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问个V5抗体的问题

问个V5抗体的问题# Biology - 生物学

i*n2011-03-10 08:03

1 楼

第二次做的,第一次比这个差,就不上照了,这个是第二次的做的.方子是学这个香港师
奶:　http://www.youtube.com/watch?v=61VXTc2in2U&feature=related
材料:3个鸡蛋.100克低筋粉,糖估计着放.爱甜就多放一点.菜油1小杯(很小的杯子哦)
1:蛋白打发,打发到发泡,像绵花糖,打发的过程加糖,这样糖容易溶解.
2:蛋黄用筷子轻搅一下,分两次倒入打好的绵花蛋白里,顺时针搅
3:过筛一下低筋粉放入搅拌,我没专用粉漏筛,用的家用细漏,一样成功.呵呵
4:放入菜油搅拌,倒入专用烤盘,烤箱175C预热10分钟后放入,烤25分钟.出炉倒扣.
此上容易出问题的地方:1蛋白打发.一定要像绵花糖,越胀也好.堆起来不会陷下来的
那种.4出炉后一定要倒放,要不然它会收缩,

I*t2011-03-10 08:03

2 楼

just get the 1st CC from Capital 1, with CL only $300.
This is really useless.
Is there any other CC for beginners?
Thanks

c*n2011-03-10 08:03

3 楼

ID: cadgn
歌名:
MIC: AT2020 USB
Software: GarageBand
创作说明:
奔歌献丑么，讲究的是一鼓作气。感谢本版李键专家天马大哥的推荐，搅拌一首人>，大家多指教。
上首周董的歌没有＂闭合＂成功，这次倒好像有那么点意思。其实我也不知道是不是闭
合声，但是副歌不是真声，也不是假声，是不是就只可能是闭合声呢？
还有就是，歌还不太熟，感觉有的地方并不是原调，希望大家和天马哥不要介意我糟沓
好歌。

李健
披星戴月的奔波,只为一扇窗,
当你没迷失在路上,能够看见那灯光.
不知不觉把他乡当作了故乡,
只是偶尔难过时
不禁你要望远方.
曾经的乡音悄悄的隐藏
说不出的诺言一直放心上
有许多时候眼泪就要流
那扇窗是让我坚强的理由
小小的门口还有她的温柔
给我温暖陪伴我左右
有许多时候眼泪就要流
那扇窗是让我坚强的理由
小小的门口还有她的温柔
给我温暖陪伴我左右
给我温暖陪伴我左右
...

c*u2011-03-10 08:03

4 楼

最近克隆了几个基因进Invitrogen pcDNA 3.2/V5-DEST，测序什么的都没问题，可是在
293细胞表达后用invitrogen自己的anti-V5做immunocytochemistry的时候总是有比较
强的background staining，我用的是10% goat serum blocking and goat anti-mouse
Alexa 594.请问哪位用过这个antibody，什么条件可以降低噪声呢

s*i2011-03-10 08:03

5 楼

赞，看着很象店里买的

s*l2011-03-10 08:03

6 楼

我比你强，给了500，上个月涨到750，有办法再加些么？
还是AMEX好，直接给了5K

T*a2011-03-10 08:03

7 楼

沙发！正要出门，回头听！

n*u2011-03-10 08:03

8 楼

我用过这个v5 antibody
条件是 5% milk/TBST blocking，然后用goat anti-mouse或者goat anti-rabbit都没
问题，很干净

n*y2011-03-10 08:03

9 楼

sweet..........

j*u2011-03-10 08:03

10 楼

我的第一张也是300。。。另一公司的

f*t2011-03-10 08:03

11 楼

板凳

【在 c***n 的大作中提到】

: ID: cadgn
: 歌名:
: MIC: AT2020 USB
: Software: GarageBand
: 创作说明:
: 奔歌献丑么，讲究的是一鼓作气。感谢本版李键专家天马大哥的推荐，搅拌一首: 人>，大家多指教。
: 上首周董的歌没有＂闭合＂成功，这次倒好像有那么点意思。其实我也不知道是不是闭
: 合声，但是副歌不是真声，也不是假声，是不是就只可能是闭合声呢？
: 还有就是，歌还不太熟，感觉有的地方并不是原调，希望大家和天马哥不要介意我糟沓

