: 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验，能想到的可能
: 改进成功率的方式都加进去了。几个月后，终于作完了第一轮，还差点就没拿到我要的
: 东西。在显微镜下找得头昏眼花，没结果，给老板打个招呼正准备放弃呢，扔细胞培养
: 皿的那一瞬间，突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下，一个克隆就在培养皿的最边
: 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。
: 这一年来，又是衣原体污染（实验室的host cell line本身就污染了！），又是克隆不
: 纯，搞得好头疼。最后稿子送出去了，作science这边的reviewer对突变子有兴趣，对
: 方法没兴趣，意见一堆；作方法的reviewer对突变子本身没兴趣，对方法上所有改进作
【在 m*********D 的大作中提到】
: 呵呵，今天收到通知，送Nature子刊的文章终于接受了。
: 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作，到我说服他就好
: 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验，能想到的可能
: 改进成功率的方式都加进去了。几个月后，终于作完了第一轮，还差点就没拿到我要的
: 东西。在显微镜下找得头昏眼花，没结果，给老板打个招呼正准备放弃呢，扔细胞培养
: 皿的那一瞬间，突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下，一个克隆就在培养皿的最边
: 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。
: 这一年来，又是衣原体污染（实验室的host cell line本身就污染了！），又是克隆不
: 纯，搞得好头疼。最后稿子送出去了，作science这边的reviewer对突变子有兴趣，对
: 方法没兴趣，意见一堆；作方法的reviewer对突变子本身没兴趣，对方法上所有改进作
s*1
51 楼
每次看见你的帖子内容，都很畅心，congratulations!
【在 m*********D 的大作中提到】
: 呵呵，今天收到通知，送Nature子刊的文章终于接受了。
: 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作，到我说服他就好
: 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验，能想到的可能
: 改进成功率的方式都加进去了。几个月后，终于作完了第一轮，还差点就没拿到我要的
: 东西。在显微镜下找得头昏眼花，没结果，给老板打个招呼正准备放弃呢，扔细胞培养
: 皿的那一瞬间，突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下，一个克隆就在培养皿的最边
: 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。
: 这一年来，又是衣原体污染（实验室的host cell line本身就污染了！），又是克隆不
: 纯，搞得好头疼。最后稿子送出去了，作science这边的reviewer对突变子有兴趣，对
: 方法没兴趣，意见一堆；作方法的reviewer对突变子本身没兴趣，对方法上所有改进作
【在 m*********D 的大作中提到】
: 呵呵，今天收到通知，送Nature子刊的文章终于接受了。
: 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作，到我说服他就好
: 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验，能想到的可能
: 改进成功率的方式都加进去了。几个月后，终于作完了第一轮，还差点就没拿到我要的
: 东西。在显微镜下找得头昏眼花，没结果，给老板打个招呼正准备放弃呢，扔细胞培养
: 皿的那一瞬间，突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下，一个克隆就在培养皿的最边
: 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。
: 这一年来，又是衣原体污染（实验室的host cell line本身就污染了！），又是克隆不
: 纯，搞得好头疼。最后稿子送出去了，作science这边的reviewer对突变子有兴趣，对
: 方法没兴趣，意见一堆；作方法的reviewer对突变子本身没兴趣，对方法上所有改进作
c*j
52 楼
Congrats锛
e*6
53 楼
楼主这种应该给个永久职位养起来，一个老板养不起就让其他老板养。出idea的人毕竟
是少数，还是要有很多人能扎扎实实执行操作
【在 m*********D 的大作中提到】
: 呵呵，今天收到通知，送Nature子刊的文章终于接受了。
: 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作，到我说服他就好
: 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验，能想到的可能
: 改进成功率的方式都加进去了。几个月后，终于作完了第一轮，还差点就没拿到我要的
: 东西。在显微镜下找得头昏眼花，没结果，给老板打个招呼正准备放弃呢，扔细胞培养
: 皿的那一瞬间，突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下，一个克隆就在培养皿的最边
: 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。
: 这一年来，又是衣原体污染（实验室的host cell line本身就污染了！），又是克隆不
: 纯，搞得好头疼。最后稿子送出去了，作science这边的reviewer对突变子有兴趣，对
: 方法没兴趣，意见一堆；作方法的reviewer对突变子本身没兴趣，对方法上所有改进作
是少数，还是要有很多人能扎扎实实执行操作
【在 m*********D 的大作中提到】
: 呵呵，今天收到通知，送Nature子刊的文章终于接受了。
: 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作，到我说服他就好
: 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验，能想到的可能
: 改进成功率的方式都加进去了。几个月后，终于作完了第一轮，还差点就没拿到我要的
: 东西。在显微镜下找得头昏眼花，没结果，给老板打个招呼正准备放弃呢，扔细胞培养
: 皿的那一瞬间，突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下，一个克隆就在培养皿的最边
: 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。
: 这一年来，又是衣原体污染（实验室的host cell line本身就污染了！），又是克隆不
: 纯，搞得好头疼。最后稿子送出去了，作science这边的reviewer对突变子有兴趣，对
: 方法没兴趣，意见一堆；作方法的reviewer对突变子本身没兴趣，对方法上所有改进作
m*D
54 楼
谢各位！
回snowyday：呵呵，老了，就找个easy点的工作。多点精力把家里把生活搞好点。做教
授到了我这个年龄就没必要拼了，机会留给你们年轻人。钓钓鱼种种菜蛮好。好多我的
idea都让学生做，然后我教他们怎么做。这样我工作的压力小很多，她们也高兴。
回Ericzhang：呵呵，哪能那么高要求呢。这世界少了谁都没关系，地球照转。idea多
，也不一定都work。我现在教的一个学生就是拿了我的idea在做。我警告过她，成功的
概率比我的要小很多，还有其他因素可能做不出来。。。。她要赌一把，下礼拜会有结
果。她说她只要一个克隆啊。。。。要出来，应该可有搞过nature子刊。那是一个大计
划，把计算机model ing，crispr，protein structure 等等连到一起，很多还需要别
人合作。所以，年轻人都比较有闯劲。
回snowyday：呵呵，老了，就找个easy点的工作。多点精力把家里把生活搞好点。做教
授到了我这个年龄就没必要拼了，机会留给你们年轻人。钓钓鱼种种菜蛮好。好多我的
idea都让学生做，然后我教他们怎么做。这样我工作的压力小很多，她们也高兴。
回Ericzhang：呵呵，哪能那么高要求呢。这世界少了谁都没关系，地球照转。idea多
，也不一定都work。我现在教的一个学生就是拿了我的idea在做。我警告过她，成功的
概率比我的要小很多，还有其他因素可能做不出来。。。。她要赌一把，下礼拜会有结
果。她说她只要一个克隆啊。。。。要出来，应该可有搞过nature子刊。那是一个大计
划，把计算机model ing，crispr，protein structure 等等连到一起，很多还需要别
人合作。所以，年轻人都比较有闯劲。
h*o
55 楼
恭喜
虽然现在不做research了，但是得知文章被接收时的感觉还是很好的。
虽然现在不做research了，但是得知文章被接收时的感觉还是很好的。
s*g
56 楼
尽管不常来这里，可是看到你的收获，真心替你高兴啊！！！！
谁说千年老伯（博）没有建树？这就是活榜样！干自己喜欢的事情，让别人说去吧！
恭喜！
【在 m*********D 的大作中提到】
: 呵呵，今天收到通知，送Nature子刊的文章终于接受了。
: 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作，到我说服他就好
: 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验，能想到的可能
: 改进成功率的方式都加进去了。几个月后，终于作完了第一轮，还差点就没拿到我要的
: 东西。在显微镜下找得头昏眼花，没结果，给老板打个招呼正准备放弃呢，扔细胞培养
: 皿的那一瞬间，突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下，一个克隆就在培养皿的最边
: 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。
: 这一年来，又是衣原体污染（实验室的host cell line本身就污染了！），又是克隆不
: 纯，搞得好头疼。最后稿子送出去了，作science这边的reviewer对突变子有兴趣，对
: 方法没兴趣，意见一堆；作方法的reviewer对突变子本身没兴趣，对方法上所有改进作
谁说千年老伯（博）没有建树？这就是活榜样！干自己喜欢的事情，让别人说去吧！
恭喜！
【在 m*********D 的大作中提到】
: 呵呵，今天收到通知，送Nature子刊的文章终于接受了。
: 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作，到我说服他就好
: 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验，能想到的可能
: 改进成功率的方式都加进去了。几个月后，终于作完了第一轮，还差点就没拿到我要的
: 东西。在显微镜下找得头昏眼花，没结果，给老板打个招呼正准备放弃呢，扔细胞培养
: 皿的那一瞬间，突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下，一个克隆就在培养皿的最边
: 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。
: 这一年来，又是衣原体污染（实验室的host cell line本身就污染了！），又是克隆不
: 纯，搞得好头疼。最后稿子送出去了，作science这边的reviewer对突变子有兴趣，对
: 方法没兴趣，意见一堆；作方法的reviewer对突变子本身没兴趣，对方法上所有改进作
s*g
57 楼
最近我的细胞也是有mycoplasma， 用试剂处理后没有了，但是transfected shRNA不工
作了。很头疼。估计要重新转染了。不过我的细胞非常不好转。。。
【在 m*********D 的大作中提到】
: 哈哈，你可能是对的。我也不记得中文了-mycoplasma，就是支原体吧。：（。
: 多谢！
作了。很头疼。估计要重新转染了。不过我的细胞非常不好转。。。
【在 m*********D 的大作中提到】
