急求！如何提高peptide mapping 的coverage# Chemistry - 化学
d*y
1 楼
报税时amazon收的15%费用还有amazon上做广告的费用是填在cost of goods，还是填在
business expenses?
business expenses?
a*n
2 楼
有EAD，公司的SUPPORT LETTER和OFFER LETTER。
公司要我回去工作2到3个月。
这样签证容易吗？
非常感谢。
公司要我回去工作2到3个月。
这样签证容易吗？
非常感谢。
m*t
3 楼
房子旁边有一块地方，夹在两个房子间，种过bermuda和fescue，都死光光了，太阴凉
了，zoysia 和 st Augustine 好像没那么喜阳，哪种更合适些，这两种草从图上来看
长的好像差不多，谢谢。
了，zoysia 和 st Augustine 好像没那么喜阳，哪种更合适些，这两种草从图上来看
长的好像差不多，谢谢。
w*r
4 楼
以后欢迎来如烟灌哈。。这里大小姑婆都罩你
c*t
5 楼
我刚买的散件，组装后，通电。所有的风扇都转（CPU，case，video card 等）
但是屏幕上什么都没有显示（LCD 说是 no signal）
motherboard (ASRock X58 Extreme) 的 onboard LED 的 status 是 00，
也就是说 POST 没问题。已经到了执行 OS 的一步了。
Video card 是 ASUS ENTX260 ，有两个 DVI out，都试过，都是没 signal。
有什么地方可能出问题？如何测试？到哪测试？
多谢。
但是屏幕上什么都没有显示（LCD 说是 no signal）
motherboard (ASRock X58 Extreme) 的 onboard LED 的 status 是 00，
也就是说 POST 没问题。已经到了执行 OS 的一步了。
Video card 是 ASUS ENTX260 ，有两个 DVI out，都试过，都是没 signal。
有什么地方可能出问题？如何测试？到哪测试？
多谢。
s*d
6 楼
小弟最近在做个实验， 希望能有尽量高的peptide mapping coverage， 但是有几个
peptide做了几遍都看不见， 有什么方法或者调什么parameter可以把它搞出来啊？
我用的是trypsin digestion， dionex 3000+ LTQ
希望大家帮帮忙啊 多谢！！
update: 是个recombinant peptide (117 amino acids)
peptide做了几遍都看不见， 有什么方法或者调什么parameter可以把它搞出来啊？
我用的是trypsin digestion， dionex 3000+ LTQ
希望大家帮帮忙啊 多谢！！
update: 是个recombinant peptide (117 amino acids)
a*g
7 楼
那个 fee算 commission 好了
广告费，有单独的 business expense类型
【在 d*y 的大作中提到】
: 报税时amazon收的15%费用还有amazon上做广告的费用是填在cost of goods，还是填在
: business expenses?
广告费，有单独的 business expense类型
【在 d*y 的大作中提到】
: 报税时amazon收的15%费用还有amazon上做广告的费用是填在cost of goods，还是填在
: business expenses?
m*y
8 楼
Wow, sounds like a cold pocket, ideal for cold-season grass. Fescue,
bluegrass, ryegrass and the kind.
bluegrass, ryegrass and the kind.