F*22011-03-10 08:03

12 楼

以前也用过V5 antibody, backgrond也很强，二抗是什么忘了。。。

n*y2011-03-10 08:03

13 楼

what to do with Yolk then?

i*n2011-03-10 08:03

14 楼

C1 第一张给了我500，说是第7个statement会涨到750...

b*a2011-03-10 08:03

15 楼

这首相当棒！
卡登声音很好听！这首气息也不错
我觉得上次大家讨论的闭合好像说的是头腔共鸣
你这个副歌部分应该是头声
感觉控制的非常不错
稍微有点音准上的问题，但影响不大，比较好提高
大赞

d*72011-03-10 08:03

16 楼

我们一直用Sigma的V5抗体（V8012），Clone V5-10，很好用

l*32011-03-10 08:03

17 楼

好棒。。。喜欢喜欢。。。

i*d2011-03-10 08:03

18 楼

me 2...
我就是为了让他停止给我寄信
结果开了还是不停的给寄信。。
不过卡片很好看还是挺喜欢的

【在 i****n 的大作中提到】

: C1 第一张给了我500，说是第7个statement会涨到750...

b*i2011-03-10 08:03

19 楼

这首歌唱的非常好啊，是我听你的歌唱的最好的一首~
高音很漂亮~

F*t2011-03-10 08:03

20 楼

象angle cake

i*n2011-03-10 08:03

21 楼

我没怎么收到他家的信，几乎见不到他家的信
然后卡可以每月image一次，呵呵

【在 i*********d 的大作中提到】

: me 2...
: 我就是为了让他停止给我寄信
: 结果开了还是不停的给寄信。。
: 不过卡片很好看还是挺喜欢的

a*u2011-03-10 08:03

22 楼

对嘛，大哥！
这个就是对了嘛！
真声假声转换和颤音这都是你滴优势啊！
很不错很不错！
这首歌很对嗓音，很好听！！！
灰常灰常赞！
也赞天马哥，这回不是马是伯乐！

【在 c***n 的大作中提到】

i*n2011-03-10 08:03

23 楼

刚才在第2步里把蛋白写错了,应该是蛋黄.现在改过来您看一下.您要学的话看这个香港
人的视频　http://www.youtube.com/watch?v=61VXTc2in2U&feature=related　,一步步跟着她做,毛什么问题没有.注意好蛋白打发就行.

【在 n***y 的大作中提到】

: what to do with Yolk then?

i*o2011-03-10 08:03

24 楼

很喜欢这歌，这会儿不方便听，先re一个~

【在 c***n 的大作中提到】

k*u2011-03-10 08:03

25 楼

软绵绵的耶~~~

n*a2011-03-10 08:03

26 楼

这首歌的用气和高音的地方都很正，表意也很好。
ps，"不禁你要望远方"和"那扇窗是让我坚强的理由"两句好像跟原唱的唱法有点不同。

i*n2011-03-10 08:03

27 楼

to:santorini ^-^谢谢
to:linger0223 ^-^有空您试试,用料简单,还少,易成功.
to:Febaugust ^-^
to:kaymiliu 还有嚼劲,弹性很好.有空试试哦^-^

n*w2011-03-10 08:03

28 楼

刚又听了昨天那首，比较之下，进步相当大啊。
上次说你声门闭合得不够紧。漏气的有点多，气声很多，听着虚，而且非常消耗气息，
长一点的句子很难撑住。
这首好很多，特别是主歌。而且听着你的共鸣腔有点木吉他的感觉。很适合唱民谣。比
如老狼的水木年华的。。。
个人觉得，声门可以再稍微合上一点。气声再少一点。特别是副歌。唱起来会更省气一
些。不过可能有人就是喜欢你这气声。
然后高音的时候，底下需要支撑得更强烈一点。练习的时候，可以一只手握拳头，用力
去压小腹。这样小腹会发力顶住压力。支撑会强烈很多。习惯这种感觉。