: 哈哈，你可能是对的。我也不记得中文了-mycoplasma，就是支原体吧。：（。
: 多谢！
s*g
58 楼
看到你的成功，我自己也回想一下，真得像你学习。热爱科研，就要把它做好。
当然自己也要给自己谋些财务保证不饿肚子哈。
每次你的发文，都是正能量！
当然自己也要给自己谋些财务保证不饿肚子哈。
每次你的发文，都是正能量！
h*e
59 楼
恭喜。很少发言，这次要冒个泡
t*g
60 楼
知足常乐，心态好就行。
【在 s******y 的大作中提到】
: 你要求真低，看得开，反正孩子也上大学了，无所谓了，估计很多千老就没那么容易了
: 。我还行，拿了几个面试，先试试水。博士后是不做了，不过工钱还领俩月。
【在 s******y 的大作中提到】
: 你要求真低，看得开，反正孩子也上大学了，无所谓了，估计很多千老就没那么容易了
: 。我还行，拿了几个面试，先试试水。博士后是不做了，不过工钱还领俩月。
m*D
61 楼
呵呵，今天收到通知，送Nature子刊的文章终于接受了。
这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作，到我说服他就好
几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验，能想到的可能
改进成功率的方式都加进去了。几个月后，终于作完了第一轮，还差点就没拿到我要的
东西。在显微镜下找得头昏眼花，没结果，给老板打个招呼正准备放弃呢，扔细胞培养
皿的那一瞬间，突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下，一个克隆就在培养皿的最边
沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。
这一年来，又是衣原体污染（实验室的host cell line本身就污染了！），又是克隆不
纯，搞得好头疼。最后稿子送出去了，作science这边的reviewer对突变子有兴趣，对
方法没兴趣，意见一堆；作方法的reviewer对突变子本身没兴趣，对方法上所有改进作
用的思路都感兴趣，但对我们没有和其它方法进行试验比较很失望，觉得作为方法的文
章发表有欠缺。。。
老板说：你也好多年没发第一作者的文章了（上次发是2008年，JBC,还好被Faculty
1000选中了），今天回家开瓶酒喝吧。
不错不错，了结了这个，就可以全心全意接一个马上毕业学生的project了。学生这个
project刚发了Nature子刊，看能不能搞个grant。近十年实验室的所有grant都有我的
影子。一个RO1的renewal全靠我筛出来的compound;一个R21在第一次申请失败后我插进
去补数据，第二轮成功；一个DOD的grant虽然是学生为主，但筛选的第二轮的方法就是
我花了几个月来为他develop的；最新的RO1 renewal也是把我上面的mutant cell
lines的数据加进去，并且根据我的方法再提出新的idea后，第三轮才拿下来的。学生
的这个project写了一个proposal,可惜没拿到钱。希望我接手后，文章也发表了，能和
过去十年一样，有奇迹发生。我还需要5-6年的饭碗，把儿子的大学学费解决呢。
我的CRISPR/HDR方法可能对大多数人没有帮助。我是利用mutant的一个特点来筛选的。
我用两个guide sequences把我的基因功能搞掉（我的细胞靠这个基因才能生长）, 先
筛transfected细胞，再用mutant的特性来筛选我要的克隆，成功率很高。挑选出来的
克隆，70%是带mutation的。大约1/4是两个copy都按我设计的突变，1/2是有一个copy
按我设计的突变，另外1/4原因不明。因NPG问我们有没有兴趣把方法发表在Scientific
Data上，细节我等老板决定是不是发Scientific Data后，再考虑是不是post到这里。
祝各位同行中秋快乐！
这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作，到我说服他就好
几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验，能想到的可能
改进成功率的方式都加进去了。几个月后，终于作完了第一轮，还差点就没拿到我要的
东西。在显微镜下找得头昏眼花，没结果，给老板打个招呼正准备放弃呢，扔细胞培养
皿的那一瞬间，突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下，一个克隆就在培养皿的最边
沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。
这一年来，又是衣原体污染（实验室的host cell line本身就污染了！），又是克隆不
纯，搞得好头疼。最后稿子送出去了，作science这边的reviewer对突变子有兴趣，对
方法没兴趣，意见一堆；作方法的reviewer对突变子本身没兴趣，对方法上所有改进作
用的思路都感兴趣，但对我们没有和其它方法进行试验比较很失望，觉得作为方法的文
章发表有欠缺。。。
老板说：你也好多年没发第一作者的文章了（上次发是2008年，JBC,还好被Faculty
1000选中了），今天回家开瓶酒喝吧。
不错不错，了结了这个，就可以全心全意接一个马上毕业学生的project了。学生这个
project刚发了Nature子刊，看能不能搞个grant。近十年实验室的所有grant都有我的
影子。一个RO1的renewal全靠我筛出来的compound;一个R21在第一次申请失败后我插进
去补数据，第二轮成功；一个DOD的grant虽然是学生为主，但筛选的第二轮的方法就是
我花了几个月来为他develop的；最新的RO1 renewal也是把我上面的mutant cell
lines的数据加进去，并且根据我的方法再提出新的idea后，第三轮才拿下来的。学生
的这个project写了一个proposal,可惜没拿到钱。希望我接手后，文章也发表了，能和
过去十年一样，有奇迹发生。我还需要5-6年的饭碗，把儿子的大学学费解决呢。
我的CRISPR/HDR方法可能对大多数人没有帮助。我是利用mutant的一个特点来筛选的。
我用两个guide sequences把我的基因功能搞掉（我的细胞靠这个基因才能生长）, 先
筛transfected细胞，再用mutant的特性来筛选我要的克隆，成功率很高。挑选出来的
克隆，70%是带mutation的。大约1/4是两个copy都按我设计的突变，1/2是有一个copy
按我设计的突变，另外1/4原因不明。因NPG问我们有没有兴趣把方法发表在Scientific
Data上，细节我等老板决定是不是发Scientific Data后，再考虑是不是post到这里。
祝各位同行中秋快乐！
s*i
62 楼
恭喜！中秋快乐？
【在 m*********D 的大作中提到】
: 呵呵，今天收到通知，送Nature子刊的文章终于接受了。
: 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作，到我说服他就好
: 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验，能想到的可能
: 改进成功率的方式都加进去了。几个月后，终于作完了第一轮，还差点就没拿到我要的
: 东西。在显微镜下找得头昏眼花，没结果，给老板打个招呼正准备放弃呢，扔细胞培养
: 皿的那一瞬间，突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下，一个克隆就在培养皿的最边
: 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。
: 这一年来，又是衣原体污染（实验室的host cell line本身就污染了！），又是克隆不
: 纯，搞得好头疼。最后稿子送出去了，作science这边的reviewer对突变子有兴趣，对
: 方法没兴趣，意见一堆；作方法的reviewer对突变子本身没兴趣，对方法上所有改进作
【在 m*********D 的大作中提到】
: 呵呵，今天收到通知，送Nature子刊的文章终于接受了。
: 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作，到我说服他就好
: 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验，能想到的可能
: 改进成功率的方式都加进去了。几个月后，终于作完了第一轮，还差点就没拿到我要的
: 东西。在显微镜下找得头昏眼花，没结果，给老板打个招呼正准备放弃呢，扔细胞培养
: 皿的那一瞬间，突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下，一个克隆就在培养皿的最边
: 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。
: 这一年来，又是衣原体污染（实验室的host cell line本身就污染了！），又是克隆不
: 纯，搞得好头疼。最后稿子送出去了，作science这边的reviewer对突变子有兴趣，对
: 方法没兴趣，意见一堆；作方法的reviewer对突变子本身没兴趣，对方法上所有改进作
m*a
63 楼
恭喜midwestPstD老师！中秋节快乐！
听说过支原体污染，细菌污染，真菌污染，衣原体污染还是第一次听说。
【在 m*********D 的大作中提到】
: 呵呵，今天收到通知，送Nature子刊的文章终于接受了。
: 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作，到我说服他就好
: 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验，能想到的可能
: 改进成功率的方式都加进去了。几个月后，终于作完了第一轮，还差点就没拿到我要的
: 东西。在显微镜下找得头昏眼花，没结果，给老板打个招呼正准备放弃呢，扔细胞培养
: 皿的那一瞬间，突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下，一个克隆就在培养皿的最边
: 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。
: 这一年来，又是衣原体污染（实验室的host cell line本身就污染了！），又是克隆不
: 纯，搞得好头疼。最后稿子送出去了，作science这边的reviewer对突变子有兴趣，对
: 方法没兴趣，意见一堆；作方法的reviewer对突变子本身没兴趣，对方法上所有改进作
听说过支原体污染，细菌污染，真菌污染，衣原体污染还是第一次听说。
【在 m*********D 的大作中提到】
: 呵呵，今天收到通知，送Nature子刊的文章终于接受了。
: 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作，到我说服他就好
: 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验，能想到的可能
: 改进成功率的方式都加进去了。几个月后，终于作完了第一轮，还差点就没拿到我要的
: 东西。在显微镜下找得头昏眼花，没结果，给老板打个招呼正准备放弃呢，扔细胞培养
: 皿的那一瞬间，突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下，一个克隆就在培养皿的最边
: 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。
: 这一年来，又是衣原体污染（实验室的host cell line本身就污染了！），又是克隆不
: 纯，搞得好头疼。最后稿子送出去了，作science这边的reviewer对突变子有兴趣，对
: 方法没兴趣，意见一堆；作方法的reviewer对突变子本身没兴趣，对方法上所有改进作
m*D
64 楼
谢谢！
【在 s*****i 的大作中提到】
: 恭喜！中秋快乐？
【在 s*****i 的大作中提到】
: 恭喜！中秋快乐？
m*D
65 楼
哈哈，你可能是对的。我也不记得中文了-mycoplasma，就是支原体吧。：（。
多谢！
【在 m****a 的大作中提到】
: 恭喜midwestPstD老师！中秋节快乐！
: 听说过支原体污染，细菌污染，真菌污染，衣原体污染还是第一次听说。
多谢！
【在 m****a 的大作中提到】
: 恭喜midwestPstD老师！中秋节快乐！
: 听说过支原体污染，细菌污染，真菌污染，衣原体污染还是第一次听说。
G*G
66 楼
congrats.
