Luciferase assay请教# Biology - 生物学j*b2016-09-20 07:091 楼最近有拿到微软offer(非测试)的人么?我刚和hr随便聊了一些常规问题,一个技术问题都没,我说了我想去kernel组并且不想做测试。过了不到一个小时就收到据信。是我哪里说错了还是他们真的今年developer的职位已经满了?
h*G2016-09-20 07:093 楼小弟不才,被老板要求做luciferase assay测一个promoter的mutation对基因表达的影响。因为以前没有做过,所以向各位有经验的大侠请教,希望不吝赐教。问题1:luciferase assay和GFP相比有什么优势啊?如果直接在promoter后面接一个GFP,直接FACS看GFP的表达不也可以看基因表达的变化,而且还不用任何特别的试剂盒。问题2:看了Thermo fisher网站上的信息,有不同版本的luciferase。比如fireflyluciferase只能表达在细胞内,需要细胞lysate,然后加入luciferin,ATP等才能测发光。 而一些其它的版本,比如Gaussia Luciferase,可以直接分泌到media,这样不用提lysate,可以直接测发光,方便多了,为什么还有很多实验都用的firefly的呢?多谢指教!
s*y2016-09-20 07:095 楼Huh~~~, 目前还没有看到报道的说,是不是微软生气了?上次送还是9月27号的了,微软给送了一个cup cake.这次如果还送的话,估计就是spoon cake 了。【在 g*q 的大作中提到】: 今年骗蛋糕的频率也太高了吧。8个月骗了5次了。
S*e2016-09-20 07:096 楼luciferase优点是1,重复性高(双荧光法做内参)2,灵敏度高3,比较性强4,简单,韩春雨都能做出来的实验缺点是未必真实,但是作为辅助证据还是不错的。【在 h*****G 的大作中提到】: 小弟不才,被老板要求做luciferase assay测一个promoter的mutation对基因表达的影: 响。: 因为以前没有做过,所以向各位有经验的大侠请教,希望不吝赐教。: 问题1:: luciferase assay和GFP相比有什么优势啊?如果直接在promoter后面接一个GFP,直接: FACS看GFP的表达不也可以看基因表达的变化,而且还不用任何特别的试剂盒。: 问题2:: 看了Thermo fisher网站上的信息,有不同版本的luciferase。比如firefly: luciferase只能表达在细胞内,需要细胞lysate,然后加入luciferin,ATP等才能测发: 光。 而一些其它的版本,比如Gaussia Luciferase,可以直接分泌到media,这样不用
l*a2016-09-20 07:097 楼你问清楚人家给哪个组找人,需要什么人了吗?也许人家组就要test呢不过无所谓,你还可以继续投,这个应该不算黑名单【在 j****b 的大作中提到】: 最近有拿到微软offer(非测试)的人么?我刚和hr随便聊了一些常规问题,一个技术: 问题都没,我说了我想去kernel组并且不想做测试。过了不到一个小时就收到据信。是: 我哪里说错了还是他们真的今年developer的职位已经满了?
g*q2016-09-20 07:098 楼2011年11月11日 08:29 新浪科技每次发产品都有蛋糕吃的好日子一去不复返了~新浪科技讯 北京时间11月11日早间消息,火狐8浏览器已经正式发布,但微软此次打破惯例,并未向Mozilla赠送蛋糕表示祝贺。按照微软的惯例,每次Mozilla发布新版本Firefox浏览器后,微软就会赠送一个纸托蛋糕。但是在火狐8发布后,微软并没有再赠送蛋糕。微软发言人称:“自从我们认为Mozilla的浏览器版本更新开始过于频繁后,就不再赠送蛋糕。每6周一次更新,那得多少蛋糕啊。”微软在今年3月份火狐4发布时向Mozilla赠送了一个大蛋糕表示祝贺,但是随着火狐版本更新速度的加快,微软赠送的蛋糕也越来越小,直到火狐8不再赠送。(晓明)
w*z2016-09-20 07:099 楼你的简历写的怎样?如果不够牛,人家觉得你不够qualify进kernel,你还非Kernel不去,当然可以据你了【在 j****b 的大作中提到】: 最近有拿到微软offer(非测试)的人么?我刚和hr随便聊了一些常规问题,一个技术: 问题都没,我说了我想去kernel组并且不想做测试。过了不到一个小时就收到据信。是: 我哪里说错了还是他们真的今年developer的职位已经满了?
o*12016-09-20 07:0912 楼微软是全求市值排名第三的科技公司,,还在乎几个蛋糕?推抠了。。【在 g*q 的大作中提到】: 2011年11月11日 08:29 新浪科技: 每次发产品都有蛋糕吃的好日子一去不复返了~: 新浪科技讯 北京时间11月11日早间消息,火狐8浏览器已经正式发布,但微软此次: 打破惯例,并未向Mozilla赠送蛋糕表示祝贺。: 按照微软的惯例,每次Mozilla发布新版本Firefox浏览器后,微软就会赠送一个纸: 托蛋糕。但是在火狐8发布后,微软并没有再赠送蛋糕。: 微软发言人称:“自从我们认为Mozilla的浏览器版本更新开始过于频繁后,就不: 再赠送蛋糕。每6周一次更新,那得多少蛋糕啊。”: 微软在今年3月份火狐4发布时向Mozilla赠送了一个大蛋糕表示祝贺,但是随着火: 狐版本更新速度的加快,微软赠送的蛋糕也越来越小,直到火狐8不再赠送。(晓明)
j*b2016-09-20 07:0913 楼如果是简历不行,他们为什么要面我呢?我现在觉得是自己没把意思表达清楚。她问我对什么感兴趣我就直接回答kernel组,没有想太多。最不该说的就是不想做tester。大家吸取我的教训吧
P*c2016-09-20 07:0914 楼可能只是你说的这个组不招吧。知道他们live组招人。【在 j****b 的大作中提到】: 最近有拿到微软offer(非测试)的人么?我刚和hr随便聊了一些常规问题,一个技术: 问题都没,我说了我想去kernel组并且不想做测试。过了不到一个小时就收到据信。是: 我哪里说错了还是他们真的今年developer的职位已经满了?