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再问两个关于ChIP的问题

再问两个关于ChIP的问题# Biology - 生物学

T*s2011-02-02 08:02

1 楼

问个问题，现在公司A已经入职两个月多了，H1 transfer被RFE了，还没让律师
response。准备再找一个公司B，请问这时候可以再让公司B file一个transfer吗？还
是得等到公司A的transfer approve了再弄？谢谢各位大神

m*d2011-02-02 08:02

2 楼

新手请教：
在做Polii-ChIP-qPCR,在qPCR这步怎么normalize，看protocol上建议留input，最后
qPCR这步normalize to input。可是reverse crosslink之后DNA yield这么少，留1%的
input能准么？我想请问，能不能不留input了,qPCR这步normalize to GAPDH行么，反
正treatment也不影响Polii binding.
还有另一个问题，reverse crosslink之后大家都怎样recover DNA，我过了个QIAGEN的
柱子，yield挺低的
谢谢～～

c*82011-02-02 08:02

3 楼

等 transfer approval

m*52011-02-02 08:02

4 楼

同问！！！

T*s2011-02-02 08:02

5 楼

十分感谢。我看到网上有说Bridge petition的，您知道这个操作吗？

【在 c******8 的大作中提到】

: 等 transfer approval

g*f2011-02-02 08:02

6 楼

1. 关于DNA extract 我以前用QIAGEN的柱子，方便到是方便，可是费钱不说，产量还
很低。后来我一直用 phenol: chloroform，挺好用，最后一步加glycogen 和乙醇后
-20 过夜或者 -80度 1小时，离心后可以看到大砣的沉淀。
2. 关于input，1%的 lysate 可以提取很多的DNA，足够后面PCR 用了。我觉得
normalize to GAPDH 从理论上讲就错了

c*82011-02-02 08:02

7 楼

不知道 bridge petition，感觉还是有风险的。最好问问律师

：十分感谢。我看到网上有说Bridge petition的，您知道这个操作吗？
：【在 china888 (陶瓷man) 的大作中提到: 】

c*y2011-02-02 08:02

8 楼

赞“大砣”

后

【在 g*******f 的大作中提到】

: 1. 关于DNA extract 我以前用QIAGEN的柱子，方便到是方便，可是费钱不说，产量还
: 很低。后来我一直用 phenol: chloroform，挺好用，最后一步加glycogen 和乙醇后
: -20 过夜或者 -80度 1小时，离心后可以看到大砣的沉淀。
: 2. 关于input，1%的 lysate 可以提取很多的DNA，足够后面PCR 用了。我觉得
: normalize to GAPDH 从理论上讲就错了