【在 m*********D 的大作中提到】
: 呵呵，今天收到通知，送Nature子刊的文章终于接受了。
: 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作，到我说服他就好
: 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验，能想到的可能
: 改进成功率的方式都加进去了。几个月后，终于作完了第一轮，还差点就没拿到我要的
: 东西。在显微镜下找得头昏眼花，没结果，给老板打个招呼正准备放弃呢，扔细胞培养
: 皿的那一瞬间，突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下，一个克隆就在培养皿的最边
: 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。
: 这一年来，又是衣原体污染（实验室的host cell line本身就污染了！），又是克隆不
: 纯，搞得好头疼。最后稿子送出去了，作science这边的reviewer对突变子有兴趣，对
: 方法没兴趣，意见一堆；作方法的reviewer对突变子本身没兴趣，对方法上所有改进作
【在 m*********D 的大作中提到】
: 呵呵，今天收到通知，送Nature子刊的文章终于接受了。
: 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作，到我说服他就好
: 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验，能想到的可能
: 改进成功率的方式都加进去了。几个月后，终于作完了第一轮，还差点就没拿到我要的
: 东西。在显微镜下找得头昏眼花，没结果，给老板打个招呼正准备放弃呢，扔细胞培养
: 皿的那一瞬间，突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下，一个克隆就在培养皿的最边
: 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。
: 这一年来，又是衣原体污染（实验室的host cell line本身就污染了！），又是克隆不
: 纯，搞得好头疼。最后稿子送出去了，作science这边的reviewer对突变子有兴趣，对
: 方法没兴趣，意见一堆；作方法的reviewer对突变子本身没兴趣，对方法上所有改进作
d*m
67 楼
congrats.
c*6
68 楼
恭喜恭喜啊 什么时候在线呢 一定要拜读一下
s*y
69 楼
恭喜恭喜，发paper绝对值得庆贺
F*6
70 楼
恭喜恭喜，的确是绝好的中秋节礼物
btw,每每读到 midwestPstD的帖子，都能感受到强烈的科研热情
我们系里曾经也有一位年长的postdoc（45左右？），也是每天十分有激情的做科研
同为postdoc，也在中西部（I am in texas），很难理解在渺茫的postdoc路上中哪里
来的这些正能量，但自己的状态的确达不到这样，也常常把实验室和学校的压力带回家
，真是自愧不如啊。。。
Anyway, supercongrats！
btw,每每读到 midwestPstD的帖子，都能感受到强烈的科研热情
我们系里曾经也有一位年长的postdoc（45左右？），也是每天十分有激情的做科研
同为postdoc，也在中西部（I am in texas），很难理解在渺茫的postdoc路上中哪里
来的这些正能量，但自己的状态的确达不到这样，也常常把实验室和学校的压力带回家
，真是自愧不如啊。。。
Anyway, supercongrats！
m*r
71 楼
恭喜！
S*e
72 楼
你这完全是走钢丝似的成功，假如没有compound，假如grant得不到，你可能就失业了
。其实认真做科学就是你这种情况，出好结果全凭运气。那种做课题成功效率极其高的
往往都是造假。只是这个社会对科学家太不公平了，没有任何保障。你可以写小说了。
hcy除了和本科生谈心，玩古琴，能有这些体会吗？
【在 m*********D 的大作中提到】
: 呵呵，今天收到通知，送Nature子刊的文章终于接受了。
: 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作，到我说服他就好
: 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验，能想到的可能
: 改进成功率的方式都加进去了。几个月后，终于作完了第一轮，还差点就没拿到我要的
: 东西。在显微镜下找得头昏眼花，没结果，给老板打个招呼正准备放弃呢，扔细胞培养
: 皿的那一瞬间，突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下，一个克隆就在培养皿的最边
: 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。
: 这一年来，又是衣原体污染（实验室的host cell line本身就污染了！），又是克隆不
: 纯，搞得好头疼。最后稿子送出去了，作science这边的reviewer对突变子有兴趣，对
: 方法没兴趣，意见一堆；作方法的reviewer对突变子本身没兴趣，对方法上所有改进作
。其实认真做科学就是你这种情况，出好结果全凭运气。那种做课题成功效率极其高的
往往都是造假。只是这个社会对科学家太不公平了，没有任何保障。你可以写小说了。
hcy除了和本科生谈心，玩古琴，能有这些体会吗？
【在 m*********D 的大作中提到】
: 呵呵，今天收到通知，送Nature子刊的文章终于接受了。
: 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作，到我说服他就好
: 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验，能想到的可能
: 改进成功率的方式都加进去了。几个月后，终于作完了第一轮，还差点就没拿到我要的
: 东西。在显微镜下找得头昏眼花，没结果，给老板打个招呼正准备放弃呢，扔细胞培养
: 皿的那一瞬间，突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下，一个克隆就在培养皿的最边
: 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。
: 这一年来，又是衣原体污染（实验室的host cell line本身就污染了！），又是克隆不
: 纯，搞得好头疼。最后稿子送出去了，作science这边的reviewer对突变子有兴趣，对
: 方法没兴趣，意见一堆；作方法的reviewer对突变子本身没兴趣，对方法上所有改进作
c*n
73 楼
赞！
【在 m*********D 的大作中提到】
: 呵呵，今天收到通知，送Nature子刊的文章终于接受了。
: 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作，到我说服他就好
: 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验，能想到的可能
: 改进成功率的方式都加进去了。几个月后，终于作完了第一轮，还差点就没拿到我要的
: 东西。在显微镜下找得头昏眼花，没结果，给老板打个招呼正准备放弃呢，扔细胞培养
: 皿的那一瞬间，突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下，一个克隆就在培养皿的最边
: 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。
: 这一年来，又是衣原体污染（实验室的host cell line本身就污染了！），又是克隆不
: 纯，搞得好头疼。最后稿子送出去了，作science这边的reviewer对突变子有兴趣，对
: 方法没兴趣，意见一堆；作方法的reviewer对突变子本身没兴趣，对方法上所有改进作
【在 m*********D 的大作中提到】
: 呵呵，今天收到通知，送Nature子刊的文章终于接受了。
: 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作，到我说服他就好
: 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验，能想到的可能
: 改进成功率的方式都加进去了。几个月后，终于作完了第一轮，还差点就没拿到我要的
: 东西。在显微镜下找得头昏眼花，没结果，给老板打个招呼正准备放弃呢，扔细胞培养
: 皿的那一瞬间，突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下，一个克隆就在培养皿的最边
: 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。
: 这一年来，又是衣原体污染（实验室的host cell line本身就污染了！），又是克隆不
: 纯，搞得好头疼。最后稿子送出去了，作science这边的reviewer对突变子有兴趣，对
: 方法没兴趣，意见一堆；作方法的reviewer对突变子本身没兴趣，对方法上所有改进作
e*s
74 楼
难得有如此之热情，蝼蚁撼树 一定要有信心
【在 m*********D 的大作中提到】
: 呵呵，今天收到通知，送Nature子刊的文章终于接受了。
: 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作，到我说服他就好
: 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验，能想到的可能
: 改进成功率的方式都加进去了。几个月后，终于作完了第一轮，还差点就没拿到我要的
: 东西。在显微镜下找得头昏眼花，没结果，给老板打个招呼正准备放弃呢，扔细胞培养
: 皿的那一瞬间，突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下，一个克隆就在培养皿的最边
: 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。
: 这一年来，又是衣原体污染（实验室的host cell line本身就污染了！），又是克隆不
: 纯，搞得好头疼。最后稿子送出去了，作science这边的reviewer对突变子有兴趣，对
: 方法没兴趣，意见一堆；作方法的reviewer对突变子本身没兴趣，对方法上所有改进作
【在 m*********D 的大作中提到】
: 呵呵，今天收到通知，送Nature子刊的文章终于接受了。
: 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作，到我说服他就好
: 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验，能想到的可能
: 改进成功率的方式都加进去了。几个月后，终于作完了第一轮，还差点就没拿到我要的
: 东西。在显微镜下找得头昏眼花，没结果，给老板打个招呼正准备放弃呢，扔细胞培养
: 皿的那一瞬间，突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下，一个克隆就在培养皿的最边
: 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。
: 这一年来，又是衣原体污染（实验室的host cell line本身就污染了！），又是克隆不
: 纯，搞得好头疼。最后稿子送出去了，作science这边的reviewer对突变子有兴趣，对
: 方法没兴趣，意见一堆；作方法的reviewer对突变子本身没兴趣，对方法上所有改进作
t*k
75 楼
恭喜恭喜，赶快让我沾点喜气
l*7
76 楼
真心祝福楼主，这是楼主对科研多年的积累的结果。一般来讲，新的薄厚还真心没有到
这个层次。实验室招薄厚，十分之一人的能到楼主这个层次就算是实验室烧高香了。
这个层次。实验室招薄厚，十分之一人的能到楼主这个层次就算是实验室烧高香了。
b*s
77 楼
恭喜，正能量
【在 m*********D 的大作中提到】
: 呵呵，今天收到通知，送Nature子刊的文章终于接受了。
: 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作，到我说服他就好