l*22011-03-10 08:03

29 楼

内层结构非常棒，雪白绵软，口感肯定好

c*n2011-03-10 08:03

30 楼

头声也不错：）
我觉得头声也应该是闭合的，声带不闭合KEY高不上去。
李键的原版，副歌也是头声，但是人家的支持强太多了，质感十足。我的就很虚，共鸣
也不好。

【在 b*******a 的大作中提到】

: 这首相当棒！
: 卡登声音很好听！这首气息也不错
: 我觉得上次大家讨论的闭合好像说的是头腔共鸣
: 你这个副歌部分应该是头声
: 感觉控制的非常不错
: 稍微有点音准上的问题，但影响不大，比较好提高
: 大赞

j*a2011-03-10 08:03

31 楼

还以为海绵蛋糕都是全蛋打发，加黄油的呢。MM做得真不错，看着我又心痒了。
我出于好奇，买了angel food cake的mix，做出来全扔掉了，那么甜，那么多添加剂的
味道。有人喜欢angel food cake？值得尝试吗（不用mix)?

【在 i********n 的大作中提到】

: 第二次做的,第一次比这个差,就不上照了,这个是第二次的做的.方子是学这个香港师
: 奶:　http://www.youtube.com/watch?v=61VXTc2in2U&feature=related
: 材料:3个鸡蛋.100克低筋粉,糖估计着放.爱甜就多放一点.菜油1小杯(很小的杯子哦)
: 1:蛋白打发,打发到发泡,像绵花糖,打发的过程加糖,这样糖容易溶解.
: 2:蛋黄用筷子轻搅一下,分两次倒入打好的绵花蛋白里,顺时针搅
: 3:过筛一下低筋粉放入搅拌,我没专用粉漏筛,用的家用细漏,一样成功.呵呵
: 4:放入菜油搅拌,倒入专用烤盘,烤箱175C预热10分钟后放入,烤25分钟.出炉倒扣.
: 此上容易出问题的地方:1蛋白打发.一定要像绵花糖,越胀也好.堆起来不会陷下来的
: 那种.4出炉后一定要倒放,要不然它会收缩,

c*n2011-03-10 08:03

32 楼

谢谢鼓励：）
唱完这首，还是挺开心的，因为第一次唱头声成功，不太难听。

【在 b*******i 的大作中提到】

: 这首歌唱的非常好啊，是我听你的歌唱的最好的一首~
: 高音很漂亮~

l*t2011-03-10 08:03

33 楼

好看。

b*a2011-03-10 08:03

34 楼

对，头声是闭合的
想有质感没别的办法，就得多唱，把那几块肌肉练好应该就好了
我也在练呢，共同努力！

【在 c***n 的大作中提到】

: 头声也不错：）
: 我觉得头声也应该是闭合的，声带不闭合KEY高不上去。
: 李键的原版，副歌也是头声，但是人家的支持强太多了，质感十足。我的就很虚，共鸣
: 也不好。

a*n2011-03-10 08:03

35 楼

这是天使蛋糕，不是海绵蛋糕吧，海绵蛋糕因该是全蛋打发啊？

c*n2011-03-10 08:03

36 楼

谢啦！的确是天马哥选歌选的好。

【在 a*******u 的大作中提到】

: 对嘛，大哥！
: 这个就是对了嘛！
: 真声假声转换和颤音这都是你滴优势啊！
: 很不错很不错！
: 这首歌很对嗓音，很好听！！！
: 灰常灰常赞！
: 也赞天马哥，这回不是马是伯乐！

l*32011-03-10 08:03

37 楼

LILY MM，昨天半夜突然想着你这个就馋了，做了一个，不过没有低粉，也没有淀粉跟
ALL PURPOSE混合，就直接ALL PURPOSE了。。。不过也很好吃说。。。。谢谢MM，非常
实用一个方子。。。

