b*e
2 楼
投稿review回来有一个问题需要做invitro transcription，检测一个特定蛋白对
transcription的影响，但是invitro体系中transcription用的不是SP6或者T7这些改造
过没有保真性的酶，而是RNA polymerase II， 如果不用同位素的话，还有什么手段可
以检测不至于敏感度不够高？用RT PCR，模板DNA太多，消化不完全，negative
control都是阳性结果。。。。
transcription的影响，但是invitro体系中transcription用的不是SP6或者T7这些改造
过没有保真性的酶，而是RNA polymerase II， 如果不用同位素的话，还有什么手段可
以检测不至于敏感度不够高？用RT PCR，模板DNA太多，消化不完全，negative
control都是阳性结果。。。。
w*e
3 楼
this should be an easier problem to solve bah? DNAse+acid phenol, repeat
a few times?
【在 b**e 的大作中提到】
: 投稿review回来有一个问题需要做invitro transcription，检测一个特定蛋白对
: transcription的影响，但是invitro体系中transcription用的不是SP6或者T7这些改造
: 过没有保真性的酶，而是RNA polymerase II， 如果不用同位素的话，还有什么手段可
: 以检测不至于敏感度不够高？用RT PCR，模板DNA太多，消化不完全，negative
: control都是阳性结果。。。。
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