悬浮培养的mammalian cells# Biology - 生物学
X*g
1 楼
爱吃米饭，老的电饭锅坏了，准备买个好的
最好是没有内涂层的，我老妈节俭，每次粘底的米都舍不得，都要使劲刮阿刮的，很快就把内涂层刮掉了
求推荐牌子型号，谢谢谢谢
最好是没有内涂层的，我老妈节俭，每次粘底的米都舍不得，都要使劲刮阿刮的，很快就把内涂层刮掉了
求推荐牌子型号，谢谢谢谢
j*x
2 楼
刚刚买房，想update一下w4，希望每个月能少交点税。
我的itemized deductions包括mortgage interest, property tax, state and local
taxes，其他的我就没有。想问一下大家，这个state and local taxes是指的我一年的
income tax吗？是要参看去年的收入预估一个全年的income tax吗？如果是这样，这部
分应该很容易大于$12,700这个标准值吧？那不买房也应该用itemize deduction 而不
是standard deduction？
我的itemized deductions包括mortgage interest, property tax, state and local
taxes，其他的我就没有。想问一下大家，这个state and local taxes是指的我一年的
income tax吗？是要参看去年的收入预估一个全年的income tax吗？如果是这样，这部
分应该很容易大于$12,700这个标准值吧？那不买房也应该用itemize deduction 而不
是standard deduction？
j*a
3 楼
现在deposit check再也不用去银行了。是神医们的好帮手啊
R*w
4 楼
最近在做用mammalian cell 表达蛋白，贴壁培养还是不太方便。请问那些哺乳动物细
胞可以悬浮培养？（可以用spinner flask）
我试过293T细胞，可是在spinner flask长的很差。听说HeLa 可以悬浮培养，是吗？
悬浮培养应该注意些什么：
1，培养基一样吗？
2，FBS浓度还是用10％吗？
多谢！
胞可以悬浮培养？（可以用spinner flask）
我试过293T细胞，可是在spinner flask长的很差。听说HeLa 可以悬浮培养，是吗？
悬浮培养应该注意些什么：
1，培养基一样吗？
2，FBS浓度还是用10％吗？
多谢！
p*w
5 楼
大同
快就把内涂层刮掉了
【在 X**g 的大作中提到】
: 爱吃米饭，老的电饭锅坏了，准备买个好的
: 最好是没有内涂层的，我老妈节俭，每次粘底的米都舍不得，都要使劲刮阿刮的，很快就把内涂层刮掉了
: 求推荐牌子型号，谢谢谢谢
快就把内涂层刮掉了
【在 X**g 的大作中提到】
: 爱吃米饭，老的电饭锅坏了，准备买个好的
: 最好是没有内涂层的，我老妈节俭，每次粘底的米都舍不得，都要使劲刮阿刮的，很快就把内涂层刮掉了
: 求推荐牌子型号，谢谢谢谢
a9
6 楼
这是赚多少钱的大户？
local
【在 j*****x 的大作中提到】
: 刚刚买房，想update一下w4，希望每个月能少交点税。
: 我的itemized deductions包括mortgage interest, property tax, state and local
: taxes，其他的我就没有。想问一下大家，这个state and local taxes是指的我一年的
: income tax吗？是要参看去年的收入预估一个全年的income tax吗？如果是这样，这部
: 分应该很容易大于$12,700这个标准值吧？那不买房也应该用itemize deduction 而不
: 是standard deduction？
local
【在 j*****x 的大作中提到】
: 刚刚买房，想update一下w4，希望每个月能少交点税。
: 我的itemized deductions包括mortgage interest, property tax, state and local
: taxes，其他的我就没有。想问一下大家，这个state and local taxes是指的我一年的
: income tax吗？是要参看去年的收入预估一个全年的income tax吗？如果是这样，这部
: 分应该很容易大于$12,700这个标准值吧？那不买房也应该用itemize deduction 而不
: 是standard deduction？
x*g
7 楼
上次我online deposit说出错了。让以后再试。后来LD就把check拿去银行存了。结果
其实online的也存上了，搞得存了两次，被chase罚了十块。还得费半天口舌要回来。
他们难道不会自己检查一下同一张check有没有存过？很烂。而且一千块以上的还不让
存。
其实online的也存上了，搞得存了两次，被chase罚了十块。还得费半天口舌要回来。
他们难道不会自己检查一下同一张check有没有存过？很烂。而且一千块以上的还不让
存。
a*k
8 楼
HeLa可以