: 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验，能想到的可能
: 改进成功率的方式都加进去了。几个月后，终于作完了第一轮，还差点就没拿到我要的
: 东西。在显微镜下找得头昏眼花，没结果，给老板打个招呼正准备放弃呢，扔细胞培养
: 皿的那一瞬间，突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下，一个克隆就在培养皿的最边
: 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。
: 这一年来，又是衣原体污染（实验室的host cell line本身就污染了！），又是克隆不
: 纯，搞得好头疼。最后稿子送出去了，作science这边的reviewer对突变子有兴趣，对
: 方法没兴趣，意见一堆；作方法的reviewer对突变子本身没兴趣，对方法上所有改进作
【在 m*********D 的大作中提到】
: 呵呵，今天收到通知，送Nature子刊的文章终于接受了。
: 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作，到我说服他就好
: 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验，能想到的可能
: 改进成功率的方式都加进去了。几个月后，终于作完了第一轮，还差点就没拿到我要的
: 东西。在显微镜下找得头昏眼花，没结果，给老板打个招呼正准备放弃呢，扔细胞培养
: 皿的那一瞬间，突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下，一个克隆就在培养皿的最边
: 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。
: 这一年来，又是衣原体污染（实验室的host cell line本身就污染了！），又是克隆不
: 纯，搞得好头疼。最后稿子送出去了，作science这边的reviewer对突变子有兴趣，对
: 方法没兴趣，意见一堆；作方法的reviewer对突变子本身没兴趣，对方法上所有改进作
O*e
78 楼
恭喜，恭喜！
【在 m*********D 的大作中提到】
: 呵呵，今天收到通知，送Nature子刊的文章终于接受了。
: 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作，到我说服他就好
: 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验，能想到的可能
: 改进成功率的方式都加进去了。几个月后，终于作完了第一轮，还差点就没拿到我要的
: 东西。在显微镜下找得头昏眼花，没结果，给老板打个招呼正准备放弃呢，扔细胞培养
: 皿的那一瞬间，突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下，一个克隆就在培养皿的最边
: 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。
: 这一年来，又是衣原体污染（实验室的host cell line本身就污染了！），又是克隆不
: 纯，搞得好头疼。最后稿子送出去了，作science这边的reviewer对突变子有兴趣，对
: 方法没兴趣，意见一堆；作方法的reviewer对突变子本身没兴趣，对方法上所有改进作
【在 m*********D 的大作中提到】
: 呵呵，今天收到通知，送Nature子刊的文章终于接受了。
: 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作，到我说服他就好
: 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验，能想到的可能
: 改进成功率的方式都加进去了。几个月后，终于作完了第一轮，还差点就没拿到我要的
: 东西。在显微镜下找得头昏眼花，没结果，给老板打个招呼正准备放弃呢，扔细胞培养
: 皿的那一瞬间，突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下，一个克隆就在培养皿的最边
: 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。
: 这一年来，又是衣原体污染（实验室的host cell line本身就污染了！），又是克隆不
: 纯，搞得好头疼。最后稿子送出去了，作science这边的reviewer对突变子有兴趣，对
: 方法没兴趣，意见一堆；作方法的reviewer对突变子本身没兴趣，对方法上所有改进作
b*1
79 楼
恭喜恭喜，都是你努力的回报啊，这下放心啦，也可以抽空多钓鱼了：）
【在 m*********D 的大作中提到】
: 呵呵，今天收到通知，送Nature子刊的文章终于接受了。
: 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作，到我说服他就好
: 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验，能想到的可能
: 改进成功率的方式都加进去了。几个月后，终于作完了第一轮，还差点就没拿到我要的
: 东西。在显微镜下找得头昏眼花，没结果，给老板打个招呼正准备放弃呢，扔细胞培养
: 皿的那一瞬间，突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下，一个克隆就在培养皿的最边
: 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。
: 这一年来，又是衣原体污染（实验室的host cell line本身就污染了！），又是克隆不
: 纯，搞得好头疼。最后稿子送出去了，作science这边的reviewer对突变子有兴趣，对
: 方法没兴趣，意见一堆；作方法的reviewer对突变子本身没兴趣，对方法上所有改进作
【在 m*********D 的大作中提到】
: 呵呵，今天收到通知，送Nature子刊的文章终于接受了。
: 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作，到我说服他就好
: 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验，能想到的可能
: 改进成功率的方式都加进去了。几个月后，终于作完了第一轮，还差点就没拿到我要的
: 东西。在显微镜下找得头昏眼花，没结果，给老板打个招呼正准备放弃呢，扔细胞培养
: 皿的那一瞬间，突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下，一个克隆就在培养皿的最边
: 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。
: 这一年来，又是衣原体污染（实验室的host cell line本身就污染了！），又是克隆不
: 纯，搞得好头疼。最后稿子送出去了，作science这边的reviewer对突变子有兴趣，对
: 方法没兴趣，意见一堆；作方法的reviewer对突变子本身没兴趣，对方法上所有改进作
x*5
80 楼
congrats!
【在 m*********D 的大作中提到】
: 呵呵，今天收到通知，送Nature子刊的文章终于接受了。
: 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作，到我说服他就好
: 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验，能想到的可能
: 改进成功率的方式都加进去了。几个月后，终于作完了第一轮，还差点就没拿到我要的
: 东西。在显微镜下找得头昏眼花，没结果，给老板打个招呼正准备放弃呢，扔细胞培养
: 皿的那一瞬间，突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下，一个克隆就在培养皿的最边
: 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。
: 这一年来，又是衣原体污染（实验室的host cell line本身就污染了！），又是克隆不
: 纯，搞得好头疼。最后稿子送出去了，作science这边的reviewer对突变子有兴趣，对
: 方法没兴趣，意见一堆；作方法的reviewer对突变子本身没兴趣，对方法上所有改进作
【在 m*********D 的大作中提到】
: 呵呵，今天收到通知，送Nature子刊的文章终于接受了。
: 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作，到我说服他就好
: 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验，能想到的可能
: 改进成功率的方式都加进去了。几个月后，终于作完了第一轮，还差点就没拿到我要的
: 东西。在显微镜下找得头昏眼花，没结果，给老板打个招呼正准备放弃呢，扔细胞培养
: 皿的那一瞬间，突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下，一个克隆就在培养皿的最边
: 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。
: 这一年来，又是衣原体污染（实验室的host cell line本身就污染了！），又是克隆不
: 纯，搞得好头疼。最后稿子送出去了，作science这边的reviewer对突变子有兴趣，对
: 方法没兴趣，意见一堆；作方法的reviewer对突变子本身没兴趣，对方法上所有改进作
t*t
81 楼
恭喜！ 沾点喜气！ 祝中秋快乐！
n*7
82 楼
恭喜
你心态真是好
做科研还是要沉得住气
你心态真是好
做科研还是要沉得住气
m*D
83 楼
多谢上面各位同行！这大家心想事成！
回Shangxuanyue：你说的都市大路货，每人不知道。我自己还经历过老板没钱自谋出路
呢。你看懂了我这句的潜台词：“你也好多年没发第一作者的文章了（上次发是2008年
，JBC,还好被Faculty 1000选中了）。。。”
回Fan2016：年青的时候担忧多一些是肯定的。但随着时间的推移，生活的稳定，担忧
就会少很多。不管你改不改行，personal finance一定要放在最重要的位置。而
personal finance的改善，是需要时间和计划的。
回laodao2007：我可能对自己的个性能力比较了解，所以，选择的时候就不会好高骛远
，而是脚踏实地。
回benxiong811：差不到秋钓的季节了。我菜园子也打理得差不多了，就房子周围需要
买点top soil垫高一点，解决房子周边的积水问题，然后就可以钓两个月了。春天的鱼
还有几十斤呢。秋天的鱼经过一个夏天的饱食，比较肥美，争取搞几十斤过冬。：）。
回nowhere7：要心平气和，还是要从钱上入手。没有我十几年的计划把退休生活安排好
，我估计我今天也不会这么从容。
回Shangxuanyue：你说的都市大路货，每人不知道。我自己还经历过老板没钱自谋出路
呢。你看懂了我这句的潜台词：“你也好多年没发第一作者的文章了（上次发是2008年
，JBC,还好被Faculty 1000选中了）。。。”
回Fan2016：年青的时候担忧多一些是肯定的。但随着时间的推移，生活的稳定，担忧
就会少很多。不管你改不改行，personal finance一定要放在最重要的位置。而
personal finance的改善，是需要时间和计划的。
回laodao2007：我可能对自己的个性能力比较了解，所以，选择的时候就不会好高骛远
，而是脚踏实地。
回benxiong811：差不到秋钓的季节了。我菜园子也打理得差不多了，就房子周围需要
买点top soil垫高一点，解决房子周边的积水问题，然后就可以钓两个月了。春天的鱼
还有几十斤呢。秋天的鱼经过一个夏天的饱食，比较肥美，争取搞几十斤过冬。：）。
回nowhere7：要心平气和，还是要从钱上入手。没有我十几年的计划把退休生活安排好
，我估计我今天也不会这么从容。
d*i
84 楼
恭喜楼主！佩服佩服！
m*g
85 楼
恭喜，恭喜。
c*4
86 楼
这个才是科研精神！要是社会对这样的人再多点扶持就好了。
F*Q
87 楼
恭喜楼主！还能保持那份天真和激情，真不简单。
w*c
88 楼
big cong
a*p
89 楼
Congrats!
