目前SARS实验室诊断技术简介[zz]# Biology - 生物学
o*p
1 楼
【 以下文字转载自 Medicine 讨论区 】
发信人: seeoff (greymouse), 信区: Medicine
标 题: 目前SARS实验室诊断技术简介
发信站: BBS 水木清华站 (Wed Apr 23 23:40:32 2003), 转信
目前的SARS检测方法介绍
1． IFA（间接免疫荧光）方法；
荧光标记的抗IgG抗体 为二抗
病人血清为一抗
培养病毒的细胞裂解液做包被抗原
抗体产生通常需要10－14天时间，此方法可以检测发病10天之后的患者标本。
2.PCR方法：
收集病人样本（血清或者含漱液）
超速离心，浓缩病毒(标本采集对医务人员非常危险，超速离心对实验人员也很危险并且
收集的样本可能未必能捕捉到病毒存在或者标本处理不好造成RNA降解，所以此步骤为此
方法的难点，至今未克服)
用常规方法提取病毒RNA
RT-PCR，扩增相应条带（引物一般使用国际通用的7对引物）
凝胶电泳观察，或者引物用标记探针做实时PCR
3.抗原检测
这是最有希望早期诊断的方法
ELISA方法，
底板用病毒蛋白包被（可用细胞裂解液、基因工程方法得到的重组蛋白，或者合成肽）
用鼠或其
发信人: seeoff (greymouse), 信区: Medicine
标 题: 目前SARS实验室诊断技术简介
发信站: BBS 水木清华站 (Wed Apr 23 23:40:32 2003), 转信
目前的SARS检测方法介绍
1． IFA（间接免疫荧光）方法；
荧光标记的抗IgG抗体 为二抗
病人血清为一抗
培养病毒的细胞裂解液做包被抗原
抗体产生通常需要10－14天时间，此方法可以检测发病10天之后的患者标本。
2.PCR方法：
收集病人样本（血清或者含漱液）
超速离心，浓缩病毒(标本采集对医务人员非常危险，超速离心对实验人员也很危险并且
收集的样本可能未必能捕捉到病毒存在或者标本处理不好造成RNA降解，所以此步骤为此
方法的难点，至今未克服)
用常规方法提取病毒RNA
RT-PCR，扩增相应条带（引物一般使用国际通用的7对引物）
凝胶电泳观察，或者引物用标记探针做实时PCR
3.抗原检测
这是最有希望早期诊断的方法
ELISA方法，
底板用病毒蛋白包被（可用细胞裂解液、基因工程方法得到的重组蛋白，或者合成肽）
用鼠或其