c*n2011-03-10 08:03

38 楼

口真总，您很喜欢这歌，您轻拍哇～～～
（我的腿肚子～～～，大概是打球扭了，肯定不是怕口真总啊）

【在 i******o 的大作中提到】

: 很喜欢这歌，这会儿不方便听，先re一个~

l*32011-03-10 08:03

39 楼

另外MM，我没有那个放在烤盘和蛋糕之间的纸直接烤的，MM能不能跟我说一下那个东
西的名称。。。。我老怕买错了会烤着火。。。

c*n2011-03-10 08:03

40 楼

肌肉～～～怪不得。我用这种唱法，声带本身好像不累，但是喉部附近感觉很紧张。

【在 b*******a 的大作中提到】

: 对，头声是闭合的
: 想有质感没别的办法，就得多唱，把那几块肌肉练好应该就好了
: 我也在练呢，共同努力！

i*n2011-03-10 08:03

41 楼

to:adeliacn ^=^海绵蛋糕可以是分蛋打法.分蛋打,蛋白易发泡, 比全蛋容易多了.全蛋
打.蛋白没这么快发泡发胀的.而蛋的发胀的决定蛋糕的成功,
to:linger0223 呵呵我没有用烤纸呀.只是在烤盘里抹了一遍菜油,只要抹的均匀足够,
它也是很容易下来的.

c*n2011-03-10 08:03

42 楼

谢大师鼓励。
那两句是唱错了。＂理由＂本来是华彩之一，但是我头声的支持不够，估计彪不上去，
只好唱的平淡一些。

【在 n********a 的大作中提到】

: 这首歌的用气和高音的地方都很正，表意也很好。
: ps，"不禁你要望远方"和"那扇窗是让我坚强的理由"两句好像跟原唱的唱法有点不同。

l*32011-03-10 08:03

43 楼

谢谢MM，那我直接抹油吧，这次做的什么也没有抹，确实有一薄层会留在烤盘里。。

【在 i********n 的大作中提到】

: to:adeliacn ^=^海绵蛋糕可以是分蛋打法.分蛋打,蛋白易发泡, 比全蛋容易多了.全蛋
: 打.蛋白没这么快发泡发胀的.而蛋的发胀的决定蛋糕的成功,
: to:linger0223 呵呵我没有用烤纸呀.只是在烤盘里抹了一遍菜油,只要抹的均匀足够,
: 它也是很容易下来的.

c*n2011-03-10 08:03

44 楼

谢详细指点。
最近的两首歌，觉得还是学到好多，主要是真正理解气息的重要性。
以后照你的技术练练气宗。

【在 n*******w 的大作中提到】

: 刚又听了昨天那首，比较之下，进步相当大啊。
: 上次说你声门闭合得不够紧。漏气的有点多，气声很多，听着虚，而且非常消耗气息，
: 长一点的句子很难撑住。
: 这首好很多，特别是主歌。而且听着你的共鸣腔有点木吉他的感觉。很适合唱民谣。比
: 如老狼的水木年华的。。。
: 个人觉得，声门可以再稍微合上一点。气声再少一点。特别是副歌。唱起来会更省气一
: 些。不过可能有人就是喜欢你这气声。
: 然后高音的时候，底下需要支撑得更强烈一点。练习的时候，可以一只手握拳头，用力
: 去压小腹。这样小腹会发力顶住压力。支撑会强烈很多。习惯这种感觉。

a*u2011-03-10 08:03

45 楼

赞木吉他共鸣腔！
不知道加个效果器能不能变成电吉他滴？
：）

【在 n*******w 的大作中提到】

c*n2011-03-10 08:03

46 楼

和和，假木假式的创建了俺的第一个５SING专辑－－－＜木木的吉他＞。
电吉他，磨擦生电能有用伐？看来唱歌要穿化纤毛衣，而且磨拳擦掌。

【在 a*******u 的大作中提到】

: 赞木吉他共鸣腔！
: 不知道加个效果器能不能变成电吉他滴？
: ：）

z*n2011-03-10 08:03

47 楼

卡小登很不错，进步神速呀，赞探索头声精神。如不是真声或假声，会是混声吧，我也
不懂了，看其他人怎么讲。气息运用再稳一点就更好了，有些尾音有点小飘，总体上挺
棒！

a*u2011-03-10 08:03

48 楼

赞这个！
强力推荐啊！
链接如下：
http://13116111.5sing.com/zjcon.aspx?zjid=4f79cf51308c051390615

【在 c***n 的大作中提到】

: 和和，假木假式的创建了俺的第一个５SING专辑－－－＜木木的吉他＞。
: 电吉他，磨擦生电能有用伐？看来唱歌要穿化纤毛衣，而且磨拳擦掌。

T*a2011-03-10 08:03

49 楼

Great job
Though I cannot heart it. I am on vacation.only carry a kindle.cannot type
Chinese.
Looking forward to a duet with you