【在 m*********D 的大作中提到】
: 呵呵，今天收到通知，送Nature子刊的文章终于接受了。
: 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作，到我说服他就好
: 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验，能想到的可能
: 改进成功率的方式都加进去了。几个月后，终于作完了第一轮，还差点就没拿到我要的
: 东西。在显微镜下找得头昏眼花，没结果，给老板打个招呼正准备放弃呢，扔细胞培养
: 皿的那一瞬间，突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下，一个克隆就在培养皿的最边
: 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。
: 这一年来，又是衣原体污染（实验室的host cell line本身就污染了！），又是克隆不
: 纯，搞得好头疼。最后稿子送出去了，作science这边的reviewer对突变子有兴趣，对
: 方法没兴趣，意见一堆；作方法的reviewer对突变子本身没兴趣，对方法上所有改进作
【在 m*********D 的大作中提到】
: 呵呵，今天收到通知，送Nature子刊的文章终于接受了。
: 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作，到我说服他就好
: 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验，能想到的可能
: 改进成功率的方式都加进去了。几个月后，终于作完了第一轮，还差点就没拿到我要的
: 东西。在显微镜下找得头昏眼花，没结果，给老板打个招呼正准备放弃呢，扔细胞培养
: 皿的那一瞬间，突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下，一个克隆就在培养皿的最边
: 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。
: 这一年来，又是衣原体污染（实验室的host cell line本身就污染了！），又是克隆不
: 纯，搞得好头疼。最后稿子送出去了，作science这边的reviewer对突变子有兴趣，对
: 方法没兴趣，意见一堆；作方法的reviewer对突变子本身没兴趣，对方法上所有改进作
F*Q
90 楼
好奇一下，楼主的技术那么牛，为什么没在早年的时候找个牛老板整一两篇CNS然后独
立呢？
立呢？
m*D
91 楼
多谢上面几位。大家中秋快乐！
回FAQ--生物bench就是熟能生巧，没什么牛或者不牛的。我作这个，很多经验是当年作
knock-out老鼠的时候积累的。我作knock-out老鼠的那几年，和老板相处很不愉快，但
确实学了很多bench上的东西。老板是new faculty,我从来没作过tissue culture。所
以，老板除了手把手教我（我是实验室里唯一能干点事的），我们一起从空房间到建立
一个完整的实验室，你想我经历有多少？我比老板还先到位三个月，也就是我一个人干
了三个月之后，老板才来上班。。。除了practice,我还要读protocol,不仅要会作，还
要懂为啥这么作。
作老板有作老板的要求。我写就远远不如我现在的老板。每个人找对自己的位置就好。
基础知识也没有老板扎实。一个实验室的远景往往也不是技术先进就能左右的。
【在 F*Q 的大作中提到】
: 好奇一下，楼主的技术那么牛，为什么没在早年的时候找个牛老板整一两篇CNS然后独
: 立呢？
回FAQ--生物bench就是熟能生巧，没什么牛或者不牛的。我作这个，很多经验是当年作
knock-out老鼠的时候积累的。我作knock-out老鼠的那几年，和老板相处很不愉快，但
确实学了很多bench上的东西。老板是new faculty,我从来没作过tissue culture。所
以，老板除了手把手教我（我是实验室里唯一能干点事的），我们一起从空房间到建立
一个完整的实验室，你想我经历有多少？我比老板还先到位三个月，也就是我一个人干
了三个月之后，老板才来上班。。。除了practice,我还要读protocol,不仅要会作，还
要懂为啥这么作。
作老板有作老板的要求。我写就远远不如我现在的老板。每个人找对自己的位置就好。
基础知识也没有老板扎实。一个实验室的远景往往也不是技术先进就能左右的。
【在 F*Q 的大作中提到】
: 好奇一下，楼主的技术那么牛，为什么没在早年的时候找个牛老板整一两篇CNS然后独
: 立呢？
F*Q
92 楼
明白。做独立研究光技术是不够，不过大部分独立研究的也就是跟风，技术好跟得快。
曾经剽窃我的那位也算是技术牛人了，见了我的数据后甚至没问我细节就很快用自己的
技术重复出来了，然后发了PNAS。 LOL
: 多谢上面几位。大家中秋快乐！
: 回FAQ--生物bench就是熟能生巧，没什么牛或者不牛的。我作这个，很多
经验是
当年作
: knock-out老鼠的时候积累的。我作knock-out老鼠的那几年，和老板相处
很不愉
快，但
: 确实学了很多bench上的东西。老板是new faculty,我从来没作过tissue
culture。所
: 以，老板除了手把手教我（我是实验室里唯一能干点事的），我们一起从
空房间
到建立
: 一个完整的实验室，你想我经历有多少？我比老板还先到位三个月，也就
是我一
个人干
: 了三个月之后，老板才来上班。。。除了practice,我还要读protocol,不
仅要会
作，还
: 要懂为啥这么作。
: 作老板有作老板的要求。我写就远远不如我现在的老板。每个人找对自己
的位置
就好。
: 基础知识也没有老板扎实。一个实验室的远景往往也不是技术先进就能左
右的。
【在 m*********D 的大作中提到】
: 多谢上面几位。大家中秋快乐！
: 回FAQ--生物bench就是熟能生巧，没什么牛或者不牛的。我作这个，很多经验是当年作
: knock-out老鼠的时候积累的。我作knock-out老鼠的那几年，和老板相处很不愉快，但
: 确实学了很多bench上的东西。老板是new faculty,我从来没作过tissue culture。所
: 以，老板除了手把手教我（我是实验室里唯一能干点事的），我们一起从空房间到建立
: 一个完整的实验室，你想我经历有多少？我比老板还先到位三个月，也就是我一个人干
: 了三个月之后，老板才来上班。。。除了practice,我还要读protocol,不仅要会作，还
: 要懂为啥这么作。
: 作老板有作老板的要求。我写就远远不如我现在的老板。每个人找对自己的位置就好。
: 基础知识也没有老板扎实。一个实验室的远景往往也不是技术先进就能左右的。
曾经剽窃我的那位也算是技术牛人了，见了我的数据后甚至没问我细节就很快用自己的
技术重复出来了，然后发了PNAS。 LOL
: 多谢上面几位。大家中秋快乐！
: 回FAQ--生物bench就是熟能生巧，没什么牛或者不牛的。我作这个，很多
经验是
当年作
: knock-out老鼠的时候积累的。我作knock-out老鼠的那几年，和老板相处
很不愉
快，但
: 确实学了很多bench上的东西。老板是new faculty,我从来没作过tissue
culture。所
: 以，老板除了手把手教我（我是实验室里唯一能干点事的），我们一起从
空房间
到建立
: 一个完整的实验室，你想我经历有多少？我比老板还先到位三个月，也就
是我一
个人干
: 了三个月之后，老板才来上班。。。除了practice,我还要读protocol,不
仅要会
作，还
: 要懂为啥这么作。
: 作老板有作老板的要求。我写就远远不如我现在的老板。每个人找对自己
的位置
就好。
: 基础知识也没有老板扎实。一个实验室的远景往往也不是技术先进就能左
右的。
【在 m*********D 的大作中提到】
: 多谢上面几位。大家中秋快乐！
: 回FAQ--生物bench就是熟能生巧，没什么牛或者不牛的。我作这个，很多经验是当年作
: knock-out老鼠的时候积累的。我作knock-out老鼠的那几年，和老板相处很不愉快，但
: 确实学了很多bench上的东西。老板是new faculty,我从来没作过tissue culture。所
: 以，老板除了手把手教我（我是实验室里唯一能干点事的），我们一起从空房间到建立
: 一个完整的实验室，你想我经历有多少？我比老板还先到位三个月，也就是我一个人干
: 了三个月之后，老板才来上班。。。除了practice,我还要读protocol,不仅要会作，还
: 要懂为啥这么作。
: 作老板有作老板的要求。我写就远远不如我现在的老板。每个人找对自己的位置就好。
: 基础知识也没有老板扎实。一个实验室的远景往往也不是技术先进就能左右的。
a*8
93 楼
你老板有太幸福了！lz你对生活工作的热情太棒了。人是不是幸福心态很重要，lz生活
上的修养一级棒。
【在 m*********D 的大作中提到】
: 呵呵，今天收到通知，送Nature子刊的文章终于接受了。
: 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作，到我说服他就好
: 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验，能想到的可能
: 改进成功率的方式都加进去了。几个月后，终于作完了第一轮，还差点就没拿到我要的
: 东西。在显微镜下找得头昏眼花，没结果，给老板打个招呼正准备放弃呢，扔细胞培养
: 皿的那一瞬间，突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下，一个克隆就在培养皿的最边
: 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。
: 这一年来，又是衣原体污染（实验室的host cell line本身就污染了！），又是克隆不
: 纯，搞得好头疼。最后稿子送出去了，作science这边的reviewer对突变子有兴趣，对
: 方法没兴趣，意见一堆；作方法的reviewer对突变子本身没兴趣，对方法上所有改进作
上的修养一级棒。
【在 m*********D 的大作中提到】
: 呵呵，今天收到通知，送Nature子刊的文章终于接受了。