我们没有自己养过，都是从NCCC买的，他们用的growth medium是Joklik's modified
MEM supplemented with 5% newborn calf serum
【在 R*****w 的大作中提到】
: 最近在做用mammalian cell 表达蛋白，贴壁培养还是不太方便。请问那些哺乳动物细
: 胞可以悬浮培养？（可以用spinner flask）
: 我试过293T细胞，可是在spinner flask长的很差。听说HeLa 可以悬浮培养，是吗？
: 悬浮培养应该注意些什么：
: 1，培养基一样吗？
: 2，FBS浓度还是用10％吗？
: 多谢！
我们没有自己养过，都是从NCCC买的，他们用的growth medium是Joklik's modified
MEM supplemented with 5% newborn calf serum
【在 R*****w 的大作中提到】
: 最近在做用mammalian cell 表达蛋白，贴壁培养还是不太方便。请问那些哺乳动物细
: 胞可以悬浮培养？（可以用spinner flask）
: 我试过293T细胞，可是在spinner flask长的很差。听说HeLa 可以悬浮培养，是吗？
: 悬浮培养应该注意些什么：
: 1，培养基一样吗？
: 2，FBS浓度还是用10％吗？
: 多谢！
f*a
9 楼
TaTung~~
and please make sure you get the stainless steel one!!!
and please make sure you get the stainless steel one!!!
j*x
10 楼
在美国拿学位毕业工作的，每年交大于这个数的税很正常吧。
【在 a9 的大作中提到】
: 这是赚多少钱的大户？
:
: local
【在 a9 的大作中提到】
: 这是赚多少钱的大户？
:
: local
u*l
11 楼
以前最恨check，现在最爱check~
【在 j******a 的大作中提到】
: 现在deposit check再也不用去银行了。是神医们的好帮手啊
【在 j******a 的大作中提到】
: 现在deposit check再也不用去银行了。是神医们的好帮手啊
R*w
12 楼
多谢ajwook，那我试试看。
其他如果还有人有悬浮培养mammalian cell的经历，希望赐教！
多谢
其他如果还有人有悬浮培养mammalian cell的经历，希望赐教！
多谢
F*u
13 楼
用不用itemized deduction看你federal+state哪个省税呗
很多时候联邦税用了itemized deduction 州税就也得用itemized
而比如纽约州state income tax是不算州里的deduction的
这样没房子的就可能出现联邦税用itemized deduction划算 州税用standard划算 具体
用哪个 那就看你的州收入税比12700多多少了
你要就多1块 那肯定还是都用standard好
local
【在 j*****x 的大作中提到】
: 刚刚买房，想update一下w4，希望每个月能少交点税。
: 我的itemized deductions包括mortgage interest, property tax, state and local
: taxes，其他的我就没有。想问一下大家，这个state and local taxes是指的我一年的
: income tax吗？是要参看去年的收入预估一个全年的income tax吗？如果是这样，这部
: 分应该很容易大于$12,700这个标准值吧？那不买房也应该用itemize deduction 而不
: 是standard deduction？
很多时候联邦税用了itemized deduction 州税就也得用itemized
而比如纽约州state income tax是不算州里的deduction的
这样没房子的就可能出现联邦税用itemized deduction划算 州税用standard划算 具体
用哪个 那就看你的州收入税比12700多多少了
你要就多1块 那肯定还是都用standard好
local
【在 j*****x 的大作中提到】
: 刚刚买房，想update一下w4，希望每个月能少交点税。
: 我的itemized deductions包括mortgage interest, property tax, state and local
: taxes，其他的我就没有。想问一下大家，这个state and local taxes是指的我一年的
: income tax吗？是要参看去年的收入预估一个全年的income tax吗？如果是这样，这部
: 分应该很容易大于$12,700这个标准值吧？那不买房也应该用itemize deduction 而不
: 是standard deduction？
t*d
14 楼
chase的free checking从二月份起不再free。要收$25每月，除非你有一两千balance，
或$500 direct deposit。