O*r2011-03-10 08:03

50 楼

cadgn 这个歌唱得真是太好了，听起来好舒服。
对了，什么是闭合和头声？怎么能判别自己唱没唱出来头声？

【在 c***n 的大作中提到】

: 谢谢鼓励：）
: 唱完这首，还是挺开心的，因为第一次唱头声成功，不太难听。

c*n2011-03-10 08:03

51 楼

谢谢。
三哥觉得尾音的稳定性应该怎样提高呢？有木什么体会？我因为知道自己的尾音会不稳
，尤其是真声尾音会不稳，唱得时候往往就不敢放开，有时情愿唱的＂短＂一点。
唱的一长，感觉连共鸣位置都HOLD不住，有时。这个真是唱功的局限性。

【在 z******n 的大作中提到】

: 卡小登很不错，进步神速呀，赞探索头声精神。如不是真声或假声，会是混声吧，我也
: 不懂了，看其他人怎么讲。气息运用再稳一点就更好了，有些尾音有点小飘，总体上挺
: 棒！

c*n2011-03-10 08:03

52 楼

Me too :)

【在 T****a 的大作中提到】

: Great job
: Though I cannot heart it. I am on vacation.only carry a kindle.cannot type
: Chinese.
: Looking forward to a duet with you

c*n2011-03-10 08:03

53 楼

谢谢。当时的确有水果园大师附体的感觉～～～
关于闭合音，我的感觉是这样的（不一定对），喉部（不是声带）肌肉紧张，真的有嗓
子＂闭合＂的感觉。有点像憋气，或者停止下咽的感觉。然后呢，再在这种＂闭合＂的
状态下，试图发声，结果就是副歌的声音。
肯定不是真声，但是我也比较过，也不是假声，所以我估计大概真的是闭合声。
是不是用了头腔共震就不一定了，估计用了也不多。

【在 O***r 的大作中提到】

: cadgn 这个歌唱得真是太好了，听起来好舒服。
: 对了，什么是闭合和头声？怎么能判别自己唱没唱出来头声？

H*k2011-03-10 08:03

54 楼

什么闭不闭的我不懂。但是这首歌配你的嗓音简直就是绝配。演绎的非常出色！

【在 c***n 的大作中提到】

f*a2011-03-10 08:03

55 楼

一上来几个字以为是大师呢……对这个歌的趣味不是很能摸准，不过唱得是有李健的意
思啊。

【在 c***n 的大作中提到】

j*t2011-03-10 08:03

56 楼

这首歌唱得太出彩了，高音部分真漂亮！非常喜欢

【在 c***n 的大作中提到】

c*n2011-03-10 08:03

57 楼

我其实也不懂，瞎蒙。
我们要听合唱哦！！！

【在 H*******k 的大作中提到】

: 什么闭不闭的我不懂。但是这首歌配你的嗓音简直就是绝配。演绎的非常出色！

c*n2011-03-10 08:03

58 楼

是啊，只注重＂眩技＂了。
其实这个歌很不错的，细微地方应该更琢磨一下。

【在 f********a 的大作中提到】

: 一上来几个字以为是大师呢……对这个歌的趣味不是很能摸准，不过唱得是有李健的意
: 思啊。

c*n2011-03-10 08:03

59 楼

谢谢。
其实感觉音并不太高，只是唱法不一样，效果比较的李健。但是他的质感强太多了。

【在 j*****t 的大作中提到】

: 这首歌唱得太出彩了，高音部分真漂亮！非常喜欢

b*a2011-03-10 08:03

60 楼

瞎说两句啊
不稳就是气息的问题~~
前面没控制好的话，后面没气了就不稳了
想要稳就要hold住，横膈膜那里要有力量，每句不到唱完不能松懈。

【在 c***n 的大作中提到】

: 谢谢。
: 其实感觉音并不太高，只是唱法不一样，效果比较的李健。但是他的质感强太多了。

c*t2011-03-10 08:03

61 楼

好听！

【在 c***n 的大作中提到】