: 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作，到我说服他就好
: 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验，能想到的可能
: 改进成功率的方式都加进去了。几个月后，终于作完了第一轮，还差点就没拿到我要的
: 东西。在显微镜下找得头昏眼花，没结果，给老板打个招呼正准备放弃呢，扔细胞培养
: 皿的那一瞬间，突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下，一个克隆就在培养皿的最边
: 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。
: 这一年来，又是衣原体污染（实验室的host cell line本身就污染了！），又是克隆不
: 纯，搞得好头疼。最后稿子送出去了，作science这边的reviewer对突变子有兴趣，对
: 方法没兴趣，意见一堆；作方法的reviewer对突变子本身没兴趣，对方法上所有改进作
M*I
94 楼
恭喜恭喜
【在 m*********D 的大作中提到】
: 呵呵，今天收到通知，送Nature子刊的文章终于接受了。
: 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作，到我说服他就好
: 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验，能想到的可能
: 改进成功率的方式都加进去了。几个月后，终于作完了第一轮，还差点就没拿到我要的
: 东西。在显微镜下找得头昏眼花，没结果，给老板打个招呼正准备放弃呢，扔细胞培养
: 皿的那一瞬间，突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下，一个克隆就在培养皿的最边
: 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。
: 这一年来，又是衣原体污染（实验室的host cell line本身就污染了！），又是克隆不
: 纯，搞得好头疼。最后稿子送出去了，作science这边的reviewer对突变子有兴趣，对
: 方法没兴趣，意见一堆；作方法的reviewer对突变子本身没兴趣，对方法上所有改进作
【在 m*********D 的大作中提到】
: 呵呵，今天收到通知，送Nature子刊的文章终于接受了。
: 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作，到我说服他就好
: 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验，能想到的可能
: 改进成功率的方式都加进去了。几个月后，终于作完了第一轮，还差点就没拿到我要的
: 东西。在显微镜下找得头昏眼花，没结果，给老板打个招呼正准备放弃呢，扔细胞培养
: 皿的那一瞬间，突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下，一个克隆就在培养皿的最边
: 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。
: 这一年来，又是衣原体污染（实验室的host cell line本身就污染了！），又是克隆不
: 纯，搞得好头疼。最后稿子送出去了，作science这边的reviewer对突变子有兴趣，对
: 方法没兴趣，意见一堆；作方法的reviewer对突变子本身没兴趣，对方法上所有改进作
c*r
95 楼
恭喜恭喜！
j*0
96 楼
恭喜! 喜欢看你写的帖子，平淡而扎实的态度。
【在 m*********D 的大作中提到】
: 呵呵，今天收到通知，送Nature子刊的文章终于接受了。
: 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作，到我说服他就好
: 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验，能想到的可能
: 改进成功率的方式都加进去了。几个月后，终于作完了第一轮，还差点就没拿到我要的
: 东西。在显微镜下找得头昏眼花，没结果，给老板打个招呼正准备放弃呢，扔细胞培养
: 皿的那一瞬间，突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下，一个克隆就在培养皿的最边
: 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。
: 这一年来，又是衣原体污染（实验室的host cell line本身就污染了！），又是克隆不
: 纯，搞得好头疼。最后稿子送出去了，作science这边的reviewer对突变子有兴趣，对
: 方法没兴趣，意见一堆；作方法的reviewer对突变子本身没兴趣，对方法上所有改进作
【在 m*********D 的大作中提到】
: 呵呵，今天收到通知，送Nature子刊的文章终于接受了。
: 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作，到我说服他就好
: 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验，能想到的可能
: 改进成功率的方式都加进去了。几个月后，终于作完了第一轮，还差点就没拿到我要的
: 东西。在显微镜下找得头昏眼花，没结果，给老板打个招呼正准备放弃呢，扔细胞培养
: 皿的那一瞬间，突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下，一个克隆就在培养皿的最边
: 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。
: 这一年来，又是衣原体污染（实验室的host cell line本身就污染了！），又是克隆不
: 纯，搞得好头疼。最后稿子送出去了，作science这边的reviewer对突变子有兴趣，对
: 方法没兴趣，意见一堆；作方法的reviewer对突变子本身没兴趣，对方法上所有改进作
C*Y
97 楼
老板太抠了，不是应该他给你开一瓶酒庆祝吗？
D*a
98 楼
恭喜恭喜，中秋快乐啊！
s*y
99 楼
恭喜兄弟，能把博士后做到退休了。
不过要是早点就好了，现在拿着这个文章也换不成更多工钱也换不成tenure的职位，似
乎有点来的太晚。
【在 m*********D 的大作中提到】
: 呵呵，今天收到通知，送Nature子刊的文章终于接受了。
: 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作，到我说服他就好
: 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验，能想到的可能
: 改进成功率的方式都加进去了。几个月后，终于作完了第一轮，还差点就没拿到我要的
: 东西。在显微镜下找得头昏眼花，没结果，给老板打个招呼正准备放弃呢，扔细胞培养
: 皿的那一瞬间，突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下，一个克隆就在培养皿的最边
: 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。
: 这一年来，又是衣原体污染（实验室的host cell line本身就污染了！），又是克隆不
: 纯，搞得好头疼。最后稿子送出去了，作science这边的reviewer对突变子有兴趣，对
: 方法没兴趣，意见一堆；作方法的reviewer对突变子本身没兴趣，对方法上所有改进作
不过要是早点就好了，现在拿着这个文章也换不成更多工钱也换不成tenure的职位，似
乎有点来的太晚。
【在 m*********D 的大作中提到】
: 呵呵，今天收到通知，送Nature子刊的文章终于接受了。
: 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作，到我说服他就好
: 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验，能想到的可能
: 改进成功率的方式都加进去了。几个月后，终于作完了第一轮，还差点就没拿到我要的
: 东西。在显微镜下找得头昏眼花，没结果，给老板打个招呼正准备放弃呢，扔细胞培养
: 皿的那一瞬间，突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下，一个克隆就在培养皿的最边
: 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。
: 这一年来，又是衣原体污染（实验室的host cell line本身就污染了！），又是克隆不
: 纯，搞得好头疼。最后稿子送出去了，作science这边的reviewer对突变子有兴趣，对
: 方法没兴趣，意见一堆；作方法的reviewer对突变子本身没兴趣，对方法上所有改进作
m*D
100 楼
多谢多谢上面各位！昨晚回家忙儿子的事，没喝酒。今晚可以开一瓶。太太昨晚把我春
天钓的crappie拿出来了，准备今晚清蒸和作辣椒鱼。我还有上礼拜老同学女儿送的白
葡萄酒，正好喝一杯。
回CRESTY：记住你今天的话。等你当了老板别忘了。我们的规矩是组会的时候庆祝一下
，老板给实验室买吃的。下礼拜他会的。他知道我喝咖啡，经常想起来了在他买茶叶的
时候就给我买点bean回来。我自己有grinder，随时可以煮。小气他还真不是。
回snowyday:这么一篇距拿教授位置早着呢，就是20年前也没戏。从没这么指望过。能
保证五年的工作，我就满足了。所以，还得搞个grant才行。说实话，到我这个年龄，
如何少操心又有工作才是最实惠的。你转行后新工作顺利？祝平安！
天钓的crappie拿出来了，准备今晚清蒸和作辣椒鱼。我还有上礼拜老同学女儿送的白
葡萄酒，正好喝一杯。
回CRESTY：记住你今天的话。等你当了老板别忘了。我们的规矩是组会的时候庆祝一下
，老板给实验室买吃的。下礼拜他会的。他知道我喝咖啡，经常想起来了在他买茶叶的
时候就给我买点bean回来。我自己有grinder，随时可以煮。小气他还真不是。
