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谁做过 Micro RNA detection by PCR？

谁做过 Micro RNA detection by PCR？# Biology - 生物学

m*n2010-10-26 07:10

1 楼

现在我们想检测转染细胞后到底有多少exogenous micro RNA和protein of interest结
合（比较在不同条件下结合量的差别）。
请问有谁做过这个？micro RNA很短，只有20多个碱基，这个PCR的原理是什么？具体怎
么设计引物呢？
商业化的kit里都有设计好的引物甚至RT的引物。就是不太明白整个的原理，和传统PCR
的区别是什么？

W*C2010-10-26 07:10

2 楼

RT 引物是一个hairpin的大概70碱基的DNA,末端单链大概有10个和mir匹配，这样RT
就会以mir为模板再加10个（20－10）碱基到引物上。 PCR的时候引物针对这个新合成
的大概80的DNA特异就可以啦

w*r2010-10-26 07:10

3 楼

you can check this paper in NAR. It has been cited many many many times...
We tried and it works well.
http://nar.oxfordjournals.org/content/33/20/e179.full

PCR

【在 m***n 的大作中提到】

: 现在我们想检测转染细胞后到底有多少exogenous micro RNA和protein of interest结
: 合（比较在不同条件下结合量的差别）。
: 请问有谁做过这个？micro RNA很短，只有20多个碱基，这个PCR的原理是什么？具体怎
: 么设计引物呢？
: 商业化的kit里都有设计好的引物甚至RT的引物。就是不太明白整个的原理，和传统PCR
: 的区别是什么？