p*e
9 楼
支持！
【在 w****r 的大作中提到】
: 以后欢迎来如烟灌哈。。这里大小姑婆都罩你
【在 w****r 的大作中提到】
: 以后欢迎来如烟灌哈。。这里大小姑婆都罩你
z*i
10 楼
检查排线 要仔细
我前几天第一次装机 新手 第一次装了5 6个小时 看着说明书
装好后一点问题没有
然后又拆了 又装了一遍 速度很快 半个小时
仔细检查排线
【在 c*****t 的大作中提到】
: 我刚买的散件，组装后，通电。所有的风扇都转（CPU，case，video card 等）
: 但是屏幕上什么都没有显示（LCD 说是 no signal）
: motherboard (ASRock X58 Extreme) 的 onboard LED 的 status 是 00，
: 也就是说 POST 没问题。已经到了执行 OS 的一步了。
: Video card 是 ASUS ENTX260 ，有两个 DVI out，都试过，都是没 signal。
: 有什么地方可能出问题？如何测试？到哪测试？
: 多谢。
我前几天第一次装机 新手 第一次装了5 6个小时 看着说明书
装好后一点问题没有
然后又拆了 又装了一遍 速度很快 半个小时
仔细检查排线
【在 c*****t 的大作中提到】
: 我刚买的散件，组装后，通电。所有的风扇都转（CPU，case，video card 等）
: 但是屏幕上什么都没有显示（LCD 说是 no signal）
: motherboard (ASRock X58 Extreme) 的 onboard LED 的 status 是 00，
: 也就是说 POST 没问题。已经到了执行 OS 的一步了。
: Video card 是 ASUS ENTX260 ，有两个 DVI out，都试过，都是没 signal。
: 有什么地方可能出问题？如何测试？到哪测试？
: 多谢。
b*g
11 楼
有些出不来的就是出不来，
可以试试，浓缩一下样品，试试 nano spary 等其他能提高灵敏度的方法
另外可以换个酶试试
可以试试，浓缩一下样品，试试 nano spary 等其他能提高灵敏度的方法
另外可以换个酶试试
d*y
12 楼
谢谢。
m*t
13 楼
Ryegrass现在死翘翘了，Fescue种过，从来没长好过，最后也完了。补充一下，我在GA，后院的zoysia长得很好，前面的是bermuda也没问题，就是旁边这块，一直青黄不接，有时候想想，实在不行，铺水泥。
【在 m***y 的大作中提到】
: Wow, sounds like a cold pocket, ideal for cold-season grass. Fescue,
: bluegrass, ryegrass and the kind.
【在 m***y 的大作中提到】
: Wow, sounds like a cold pocket, ideal for cold-season grass. Fescue,
: bluegrass, ryegrass and the kind.
L*t
14 楼
鸭蛋和小布熊，还在蜜月里呢。赫赫。比较忙。
【在 p******e 的大作中提到】
: 支持！
【在 p******e 的大作中提到】
: 支持！
t*g
15 楼
硬盘灯亮不？
【在 c*****t 的大作中提到】
: 我刚买的散件，组装后，通电。所有的风扇都转（CPU，case，video card 等）
: 但是屏幕上什么都没有显示（LCD 说是 no signal）
: motherboard (ASRock X58 Extreme) 的 onboard LED 的 status 是 00，
: 也就是说 POST 没问题。已经到了执行 OS 的一步了。
: Video card 是 ASUS ENTX260 ，有两个 DVI out，都试过，都是没 signal。
: 有什么地方可能出问题？如何测试？到哪测试？
: 多谢。
【在 c*****t 的大作中提到】
: 我刚买的散件，组装后，通电。所有的风扇都转（CPU，case，video card 等）
: 但是屏幕上什么都没有显示（LCD 说是 no signal）
: motherboard (ASRock X58 Extreme) 的 onboard LED 的 status 是 00，
: 也就是说 POST 没问题。已经到了执行 OS 的一步了。
: Video card 是 ASUS ENTX260 ，有两个 DVI out，都试过，都是没 signal。
: 有什么地方可能出问题？如何测试？到哪测试？
: 多谢。
s*d
16 楼
谢谢！ 我用的就是nano spray
浓缩样品有用么？ 不是sample先聚集在loading pump 然后再转到micro pump么？？
多谢！
【在 b*******g 的大作中提到】
: 有些出不来的就是出不来，
: 可以试试，浓缩一下样品，试试 nano spary 等其他能提高灵敏度的方法
: 另外可以换个酶试试
p*e
18 楼
你怎么知道鸭蛋老婆的名字，呵呵。。。
【在 L******t 的大作中提到】
: 鸭蛋和小布熊，还在蜜月里呢。赫赫。比较忙。
【在 L******t 的大作中提到】
: 鸭蛋和小布熊，还在蜜月里呢。赫赫。比较忙。
z*i
19 楼
难道硬盘没插电？ 哈哈
【在 t****g 的大作中提到】
: 硬盘灯亮不？
【在 t****g 的大作中提到】
: 硬盘灯亮不？
b*g
20 楼
浓缩应该用处不大。。。
主要是你要的那段 sequence 可能由于某种原因就是 酶切不到，或者容易丢失
所以可以试试其他的酶
【在 s*****d 的大作中提到】
:
: 谢谢！ 我用的就是nano spray
: 浓缩样品有用么？ 不是sample先聚集在loading pump 然后再转到micro pump么？？