回snowyday:这么一篇距拿教授位置早着呢，就是20年前也没戏。从没这么指望过。能
保证五年的工作，我就满足了。所以，还得搞个grant才行。说实话，到我这个年龄，
如何少操心又有工作才是最实惠的。你转行后新工作顺利？祝平安！
s*y
101 楼
你要求真低，看得开，反正孩子也上大学了，无所谓了，估计很多千老就没那么容易了
。我还行，拿了几个面试，先试试水。博士后是不做了，不过工钱还领俩月。
【在 m*********D 的大作中提到】
: 多谢多谢上面各位！昨晚回家忙儿子的事，没喝酒。今晚可以开一瓶。太太昨晚把我春
: 天钓的crappie拿出来了，准备今晚清蒸和作辣椒鱼。我还有上礼拜老同学女儿送的白
: 葡萄酒，正好喝一杯。
: 回CRESTY：记住你今天的话。等你当了老板别忘了。我们的规矩是组会的时候庆祝一下
: ，老板给实验室买吃的。下礼拜他会的。他知道我喝咖啡，经常想起来了在他买茶叶的
: 时候就给我买点bean回来。我自己有grinder，随时可以煮。小气他还真不是。
: 回snowyday:这么一篇距拿教授位置早着呢，就是20年前也没戏。从没这么指望过。能
: 保证五年的工作，我就满足了。所以，还得搞个grant才行。说实话，到我这个年龄，
: 如何少操心又有工作才是最实惠的。你转行后新工作顺利？祝平安！
。我还行，拿了几个面试，先试试水。博士后是不做了，不过工钱还领俩月。
【在 m*********D 的大作中提到】
: 多谢多谢上面各位！昨晚回家忙儿子的事，没喝酒。今晚可以开一瓶。太太昨晚把我春
: 天钓的crappie拿出来了，准备今晚清蒸和作辣椒鱼。我还有上礼拜老同学女儿送的白
: 葡萄酒，正好喝一杯。
: 回CRESTY：记住你今天的话。等你当了老板别忘了。我们的规矩是组会的时候庆祝一下
: ，老板给实验室买吃的。下礼拜他会的。他知道我喝咖啡，经常想起来了在他买茶叶的
: 时候就给我买点bean回来。我自己有grinder，随时可以煮。小气他还真不是。
: 回snowyday:这么一篇距拿教授位置早着呢，就是20年前也没戏。从没这么指望过。能
: 保证五年的工作，我就满足了。所以，还得搞个grant才行。说实话，到我这个年龄，
: 如何少操心又有工作才是最实惠的。你转行后新工作顺利？祝平安！
i*0
102 楼
恭喜！坐等大作！
O*e
103 楼
其实这行，如果博士后1/3可以独立当PI，1/3转title接着干，1/3转行，那就差不多
正常了。
【在 s******y 的大作中提到】
: 你要求真低，看得开，反正孩子也上大学了，无所谓了，估计很多千老就没那么容易了
: 。我还行，拿了几个面试，先试试水。博士后是不做了，不过工钱还领俩月。
正常了。
【在 s******y 的大作中提到】
: 你要求真低，看得开，反正孩子也上大学了，无所谓了，估计很多千老就没那么容易了
: 。我还行，拿了几个面试，先试试水。博士后是不做了，不过工钱还领俩月。
t*g
104 楼
恭喜恭喜。
r*n
105 楼
congrats
【在 m*********D 的大作中提到】
: 呵呵，今天收到通知，送Nature子刊的文章终于接受了。
: 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作，到我说服他就好
: 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验，能想到的可能
: 改进成功率的方式都加进去了。几个月后，终于作完了第一轮，还差点就没拿到我要的
: 东西。在显微镜下找得头昏眼花，没结果，给老板打个招呼正准备放弃呢，扔细胞培养
: 皿的那一瞬间，突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下，一个克隆就在培养皿的最边
: 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。
: 这一年来，又是衣原体污染（实验室的host cell line本身就污染了！），又是克隆不
: 纯，搞得好头疼。最后稿子送出去了，作science这边的reviewer对突变子有兴趣，对
: 方法没兴趣，意见一堆；作方法的reviewer对突变子本身没兴趣，对方法上所有改进作
【在 m*********D 的大作中提到】
: 呵呵，今天收到通知，送Nature子刊的文章终于接受了。
: 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作，到我说服他就好
: 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验，能想到的可能
: 改进成功率的方式都加进去了。几个月后，终于作完了第一轮，还差点就没拿到我要的
: 东西。在显微镜下找得头昏眼花，没结果，给老板打个招呼正准备放弃呢，扔细胞培养
: 皿的那一瞬间，突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下，一个克隆就在培养皿的最边
: 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。
: 这一年来，又是衣原体污染（实验室的host cell line本身就污染了！），又是克隆不
: 纯，搞得好头疼。最后稿子送出去了，作science这边的reviewer对突变子有兴趣，对
: 方法没兴趣，意见一堆；作方法的reviewer对突变子本身没兴趣，对方法上所有改进作
s*1
106 楼
每次看见你的帖子内容，都很畅心，congratulations!
【在 m*********D 的大作中提到】
: 呵呵，今天收到通知，送Nature子刊的文章终于接受了。
: 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作，到我说服他就好
: 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验，能想到的可能
: 改进成功率的方式都加进去了。几个月后，终于作完了第一轮，还差点就没拿到我要的
: 东西。在显微镜下找得头昏眼花，没结果，给老板打个招呼正准备放弃呢，扔细胞培养
: 皿的那一瞬间，突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下，一个克隆就在培养皿的最边
: 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。
: 这一年来，又是衣原体污染（实验室的host cell line本身就污染了！），又是克隆不
: 纯，搞得好头疼。最后稿子送出去了，作science这边的reviewer对突变子有兴趣，对
: 方法没兴趣，意见一堆；作方法的reviewer对突变子本身没兴趣，对方法上所有改进作
【在 m*********D 的大作中提到】
: 呵呵，今天收到通知，送Nature子刊的文章终于接受了。
: 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作，到我说服他就好
: 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验，能想到的可能
: 改进成功率的方式都加进去了。几个月后，终于作完了第一轮，还差点就没拿到我要的
: 东西。在显微镜下找得头昏眼花，没结果，给老板打个招呼正准备放弃呢，扔细胞培养
: 皿的那一瞬间，突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下，一个克隆就在培养皿的最边
: 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。
: 这一年来，又是衣原体污染（实验室的host cell line本身就污染了！），又是克隆不
: 纯，搞得好头疼。最后稿子送出去了，作science这边的reviewer对突变子有兴趣，对
: 方法没兴趣，意见一堆；作方法的reviewer对突变子本身没兴趣，对方法上所有改进作
c*j
107 楼
Congrats锛
e*6
108 楼
楼主这种应该给个永久职位养起来，一个老板养不起就让其他老板养。出idea的人毕竟
是少数，还是要有很多人能扎扎实实执行操作
【在 m*********D 的大作中提到】
: 呵呵，今天收到通知，送Nature子刊的文章终于接受了。
: 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作，到我说服他就好
: 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验，能想到的可能
: 改进成功率的方式都加进去了。几个月后，终于作完了第一轮，还差点就没拿到我要的
: 东西。在显微镜下找得头昏眼花，没结果，给老板打个招呼正准备放弃呢，扔细胞培养
: 皿的那一瞬间，突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下，一个克隆就在培养皿的最边
: 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。
: 这一年来，又是衣原体污染（实验室的host cell line本身就污染了！），又是克隆不
: 纯，搞得好头疼。最后稿子送出去了，作science这边的reviewer对突变子有兴趣，对
: 方法没兴趣，意见一堆；作方法的reviewer对突变子本身没兴趣，对方法上所有改进作
是少数，还是要有很多人能扎扎实实执行操作
【在 m*********D 的大作中提到】
: 呵呵，今天收到通知，送Nature子刊的文章终于接受了。
: 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作，到我说服他就好
: 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验，能想到的可能
: 改进成功率的方式都加进去了。几个月后，终于作完了第一轮，还差点就没拿到我要的
: 东西。在显微镜下找得头昏眼花，没结果，给老板打个招呼正准备放弃呢，扔细胞培养
: 皿的那一瞬间，突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下，一个克隆就在培养皿的最边
