为何我的CRISPRi总是不工作?# Biology - 生物学
s*1
1 楼
载体是Add gene: pHR-SFFV-KRAB-dCas9-P2A-mCherry, sgRNA设计按照Lei S Qi的
Nature protocol(2013)在-50至+100区间用Optimized CRISPR Design网站设计sgRNA,
选择评分高的7个sgRNA,连到sgRNA载体上,最后检测puro筛选的稳定细胞株,Q-PCR和
WB显示蛋白表达没有变化....哪位同行用过CRISPRi系统,能否给一些意见...
Nature protocol(2013)在-50至+100区间用Optimized CRISPR Design网站设计sgRNA,
选择评分高的7个sgRNA,连到sgRNA载体上,最后检测puro筛选的稳定细胞株,Q-PCR和
WB显示蛋白表达没有变化....哪位同行用过CRISPRi系统,能否给一些意见...