用Cleaved caspase-3抗体做IF-P - 未名空间MITBBS历史存档

用Cleaved caspase-3抗体做IF-P# Biology - 生物学

l*a2010-12-07 08:12

1 楼

【以下文字转载自 PhotoGear 讨论区】
发信人: libra (秤子), 信区: PhotoGear
标题: 用mac的各位，推荐常用软件吧
发信站: BBS 未名空间站 (Thu Sep 15 19:27:41 2011, 美东)
装新的mba
俺的mbp(leopard)上常用的
office 2011 - for doc
firefox - for internet
lightroom (4出来了吗？) - for raw
fqterm/welly - for telnet
nikonscan/vuescan - for 9000ed
path finder - replace finder
acrobat 8 pro (9或者更高有D版了没？) - for PDF
photoshop cs4 - for photo processing
photo mechanic - for photo browsing
还有些杂七杂八的软件，一时想不起来了

r*n2010-12-07 08:12

2 楼

Mouse colon tissue，做了很多次了，有时候有信号，有时候没有，快被折磨疯掉了，
TNND，俺还用TSA boost呢......
看人家说的这个抗体（cell signaling)的）挺好用的阿，我做的这个咋就这么不稳定
呢。试了其他的apoptosis marker的抗体，例如Cleaved-PARP，也是没有什么信号。但
是我做别的抗体就没什么问题，结果还不错，就是不知道这个的问题到底出在哪里，烦
死人阿。
TUNEL做完了，老板非要其他一个marker作比较，唉，童鞋们你们谁做过这个？能不能
说一下关键步骤在哪里啊？

H*z2010-12-07 08:12

3 楼

mba哪有那么多地方装软件？

j*g2010-12-07 08:12

4 楼

用过这个抗体，在brain section上，信号很强。抱歉没有什么有用的信息。

【在 r*********n 的大作中提到】

: Mouse colon tissue，做了很多次了，有时候有信号，有时候没有，快被折磨疯掉了，
: TNND，俺还用TSA boost呢......
: 看人家说的这个抗体（cell signaling)的）挺好用的阿，我做的这个咋就这么不稳定
: 呢。试了其他的apoptosis marker的抗体，例如Cleaved-PARP，也是没有什么信号。但
: 是我做别的抗体就没什么问题，结果还不错，就是不知道这个的问题到底出在哪里，烦
: 死人阿。
: TUNEL做完了，老板非要其他一个marker作比较，唉，童鞋们你们谁做过这个？能不能
: 说一下关键步骤在哪里啊？

s*y2010-12-07 08:12

5 楼

128gb ya

【在 H***z 的大作中提到】

: mba哪有那么多地方装软件？

r*m2010-12-07 08:12

6 楼

用到1：50就consistent了。。。

r*n2010-12-07 08:12

7 楼

谢谢。俺用过1：100和1：200，明天试一试1：50看看。

【在 r*****m 的大作中提到】

: 用到1：50就consistent了。。。

n*k2010-12-07 08:12

8 楼

follow a brdu staining protocol may help

【在 r*********n 的大作中提到】

: Mouse colon tissue，做了很多次了，有时候有信号，有时候没有，快被折磨疯掉了，
: TNND，俺还用TSA boost呢......
: 看人家说的这个抗体（cell signaling)的）挺好用的阿，我做的这个咋就这么不稳定
: 呢。试了其他的apoptosis marker的抗体，例如Cleaved-PARP，也是没有什么信号。但
: 是我做别的抗体就没什么问题，结果还不错，就是不知道这个的问题到底出在哪里，烦
: 死人阿。
: TUNEL做完了，老板非要其他一个marker作比较，唉，童鞋们你们谁做过这个？能不能
: 说一下关键步骤在哪里啊？

h*o2010-12-07 08:12

9 楼

这个抗体做western不错，错IHC的话不容易。我在大脑切片上，好像所有的神经细胞都
染了，我感觉可能uncleaved的也染了

【在 r*********n 的大作中提到】

: Mouse colon tissue，做了很多次了，有时候有信号，有时候没有，快被折磨疯掉了，
: TNND，俺还用TSA boost呢......
: 看人家说的这个抗体（cell signaling)的）挺好用的阿，我做的这个咋就这么不稳定
: 呢。试了其他的apoptosis marker的抗体，例如Cleaved-PARP，也是没有什么信号。但
: 是我做别的抗体就没什么问题，结果还不错，就是不知道这个的问题到底出在哪里，烦
: 死人阿。
: TUNEL做完了，老板非要其他一个marker作比较，唉，童鞋们你们谁做过这个？能不能
: 说一下关键步骤在哪里啊？

i*02010-12-07 08:12

10 楼

一个小问题,这个 Cleaved caspase-3 是看p53 independent apoptosis么?
我记得在一片paper上看过,现在忘记了.

F*e2010-12-07 08:12

11 楼

这个不是你的问题也不是抗体的问题，本来在mouse colon tissue 里caspase－3 阳
性的细胞就很少的，基本上很难看到
偶尔有一两个。如果你用intestin tiusse 的话可能回多一些
但是也很少
这个抗体我也在用 1：200
就很好了

【在 r*********n 的大作中提到】

: Mouse colon tissue，做了很多次了，有时候有信号，有时候没有，快被折磨疯掉了，
: TNND，俺还用TSA boost呢......
: 看人家说的这个抗体（cell signaling)的）挺好用的阿，我做的这个咋就这么不稳定
: 呢。试了其他的apoptosis marker的抗体，例如Cleaved-PARP，也是没有什么信号。但
: 是我做别的抗体就没什么问题，结果还不错，就是不知道这个的问题到底出在哪里，烦
: 死人阿。
: TUNEL做完了，老板非要其他一个marker作比较，唉，童鞋们你们谁做过这个？能不能
: 说一下关键步骤在哪里啊？

r*n2010-12-07 08:12

12 楼

很专业，赞。
不过我的mouse是处理过的，诱导了colitis，所以有大量的Inflammation和dysplasia
，情况应该跟没有处理的组织不同。tunel结果显示还是有不少apoptosis的（虽然不少
因素可以影响tunel的结果）。

【在 F**********e 的大作中提到】

: 这个不是你的问题也不是抗体的问题，本来在mouse colon tissue 里caspase－3 阳
: 性的细胞就很少的，基本上很难看到
: 偶尔有一两个。如果你用intestin tiusse 的话可能回多一些
: 但是也很少
: 这个抗体我也在用 1：200
: 就很好了