: 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。
: 这一年来，又是衣原体污染（实验室的host cell line本身就污染了！），又是克隆不
: 纯，搞得好头疼。最后稿子送出去了，作science这边的reviewer对突变子有兴趣，对
: 方法没兴趣，意见一堆；作方法的reviewer对突变子本身没兴趣，对方法上所有改进作
m*D
109 楼
谢各位！
回snowyday：呵呵，老了，就找个easy点的工作。多点精力把家里把生活搞好点。做教
授到了我这个年龄就没必要拼了，机会留给你们年轻人。钓钓鱼种种菜蛮好。好多我的
idea都让学生做，然后我教他们怎么做。这样我工作的压力小很多，她们也高兴。
回Ericzhang：呵呵，哪能那么高要求呢。这世界少了谁都没关系，地球照转。idea多
，也不一定都work。我现在教的一个学生就是拿了我的idea在做。我警告过她，成功的
概率比我的要小很多，还有其他因素可能做不出来。。。。她要赌一把，下礼拜会有结
果。她说她只要一个克隆啊。。。。要出来，应该可有搞过nature子刊。那是一个大计
划，把计算机model ing，crispr，protein structure 等等连到一起，很多还需要别
人合作。所以，年轻人都比较有闯劲。
回snowyday：呵呵，老了，就找个easy点的工作。多点精力把家里把生活搞好点。做教
授到了我这个年龄就没必要拼了，机会留给你们年轻人。钓钓鱼种种菜蛮好。好多我的
idea都让学生做，然后我教他们怎么做。这样我工作的压力小很多，她们也高兴。
回Ericzhang：呵呵，哪能那么高要求呢。这世界少了谁都没关系，地球照转。idea多
，也不一定都work。我现在教的一个学生就是拿了我的idea在做。我警告过她，成功的
概率比我的要小很多，还有其他因素可能做不出来。。。。她要赌一把，下礼拜会有结
果。她说她只要一个克隆啊。。。。要出来，应该可有搞过nature子刊。那是一个大计
划，把计算机model ing，crispr，protein structure 等等连到一起，很多还需要别
人合作。所以，年轻人都比较有闯劲。
h*o
110 楼
恭喜
虽然现在不做research了，但是得知文章被接收时的感觉还是很好的。
虽然现在不做research了，但是得知文章被接收时的感觉还是很好的。
s*g
111 楼
尽管不常来这里，可是看到你的收获，真心替你高兴啊！！！！
谁说千年老伯（博）没有建树？这就是活榜样！干自己喜欢的事情，让别人说去吧！
恭喜！
【在 m*********D 的大作中提到】
: 呵呵，今天收到通知，送Nature子刊的文章终于接受了。
: 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作，到我说服他就好
: 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验，能想到的可能
: 改进成功率的方式都加进去了。几个月后，终于作完了第一轮，还差点就没拿到我要的
: 东西。在显微镜下找得头昏眼花，没结果，给老板打个招呼正准备放弃呢，扔细胞培养
: 皿的那一瞬间，突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下，一个克隆就在培养皿的最边
: 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。
: 这一年来，又是衣原体污染（实验室的host cell line本身就污染了！），又是克隆不
: 纯，搞得好头疼。最后稿子送出去了，作science这边的reviewer对突变子有兴趣，对
: 方法没兴趣，意见一堆；作方法的reviewer对突变子本身没兴趣，对方法上所有改进作
谁说千年老伯（博）没有建树？这就是活榜样！干自己喜欢的事情，让别人说去吧！
恭喜！
【在 m*********D 的大作中提到】
: 呵呵，今天收到通知，送Nature子刊的文章终于接受了。
: 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作，到我说服他就好
: 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验，能想到的可能
: 改进成功率的方式都加进去了。几个月后，终于作完了第一轮，还差点就没拿到我要的
: 东西。在显微镜下找得头昏眼花，没结果，给老板打个招呼正准备放弃呢，扔细胞培养
: 皿的那一瞬间，突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下，一个克隆就在培养皿的最边
: 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。
: 这一年来，又是衣原体污染（实验室的host cell line本身就污染了！），又是克隆不
: 纯，搞得好头疼。最后稿子送出去了，作science这边的reviewer对突变子有兴趣，对
: 方法没兴趣，意见一堆；作方法的reviewer对突变子本身没兴趣，对方法上所有改进作
s*g
112 楼
最近我的细胞也是有mycoplasma， 用试剂处理后没有了，但是transfected shRNA不工
作了。很头疼。估计要重新转染了。不过我的细胞非常不好转。。。
【在 m*********D 的大作中提到】
: 哈哈，你可能是对的。我也不记得中文了-mycoplasma，就是支原体吧。：（。
: 多谢！
作了。很头疼。估计要重新转染了。不过我的细胞非常不好转。。。
【在 m*********D 的大作中提到】
: 哈哈，你可能是对的。我也不记得中文了-mycoplasma，就是支原体吧。：（。
: 多谢！
s*g
113 楼
看到你的成功，我自己也回想一下，真得像你学习。热爱科研，就要把它做好。
当然自己也要给自己谋些财务保证不饿肚子哈。
每次你的发文，都是正能量！
当然自己也要给自己谋些财务保证不饿肚子哈。
每次你的发文，都是正能量！
h*e
114 楼
恭喜。很少发言，这次要冒个泡
t*g
115 楼
知足常乐，心态好就行。
【在 s******y 的大作中提到】
: 你要求真低，看得开，反正孩子也上大学了，无所谓了，估计很多千老就没那么容易了
: 。我还行，拿了几个面试，先试试水。博士后是不做了，不过工钱还领俩月。
【在 s******y 的大作中提到】
: 你要求真低，看得开，反正孩子也上大学了，无所谓了，估计很多千老就没那么容易了
: 。我还行，拿了几个面试，先试试水。博士后是不做了，不过工钱还领俩月。
c*1
116 楼
恭喜！老板有你这样的干将真幸运！
f*s
117 楼
Congratulations!
【在 m*********D 的大作中提到】
: 呵呵，今天收到通知，送Nature子刊的文章终于接受了。
: 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作，到我说服他就好
: 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验，能想到的可能
: 改进成功率的方式都加进去了。几个月后，终于作完了第一轮，还差点就没拿到我要的
: 东西。在显微镜下找得头昏眼花，没结果，给老板打个招呼正准备放弃呢，扔细胞培养
: 皿的那一瞬间，突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下，一个克隆就在培养皿的最边
: 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。
: 这一年来，又是衣原体污染（实验室的host cell line本身就污染了！），又是克隆不
: 纯，搞得好头疼。最后稿子送出去了，作science这边的reviewer对突变子有兴趣，对
: 方法没兴趣，意见一堆；作方法的reviewer对突变子本身没兴趣，对方法上所有改进作
c*1
118 楼
恭喜！老板有你这样的干将真幸运！
f*s
119 楼
Congratulations!
【在 m*********D 的大作中提到】
: 呵呵，今天收到通知，送Nature子刊的文章终于接受了。
: 这次很不顺。从试验设计开始老板就认为CRISPR/HDR成功率低不让作，到我说服他就好
: 几个月过去了。设计时把我几十年的分子生物学和tissue culture经验，能想到的可能
: 改进成功率的方式都加进去了。几个月后，终于作完了第一轮，还差点就没拿到我要的
: 东西。在显微镜下找得头昏眼花，没结果，给老板打个招呼正准备放弃呢，扔细胞培养
: 皿的那一瞬间，突然想到举起来对着日光灯肉眼看了一下，一个克隆就在培养皿的最边
: 沿--最后证明这个克隆是一个基因的两个copy都按我设计的突变了。。。。
: 这一年来，又是衣原体污染（实验室的host cell line本身就污染了！），又是克隆不
: 纯，搞得好头疼。最后稿子送出去了，作science这边的reviewer对突变子有兴趣，对
: 方法没兴趣，意见一堆；作方法的reviewer对突变子本身没兴趣，对方法上所有改进作
W*T
120 楼
恭喜中西部博后
快有2年没逛坛子了，真心恭喜
快有2年没逛坛子了，真心恭喜
W*T
121 楼
恭喜中西部博后
快有2年没逛坛子了，真心恭喜
快有2年没逛坛子了，真心恭喜
相关阅读
Re: 生物博士转accounting可行吗？ (转载)揭一个坑，LOMA LINDA的CFG,不点名了，珍惜生命，远离这个坑吧中科院vs企业 (转载)恳求神经科学求审稿机会【问】问个Nature Communications投稿的问题？？做人要低调啊请教干细胞的不对称分裂问题上海生命科学院健康科学研究所的孙健老师去哪里？求中科院SCI期刊分区有个薄后的opening北京高校博士后职位 (转载)昆虫细胞中可诱导的启动子为嘛很多老板都做了很多年的博后超级迷茫+不自信，我该找个什么样的工作？找博士后遇到的一个问题RNA的stacking energy是否包括Watson-Crick的氢键的键能生物信息和统计学 发展前景paper needed, thank youpaper help有谁去了？---李克强：博士后制度要更多吸纳企业力量（ZT）