n*8
2 楼
因为我人在美国, 孩子有被拒签的经历, 中信不能代签, 所以只能预约到上海面签, 请问外公外婆带去上海签证可以吗?
a*g
3 楼
如题
u*w
4 楼
【 以下文字转载自 Military 讨论区 】
发信人: usajjww (For the Lich King!), 信区: Military
标 题: 真狗血 英女护士遭电话作弄泄露凯蒂病况后自杀
发信站: BBS 未名空间站 (Sat Dec 8 20:31:37 2012, 美东)
发信人: usajjww (For the Lich King!), 信区: Military
标 题: 真狗血 英女护士遭电话作弄泄露凯蒂病况后自杀
发信站: BBS 未名空间站 (Sat Dec 8 20:31:37 2012, 美东)
m*5
5 楼
目的片断连进载体以后，双梅切验证，发现酶切产物比PCR目的片断大：（目的片断
500bp, 跑出来接近800）
请问这种情况正常么？
等测序结果还要三天……忐忑阿
500bp, 跑出来接近800）
请问这种情况正常么？
等测序结果还要三天……忐忑阿
T*3
6 楼
挺多的吧
【在 s********1 的大作中提到】
: Thanks!
【在 s********1 的大作中提到】
: Thanks!
e*e
7 楼
ICC也不能直接办绿卡吧？谁给列个名单，这个可以去起诉吧？
b*n
8 楼
可能连进了两个拷贝的目的片段吧
你看看两个酶切位点是不是cohesive
【在 m******5 的大作中提到】
: 目的片断连进载体以后，双梅切验证，发现酶切产物比PCR目的片断大：（目的片断
: 500bp, 跑出来接近800）
: 请问这种情况正常么？
: 等测序结果还要三天……忐忑阿
你看看两个酶切位点是不是cohesive
【在 m******5 的大作中提到】
: 目的片断连进载体以后，双梅切验证，发现酶切产物比PCR目的片断大：（目的片断
: 500bp, 跑出来接近800）
: 请问这种情况正常么？
: 等测序结果还要三天……忐忑阿
b*n
9 楼
面包机现在不是都说是failed technology了吗？里面的高温和挤压会让teflon揉进面
里去，往往肉眼可见
里去，往往肉眼可见
w*a
10 楼
Yes if we know fraud we should expose it!
【在 e******e 的大作中提到】
: ICC也不能直接办绿卡吧？谁给列个名单，这个可以去起诉吧？
【在 e******e 的大作中提到】
: ICC也不能直接办绿卡吧？谁给列个名单，这个可以去起诉吧？
n*w
11 楼
同意ls。可能连了2个copy。。。另外backbone切干净了吗？
b*g
12 楼
真的吗？
面包机桶内壁有teflon吗？
【在 b*****n 的大作中提到】
: 面包机现在不是都说是failed technology了吗？里面的高温和挤压会让teflon揉进面
: 里去，往往肉眼可见
面包机桶内壁有teflon吗？
【在 b*****n 的大作中提到】
: 面包机现在不是都说是failed technology了吗？里面的高温和挤压会让teflon揉进面
: 里去，往往肉眼可见
g*g
13 楼
ICC以后的运入就被审计了。可是已经做成熟饭的A3就没人关了。
这帮子蝗虫
这帮子蝗虫
s*n
14 楼
个人比较倾向于用colony PCR screening，通量比双酶切高不少。
m*l
15 楼
walmart里卖的sun-beam就很不错。性价比都不错的说。
要买贵的就买象印的吧。amazon上有。
要买贵的就买象印的吧。amazon上有。
P*S
16 楼
老印们其实羡慕咱们呀。他们要是中国人，早去办庇护了。
【在 a******g 的大作中提到】
: 如题
【在 a******g 的大作中提到】
: 如题
m*5
17 楼
PCR screen的都是positive的……
噢，送出去测序了，另外只好重新来了，刚到一个实验室，感觉所有系统都还不熟悉。
以前这种连接三天就搞定了
噢，送出去测序了，另外只好重新来了，刚到一个实验室，感觉所有系统都还不熟悉。
以前这种连接三天就搞定了
b*n
18 楼
据我所知，全都有，而且全都有teflon往面里掉的问题
【在 b*******g 的大作中提到】
: 真的吗？
: 面包机桶内壁有teflon吗？
【在 b*******g 的大作中提到】
: 真的吗？
: 面包机桶内壁有teflon吗？
n*w
19 楼
PCR不如酶切好，稍有污染，PCR容易出现false postive...
我做fusion protein都好几个月了。。。现在就是把这个大片段连到backbone里去老是
得不到正确的克隆。。。。
我做fusion protein都好几个月了。。。现在就是把这个大片段连到backbone里去老是
得不到正确的克隆。。。。
s*s
20 楼
啊？真的啊？
那算了，我还是买kitchenaid和面机吧。
反正买面包机也是和面用。
【在 b*****n 的大作中提到】
: 据我所知，全都有，而且全都有teflon往面里掉的问题
那算了，我还是买kitchenaid和面机吧。
反正买面包机也是和面用。
【在 b*****n 的大作中提到】
: 据我所知，全都有，而且全都有teflon往面里掉的问题
m*5
21 楼
ntgxw 这个id看着好眼熟……
【在 n***w 的大作中提到】
: PCR不如酶切好，稍有污染，PCR容易出现false postive...
: 我做fusion protein都好几个月了。。。现在就是把这个大片段连到backbone里去老是
: 得不到正确的克隆。。。。
【在 n***w 的大作中提到】
: PCR不如酶切好，稍有污染，PCR容易出现false postive...
: 我做fusion protein都好几个月了。。。现在就是把这个大片段连到backbone里去老是
: 得不到正确的克隆。。。。
c*y
22 楼
真是拔草了
s*n
23 楼
可能个人偏好不同，PCR优点在于通量高，而且很大提高正确率，自从以前做的一个低
效率克隆（1/20）后我就都改用PCR screening了。
【在 n***w 的大作中提到】
: PCR不如酶切好，稍有污染，PCR容易出现false postive...
: 我做fusion protein都好几个月了。。。现在就是把这个大片段连到backbone里去老是
: 得不到正确的克隆。。。。
效率克隆（1/20）后我就都改用PCR screening了。
【在 n***w 的大作中提到】
: PCR不如酶切好，稍有污染，PCR容易出现false postive...
: 我做fusion protein都好几个月了。。。现在就是把这个大片段连到backbone里去老是
: 得不到正确的克隆。。。。
f*d
24 楼
自己用手和面难道真的这么难吗？
【在 s********1 的大作中提到】
: Thanks!
【在 s********1 的大作中提到】
: Thanks!
d*e
25 楼
###此帖已应当事人要求删除###
【在 b*****n 的大作中提到】
: 据我所知，全都有，而且全都有teflon往面里掉的问题
【在 b*****n 的大作中提到】
: 据我所知，全都有，而且全都有teflon往面里掉的问题
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