以后只能用paypal了。
【在 u**l 的大作中提到】
: 以前最恨check，现在最爱check~
或$500 direct deposit。
以后只能用paypal了。
【在 u**l 的大作中提到】
: 以前最恨check，现在最爱check~
f*r
15 楼
骨髓细胞。
DMEM 10% FBS就行。
DMEM 10% FBS就行。
u*l
16 楼
可恶！到时候再恨之！
【在 t*******d 的大作中提到】
: chase的free checking从二月份起不再free。要收$25每月，除非你有一两千balance，
: 或$500 direct deposit。
: 以后只能用paypal了。
【在 t*******d 的大作中提到】
: chase的free checking从二月份起不再free。要收$25每月，除非你有一两千balance，
: 或$500 direct deposit。
: 以后只能用paypal了。
h*n
17 楼
N久之前好像用C1R表达过什么东西，不记得了，悬浮的。
R*w
18 楼
多谢上面两位的回复！！
a*n
19 楼
要专门的293T或者专门的一种HeLa
查一下ATCC 和INVITROGEN
【在 R*****w 的大作中提到】
: 最近在做用mammalian cell 表达蛋白，贴壁培养还是不太方便。请问那些哺乳动物细
: 胞可以悬浮培养？（可以用spinner flask）
: 我试过293T细胞，可是在spinner flask长的很差。听说HeLa 可以悬浮培养，是吗？
: 悬浮培养应该注意些什么：
: 1，培养基一样吗？
: 2，FBS浓度还是用10％吗？
: 多谢！
查一下ATCC 和INVITROGEN
【在 R*****w 的大作中提到】
: 最近在做用mammalian cell 表达蛋白，贴壁培养还是不太方便。请问那些哺乳动物细
: 胞可以悬浮培养？（可以用spinner flask）
: 我试过293T细胞，可是在spinner flask长的很差。听说HeLa 可以悬浮培养，是吗？
: 悬浮培养应该注意些什么：
: 1，培养基一样吗？
: 2，FBS浓度还是用10％吗？
: 多谢！
R*w
20 楼
ankyrin, Thank you very much!
You are right. I checked ATCC. found some HeLa clees are mentioned for suspension culture, such as HeLa-S3, H1HeLa (in media without Ca++)
Most other HeLa cell lines are not mentioned for suspension culture.
You are right. I checked ATCC. found some HeLa clees are mentioned for suspension culture, such as HeLa-S3, H1HeLa (in media without Ca++)
Most other HeLa cell lines are not mentioned for suspension culture.
d*s
21 楼
HL-60
High Five
SF9
High Five
SF9
r*e
22 楼
HL-60不好转染。
后两种都是昆虫表达系统用的。
【在 d*********s 的大作中提到】
: HL-60
: High Five
: SF9
后两种都是昆虫表达系统用的。
【在 d*********s 的大作中提到】
: HL-60
: High Five
: SF9
s*l
23 楼
T cells: RPMI+10%FBS
Myeloid cells: IMDM+20%FBS+IL3(WEHI)
【在 R*****w 的大作中提到】
: 最近在做用mammalian cell 表达蛋白，贴壁培养还是不太方便。请问那些哺乳动物细
: 胞可以悬浮培养？（可以用spinner flask）
: 我试过293T细胞，可是在spinner flask长的很差。听说HeLa 可以悬浮培养，是吗？
: 悬浮培养应该注意些什么：
: 1，培养基一样吗？
: 2，FBS浓度还是用10％吗？
: 多谢！
Myeloid cells: IMDM+20%FBS+IL3(WEHI)
【在 R*****w 的大作中提到】
: 最近在做用mammalian cell 表达蛋白，贴壁培养还是不太方便。请问那些哺乳动物细
: 胞可以悬浮培养？（可以用spinner flask）
: 我试过293T细胞，可是在spinner flask长的很差。听说HeLa 可以悬浮培养，是吗？
: 悬浮培养应该注意些什么：
: 1，培养基一样吗？
: 2，FBS浓度还是用10％吗？
: 多谢！
x*i
24 楼
CHO-S (s means suspension) is popular in industry and very easy for
transfection.