: 多谢！
主要是你要的那段 sequence 可能由于某种原因就是 酶切不到，或者容易丢失
所以可以试试其他的酶
【在 s*****d 的大作中提到】
:
: 谢谢！ 我用的就是nano spray
: 浓缩样品有用么？ 不是sample先聚集在loading pump 然后再转到micro pump么？？
: 多谢！
m*t
21 楼
这网站提供两种选择，tall fescue 和 Zoysiagrass。 以前试过fescue，无疾而终，
看来zoysia是第二选择。谢谢。
【在 l*****o 的大作中提到】
: https://www.seedsuperstore.com/ordering/seed_express.asp
看来zoysia是第二选择。谢谢。
【在 l*****o 的大作中提到】
: https://www.seedsuperstore.com/ordering/seed_express.asp
c*r
22 楼
热
【在 w****r 的大作中提到】
: 以后欢迎来如烟灌哈。。这里大小姑婆都罩你
【在 w****r 的大作中提到】
: 以后欢迎来如烟灌哈。。这里大小姑婆都罩你
c*t
23 楼
这是我的第 4-5 次 DIY 了吧。
硬盘，光盘似乎都工作正常（HD LED 工作，光盘打开关闭都正常）。
唯一不正常的就是没有 video signal 。。。
【在 z*i 的大作中提到】
: 检查排线 要仔细
: 我前几天第一次装机 新手 第一次装了5 6个小时 看着说明书
: 装好后一点问题没有
: 然后又拆了 又装了一遍 速度很快 半个小时
: 仔细检查排线
硬盘，光盘似乎都工作正常（HD LED 工作，光盘打开关闭都正常）。
唯一不正常的就是没有 video signal 。。。
【在 z*i 的大作中提到】
: 检查排线 要仔细
: 我前几天第一次装机 新手 第一次装了5 6个小时 看着说明书
: 装好后一点问题没有
: 然后又拆了 又装了一遍 速度很快 半个小时
: 仔细检查排线
s*d
24 楼
多谢， 我回头就找找lab还有没有其他的酶
【在 b*******g 的大作中提到】
: 浓缩应该用处不大。。。
: 主要是你要的那段 sequence 可能由于某种原因就是 酶切不到，或者容易丢失
: 所以可以试试其他的酶
e*f
25 楼
shadow turf plugs
c*k
26 楼
同求
【在 w****r 的大作中提到】
: 以后欢迎来如烟灌哈。。这里大小姑婆都罩你
【在 w****r 的大作中提到】
: 以后欢迎来如烟灌哈。。这里大小姑婆都罩你
z*i
27 楼
有板载显卡没？ 显示器接主板 接独显试试
【在 c*****t 的大作中提到】
: 这是我的第 4-5 次 DIY 了吧。
: 硬盘，光盘似乎都工作正常（HD LED 工作，光盘打开关闭都正常）。
: 唯一不正常的就是没有 video signal 。。。
【在 c*****t 的大作中提到】
: 这是我的第 4-5 次 DIY 了吧。
: 硬盘，光盘似乎都工作正常（HD LED 工作，光盘打开关闭都正常）。
: 唯一不正常的就是没有 video signal 。。。
b*u
28 楼
你把条件具体些 不然大家怎么帮你
蛋白多大， 是单蛋白还是混合物
Do you observe good LC peaks, good MS2 spectra?
1) 楼上 说的 换protease, you can try Glu-C
2) in ur search engine (e.g MASCOT) include methionine oxidation,and N, Q
deamidation, (or 1 C13)
one mis-cleavage. After the first search, select all query and re-search
with error tolerant search. BTW, make sure your search settings are
compliance to the LTQ characteristics.
3) the most comprehensive way,(may be overkill for your purpose) you can use
MUDPIT setup and do a short double digestion of your proteins.
【在 s*****d 的大作中提到】
: 小弟最近在做个实验， 希望能有尽量高的peptide mapping coverage， 但是有几个
: peptide做了几遍都看不见， 有什么方法或者调什么parameter可以把它搞出来啊？
: 我用的是trypsin digestion， dionex 3000+ LTQ
: 希望大家帮帮忙啊 多谢！！
: update: 是个recombinant peptide (117 amino acids)
蛋白多大， 是单蛋白还是混合物
Do you observe good LC peaks, good MS2 spectra?
1) 楼上 说的 换protease, you can try Glu-C
2) in ur search engine (e.g MASCOT) include methionine oxidation,and N, Q
deamidation, (or 1 C13)
one mis-cleavage. After the first search, select all query and re-search
with error tolerant search. BTW, make sure your search settings are
compliance to the LTQ characteristics.
