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wxyyy发文能否带上书名？

wxyyy发文能否带上书名？# paladin - 谈古论金，黄梁一梦

o*42013-08-13 07:08

1 楼

【以下文字转载自 Biology 讨论区】
发信人: oct4 (hi), 信区: Biology
标题: 紧急求助：怎么溶解蛋白质沉淀啊？
发信站: BBS 未名空间站 (Wed Jul 25 10:46:31 2012, 美东)
我做Flag pull down，之后把elution冻在-20°过夜，今天早上解冻的时候发现蛋白质
沉淀，
我加了SDS （终浓度1%），煮了5分钟，还是没见到任何溶解，
请问该怎么溶解蛋白质啊？
用loading buffer煮一下能溶解么？
谢谢

g*72013-08-13 07:08

2 楼

我们看宫斗剧的时候总是被里面的各种心机折服，看游刃有余的算计别人再反被算计，
简直就是张艺谋导演的套路了，但是观众就是屡试不爽啊，毕竟那种恶人最终自食恶果
的时候还是很大快人心的。
但是我们仔细想想，每一个计谋，栽赃嫁祸好像都看起来天衣无缝，但是最后被揭露的
时候却总是在一点特别不起眼的地方被抓到证据。
事实也是这样，越是看起来天衣无缝，顺理成章的时候往往就是经过人设计好的，毕竟
世事无常，没有什么时候是那么正好的。
人的思想是回吧所有可能想到的过程经过和证据都认为的剔除掉，这才展示出来的是天
衣无缝，使为诬陷的人百口莫辩。
但是要想人不知除非己莫为，总是有一些线索是人的思想考虑不到的，那经过细细的推
敲就一定会有迹可循。
生活中有时候我们会遇到很多精心的骗局，看起来就是光鲜亮丽的，让你有抵不住的诱
惑，那些被骗金钱和感情的，都是自己没有看破这一点，自己陷入别人给你的陷阱里，
这个陷阱就是那样的天衣无缝。让你没有一丝一毫的怀疑就被骗的体无完肤。

q*x2013-08-13 07:08

3 楼

否则检索时不好找。

hr2013-08-13 07:08

4 楼

Try 6 M guanidine or urea.

h*82013-08-13 07:08

5 楼

SDS-PAGE Loading buffer直接煮，应该问题不大。
这个loading buffer里面含有SDS和DTT(或者B-MERCAPTETHANOL)还原剂，可以打破双硫
健以及分子之间的吸引力。
一般LOADING BUFFER煮5-10分钟，蛋白完全变性，就ok了。
如果煮了之后，还不行的话，用超声波再打一打，然后再煮。

【在 o**4 的大作中提到】

: 【以下文字转载自 Biology 讨论区】
: 发信人: oct4 (hi), 信区: Biology
: 标题: 紧急求助：怎么溶解蛋白质沉淀啊？
: 发信站: BBS 未名空间站 (Wed Jul 25 10:46:31 2012, 美东)
: 我做Flag pull down，之后把elution冻在-20°过夜，今天早上解冻的时候发现蛋白质
: 沉淀，
: 我加了SDS （终浓度1%），煮了5分钟，还是没见到任何溶解，
: 请问该怎么溶解蛋白质啊？
: 用loading buffer煮一下能溶解么？
: 谢谢