you can purchase from Invitrogen
【在 R*****w 的大作中提到】
: 最近在做用mammalian cell 表达蛋白，贴壁培养还是不太方便。请问那些哺乳动物细
: 胞可以悬浮培养？（可以用spinner flask）
: 我试过293T细胞，可是在spinner flask长的很差。听说HeLa 可以悬浮培养，是吗？
: 悬浮培养应该注意些什么：
: 1，培养基一样吗？
: 2，FBS浓度还是用10％吗？
: 多谢！
transfection.
you can purchase from Invitrogen
【在 R*****w 的大作中提到】
: 最近在做用mammalian cell 表达蛋白，贴壁培养还是不太方便。请问那些哺乳动物细
: 胞可以悬浮培养？（可以用spinner flask）
: 我试过293T细胞，可是在spinner flask长的很差。听说HeLa 可以悬浮培养，是吗？
: 悬浮培养应该注意些什么：
: 1，培养基一样吗？
: 2，FBS浓度还是用10％吗？
: 多谢！
R*w
25 楼
Thank you very much for your suggestions!
s*g
26 楼
APL (NB4)(Leukemia)
&
Lymphoma (ramos, Granta, Jurkat, SUDHL4, HF-1...)
cell lines are 悬浮培养.
&
Lymphoma (ramos, Granta, Jurkat, SUDHL4, HF-1...)
cell lines are 悬浮培养.
R*w
28 楼
Thank you.
I will try some of them.
I will try some of them.
f*s
29 楼
就像上面推荐的
CHO 和 Myolema 都是很好的
我用过NS1/NS0 myolema
你可以找找protein expression in mammalian cell的review看看
【在 R*****w 的大作中提到】
: 最近在做用mammalian cell 表达蛋白，贴壁培养还是不太方便。请问那些哺乳动物细
: 胞可以悬浮培养？（可以用spinner flask）
: 我试过293T细胞，可是在spinner flask长的很差。听说HeLa 可以悬浮培养，是吗？
: 悬浮培养应该注意些什么：
: 1，培养基一样吗？
: 2，FBS浓度还是用10％吗？
: 多谢！
CHO 和 Myolema 都是很好的
我用过NS1/NS0 myolema
你可以找找protein expression in mammalian cell的review看看
【在 R*****w 的大作中提到】
: 最近在做用mammalian cell 表达蛋白，贴壁培养还是不太方便。请问那些哺乳动物细
: 胞可以悬浮培养？（可以用spinner flask）
: 我试过293T细胞，可是在spinner flask长的很差。听说HeLa 可以悬浮培养，是吗？
: 悬浮培养应该注意些什么：
: 1，培养基一样吗？
: 2，FBS浓度还是用10％吗？
: 多谢！
R*w
30 楼
Thank you so much. This is good suggestion.
I googled and found a good one.
In case some one else need:
http://mrw.interscience.wiley.com/emrw/9780471140863/cp/cpps/article/ps0509/current/pdf
Thanks.
【在 f******s 的大作中提到】
: 就像上面推荐的
: CHO 和 Myolema 都是很好的
: 我用过NS1/NS0 myolema
: 你可以找找protein expression in mammalian cell的review看看
I googled and found a good one.
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http://mrw.interscience.wiley.com/emrw/9780471140863/cp/cpps/article/ps0509/current/pdf
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【在 f******s 的大作中提到】
: 就像上面推荐的
: CHO 和 Myolema 都是很好的
: 我用过NS1/NS0 myolema
: 你可以找找protein expression in mammalian cell的review看看
g*5
31 楼
293FT, invitrogen.
y*6
32 楼
jurkat cells
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