3) the most comprehensive way,(may be overkill for your purpose) you can use
MUDPIT setup and do a short double digestion of your proteins.
【在 s*****d 的大作中提到】
: 小弟最近在做个实验， 希望能有尽量高的peptide mapping coverage， 但是有几个
: peptide做了几遍都看不见， 有什么方法或者调什么parameter可以把它搞出来啊？
: 我用的是trypsin digestion， dionex 3000+ LTQ
: 希望大家帮帮忙啊 多谢！！
: update: 是个recombinant peptide (117 amino acids)
L*t
29 楼
你太嫩啊。那时候鸭蛋的ld来这里灌水的。赫赫。头像是一只小布熊。
【在 p******e 的大作中提到】
: 你怎么知道鸭蛋老婆的名字，呵呵。。。
【在 p******e 的大作中提到】
: 你怎么知道鸭蛋老婆的名字，呵呵。。。
t*t
30 楼
没硬盘。机器也能点亮的。
【在 z*i 的大作中提到】
: 难道硬盘没插电？ 哈哈
【在 z*i 的大作中提到】
: 难道硬盘没插电？ 哈哈
s*d
31 楼
use
xiexie, i can see good LC peaks and good MS2 data.
I can not use Glu-C since there are specific peptide I want to use will be
cut by Glu-C.
I will try to include those modifications and search again!
Thanks
【在 b****u 的大作中提到】
: 你把条件具体些 不然大家怎么帮你
: 蛋白多大， 是单蛋白还是混合物
: Do you observe good LC peaks, good MS2 spectra?
: 1) 楼上 说的 换protease, you can try Glu-C
: 2) in ur search engine (e.g MASCOT) include methionine oxidation,and N, Q
: deamidation, (or 1 C13)
: one mis-cleavage. After the first search, select all query and re-search
: with error tolerant search. BTW, make sure your search settings are
: compliance to the LTQ characteristics.
: 3) the most comprehensive way,(may be overkill for your purpose) you can use
p*e
32 楼
求啥？？求被罩，没问题，你来，我罩你。。。。。
【在 c***k 的大作中提到】
: 同求
【在 c***k 的大作中提到】
: 同求
t*t
33 楼
显示器，是不是有输入选择？
【在 c*****t 的大作中提到】
: 这是我的第 4-5 次 DIY 了吧。
: 硬盘，光盘似乎都工作正常（HD LED 工作，光盘打开关闭都正常）。
: 唯一不正常的就是没有 video signal 。。。
【在 c*****t 的大作中提到】
: 这是我的第 4-5 次 DIY 了吧。
: 硬盘，光盘似乎都工作正常（HD LED 工作，光盘打开关闭都正常）。
: 唯一不正常的就是没有 video signal 。。。
f*e
34 楼
in addition, try to increase the gradient time and use smaller particle size
column
also can u do selected ion monitoring if you know the peptide you are
looking for?
【在 s*****d 的大作中提到】
:
: use
: xiexie, i can see good LC peaks and good MS2 data.
: I can not use Glu-C since there are specific peptide I want to use will be
: cut by Glu-C.
: I will try to include those modifications and search again!
: Thanks
column
also can u do selected ion monitoring if you know the peptide you are
looking for?
【在 s*****d 的大作中提到】
:
: use
: xiexie, i can see good LC peaks and good MS2 data.
: I can not use Glu-C since there are specific peptide I want to use will be
: cut by Glu-C.
: I will try to include those modifications and search again!
