h*r
2 楼
从细菌基因组中,能扩10 kb片段的吗?对保真度有一定的要求。
用Pfx还是Phusion?
希望有经验的给点建议。
多谢!!!
用Pfx还是Phusion?
希望有经验的给点建议。
多谢!!!
i*y
3 楼
【 以下文字转载自 JobHunting 讨论区 】
发信人: ibfly (ibfly), 信区: JobHunting
标 题: Sr. Engineer-CVD 帮递简历
发信站: BBS 未名空间站 (Wed Jan 7 21:15:07 2015, 美东)
可以帮忙递简历,[email protected]
/* */
Sr. Engineer-CVD Looking for a CVD engineer with strong background in
chemistry. Ph.D. with at least five years of work experience in developing
CVD coatings is required. The position will be located at the Corporate
Technology Center of Kennametal ( www.kennametal.com) at Latrobe, PA.
发信人: ibfly (ibfly), 信区: JobHunting
标 题: Sr. Engineer-CVD 帮递简历
发信站: BBS 未名空间站 (Wed Jan 7 21:15:07 2015, 美东)
可以帮忙递简历,[email protected]
/* */
Sr. Engineer-CVD Looking for a CVD engineer with strong background in
chemistry. Ph.D. with at least five years of work experience in developing
CVD coatings is required. The position will be located at the Corporate
Technology Center of Kennametal ( www.kennametal.com) at Latrobe, PA.
h*r
6 楼
Thanks!那我分两把PCR吧。
h*r
10 楼
筛没有error的克隆,这个有啥技巧?
LA PCR kit (Long&Accurate)的保真度有多高?
多谢!
LA PCR kit (Long&Accurate)的保真度有多高?
多谢!
C*e
12 楼
筛选没有技巧
就是不停地送出去测序呗
然后片段比较大你肯定要设计不少sequencing primer才能保证都覆盖到
就是先送出去一批只从两端测
正确的克隆再送出去进行下一批测序
这是省钱费时间的做法
要是你老板不care
你就一股脑儿都送出去咯,所有的sequencing primer一起测
呵呵
我记得TAKARA的LA里面是Taq和另外某个带proof reading的DNA polymerase的混合
Taq保证扩增速度,另外一个减少出错率
但是混合的比例好像有讲究
以前看过原始的文献
但是一时半会儿找不到了
也记不清楚了,不想误导你
【在 h**********r 的大作中提到】
: 筛没有error的克隆,这个有啥技巧?
: LA PCR kit (Long&Accurate)的保真度有多高?
: 多谢!
就是不停地送出去测序呗
然后片段比较大你肯定要设计不少sequencing primer才能保证都覆盖到
就是先送出去一批只从两端测
正确的克隆再送出去进行下一批测序
这是省钱费时间的做法
要是你老板不care
你就一股脑儿都送出去咯,所有的sequencing primer一起测
呵呵
我记得TAKARA的LA里面是Taq和另外某个带proof reading的DNA polymerase的混合
Taq保证扩增速度,另外一个减少出错率
但是混合的比例好像有讲究
以前看过原始的文献
但是一时半会儿找不到了
也记不清楚了,不想误导你
【在 h**********r 的大作中提到】
: 筛没有error的克隆,这个有啥技巧?
: LA PCR kit (Long&Accurate)的保真度有多高?
: 多谢!
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