: Thanks
l*o
35 楼
为啥是被罩不是床单？
【在 p******e 的大作中提到】
: 求啥？？求被罩，没问题，你来，我罩你。。。。。
【在 p******e 的大作中提到】
: 求啥？？求被罩，没问题，你来，我罩你。。。。。
d*n
36 楼
一般只要检查cpu电源，显卡电源，显示器电源就好了。
p*e
37 楼
因为被罩是双层的，可以像个布口袋一样把人装进去，在某种意义上来说，比锅盖还要
安全。。。
床单是单层的，呵呵。。。
【在 l*****o 的大作中提到】
: 为啥是被罩不是床单？
安全。。。
床单是单层的，呵呵。。。
【在 l*****o 的大作中提到】
: 为啥是被罩不是床单？
F*7
38 楼
先用analog接口试试，我前不久装机，显卡asus 3450， dell u2410，一上来用dvi就
不亮，换analog就可以，装完系统再换dvi就可以了
不亮，换analog就可以，装完系统再换dvi就可以了
l*o
39 楼
很显然，你说的双层被罩是我说的床单加被罩的意思。。。
【在 p******e 的大作中提到】
: 因为被罩是双层的，可以像个布口袋一样把人装进去，在某种意义上来说，比锅盖还要
: 安全。。。
: 床单是单层的，呵呵。。。
【在 p******e 的大作中提到】
: 因为被罩是双层的，可以像个布口袋一样把人装进去，在某种意义上来说，比锅盖还要
: 安全。。。
: 床单是单层的，呵呵。。。
s*d
40 楼
试试显示器analog和dvi转换键。
p*e
41 楼
呵呵，更安全，更安心。。。
【在 l*****o 的大作中提到】
: 很显然，你说的双层被罩是我说的床单加被罩的意思。。。
【在 l*****o 的大作中提到】
: 很显然，你说的双层被罩是我说的床单加被罩的意思。。。
c*t
42 楼
我向同事借了个旧的 PCIe 显卡，就看到 start up 。BIOS 显示了装
的 12GB DDR3 memory，dvd drive，hard disk 。。。
但是，又出现问题。基本上 boot 后 10-20 秒就开始出现 hang 。可以
是 bios 里面左右走来走去（但是并不改变设置，只是看看）的时候。也
可以是半当中执行 Windows 7 的 installation screen 。
hang 以后，SW reset 会出现黑屏，没有 video signal 。。。这时候
无非 SW power off 。必须关 PSU 。
所以我不清楚怎么回事。还在研究。
的 12GB DDR3 memory，dvd drive，hard disk 。。。
但是，又出现问题。基本上 boot 后 10-20 秒就开始出现 hang 。可以
是 bios 里面左右走来走去（但是并不改变设置，只是看看）的时候。也
可以是半当中执行 Windows 7 的 installation screen 。
hang 以后，SW reset 会出现黑屏，没有 video signal 。。。这时候
无非 SW power off 。必须关 PSU 。
所以我不清楚怎么回事。还在研究。
l*o
43 楼
听起来就像wsj广告。。。
【在 p******e 的大作中提到】
: 呵呵，更安全，更安心。。。
【在 p******e 的大作中提到】
: 呵呵，更安全，更安心。。。
m*u
44 楼
可能是内存吧, 只插一条试试
【在 c*****t 的大作中提到】
: 我向同事借了个旧的 PCIe 显卡，就看到 start up 。BIOS 显示了装
: 的 12GB DDR3 memory，dvd drive，hard disk 。。。
: 但是，又出现问题。基本上 boot 后 10-20 秒就开始出现 hang 。可以
: 是 bios 里面左右走来走去（但是并不改变设置，只是看看）的时候。也
: 可以是半当中执行 Windows 7 的 installation screen 。
: hang 以后，SW reset 会出现黑屏，没有 video signal 。。。这时候
: 无非 SW power off 。必须关 PSU 。
: 所以我不清楚怎么回事。还在研究。
【在 c*****t 的大作中提到】
: 我向同事借了个旧的 PCIe 显卡，就看到 start up 。BIOS 显示了装
: 的 12GB DDR3 memory，dvd drive，hard disk 。。。
: 但是，又出现问题。基本上 boot 后 10-20 秒就开始出现 hang 。可以
: 是 bios 里面左右走来走去（但是并不改变设置，只是看看）的时候。也
: 可以是半当中执行 Windows 7 的 installation screen 。
: hang 以后，SW reset 会出现黑屏，没有 video signal 。。。这时候
: 无非 SW power off 。必须关 PSU 。
: 所以我不清楚怎么回事。还在研究。
p*e
45 楼
呵呵。。。
【在 l*****o 的大作中提到】
: 听起来就像wsj广告。。。
【在 l*****o 的大作中提到】
: 听起来就像wsj广告。。。
c*t
46 楼
现在试过只插一条，试了不同个，还是次次都是 15-20 sec hang 。
应该是 mb 的问题。
【在 m**u 的大作中提到】
: 可能是内存吧, 只插一条试试
应该是 mb 的问题。
【在 m**u 的大作中提到】
: 可能是内存吧, 只插一条试试
l*o
47 楼
不管怎样，大家都需要玩约会你罩着。。。
【在 p******e 的大作中提到】
: 呵呵。。。
【在 p******e 的大作中提到】
: 呵呵。。。
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