为什么IP下来的蛋白和input 里面分子量不一样呢？# Biology - 生物学
n*p
1 楼
我原本以为将旧衣服鞋子捐给Goodwill至少可以拿个估价的单子来抵税，结果就是直接
往他们的
仓库里一放就完了，只得到了一句Thank you.
是不是我明年报税的时候自己随便写个捐献数额，比如$1000, 就行了？
往他们的
仓库里一放就完了，只得到了一句Thank you.
是不是我明年报税的时候自己随便写个捐献数额，比如$1000, 就行了？
w*s
2 楼
【 以下文字转载自 Programming 讨论区 】
发信人: wds (退市了退市了), 信区: Programming
标 题: 从我们组看为什么华人对阿三节节败退
发信站: BBS 未名空间站 (Thu Jun 12 23:30:42 2014, 美东)
我们组基本是中国人，从进组的先后，a,b,c,d,e，我是c。
d跟a,c吵架不合作，还跟以前2个中国人吵过。
e跟b吵。
现在上班时组里一片静悄悄的，没人再愿意开口说话。
a,b,c都在自责，为什么还要放中国人进来给自己添堵？
发信人: wds (退市了退市了), 信区: Programming
标 题: 从我们组看为什么华人对阿三节节败退
发信站: BBS 未名空间站 (Thu Jun 12 23:30:42 2014, 美东)
我们组基本是中国人，从进组的先后，a,b,c,d,e，我是c。
d跟a,c吵架不合作，还跟以前2个中国人吵过。
e跟b吵。
现在上班时组里一片静悄悄的，没人再愿意开口说话。
a,b,c都在自责，为什么还要放中国人进来给自己添堵？
n*r
3 楼
会因为来换机器的人和当初买的人不是同一个而不给换吗？
s*y
4 楼
我做mouse NFAt c3的IP, 预测的分子量应该是115Kd， 我IP下来大概100Kd有带，
但是input 里面分子量变大了快到150Kd，（略小于100也有浅带，但不是IP那条）
为什么会这样呢？
有人说可能是sumoylation， 可是为啥IP下来这修饰就没了呢？
谢谢。
但是input 里面分子量变大了快到150Kd，（略小于100也有浅带，但不是IP那条）
为什么会这样呢？
有人说可能是sumoylation， 可是为啥IP下来这修饰就没了呢？
谢谢。
m*y
5 楼
They give you a reciept for tax purpose.
Many Charities provide pick up service, you leave your bags at door, they
pick them up and leave the reciept at your porch, easier to handle.
Many Charities provide pick up service, you leave your bags at door, they
pick them up and leave the reciept at your porch, easier to handle.
d*n
6 楼
你们办公室吵架是用中文的吗？
s*y
7 楼
核对 机器的ID 不是人的ID
认机器 不认人
认机器 不认人
z*i
8 楼
首先，网上好好查一下，看跑出来的分子量到底是多大。
其次，确认一下你的抗体有没有问题，是否能做IP.哪怕是公司说能做，如果是第一次
用，最好还是确认一下。
如果这些都没有问题，然后再来看看。
【在 s******y 的大作中提到】
: 我做mouse NFAt c3的IP, 预测的分子量应该是115Kd， 我IP下来大概100Kd有带，
: 但是input 里面分子量变大了快到150Kd，（略小于100也有浅带，但不是IP那条）
: 为什么会这样呢？
: 有人说可能是sumoylation， 可是为啥IP下来这修饰就没了呢？
: 谢谢。
其次，确认一下你的抗体有没有问题，是否能做IP.哪怕是公司说能做，如果是第一次
用，最好还是确认一下。
如果这些都没有问题，然后再来看看。
【在 s******y 的大作中提到】
: 我做mouse NFAt c3的IP, 预测的分子量应该是115Kd， 我IP下来大概100Kd有带，
: 但是input 里面分子量变大了快到150Kd，（略小于100也有浅带，但不是IP那条）
: 为什么会这样呢？
: 有人说可能是sumoylation， 可是为啥IP下来这修饰就没了呢？
: 谢谢。
w*e
9 楼
超过400要收据。400以下自己填就行了。
1000，你捐了什么宝贝：-）？
1000，你捐了什么宝贝：-）？
a*g
10 楼
可怜。
【在 w*s 的大作中提到】
: 【 以下文字转载自 Programming 讨论区 】
: 发信人: wds (退市了退市了), 信区: Programming
: 标 题: 从我们组看为什么华人对阿三节节败退
: 发信站: BBS 未名空间站 (Thu Jun 12 23:30:42 2014, 美东)
: 我们组基本是中国人，从进组的先后，a,b,c,d,e，我是c。
: d跟a,c吵架不合作，还跟以前2个中国人吵过。
: e跟b吵。
: 现在上班时组里一片静悄悄的，没人再愿意开口说话。
: a,b,c都在自责，为什么还要放中国人进来给自己添堵？
【在 w*s 的大作中提到】
: 【 以下文字转载自 Programming 讨论区 】
: 发信人: wds (退市了退市了), 信区: Programming
: 标 题: 从我们组看为什么华人对阿三节节败退
: 发信站: BBS 未名空间站 (Thu Jun 12 23:30:42 2014, 美东)
: 我们组基本是中国人，从进组的先后，a,b,c,d,e，我是c。
: d跟a,c吵架不合作，还跟以前2个中国人吵过。
: e跟b吵。
: 现在上班时组里一片静悄悄的，没人再愿意开口说话。
: a,b,c都在自责，为什么还要放中国人进来给自己添堵？
s*y
11 楼
有一个可能就是你那个全长的蛋白因为一些构象原因不能被pulldown,
反而是被切过的（或者alternatively splice) 的可以被pulldown.
如果你开始用的是native buffer pulldown 的话，不妨换成denaturing pulldown
condition
比方说用 2 %SDS 把细胞给煮了，然后加缓冲液稀释到0.2% SDS再pulldown,
这样一方面可以解决大部分构象原因，另外一方面也会减少背景
当然，如果你比较倒霉的话，这样也有可能导致你什么都pulldown 不下来。这个你得
试一试，就没有人敢给你保证了。
【在 s******y 的大作中提到】
: 我做mouse NFAt c3的IP, 预测的分子量应该是115Kd， 我IP下来大概100Kd有带，
: 但是input 里面分子量变大了快到150Kd，（略小于100也有浅带，但不是IP那条）
: 为什么会这样呢？
: 有人说可能是sumoylation， 可是为啥IP下来这修饰就没了呢？
: 谢谢。
反而是被切过的（或者alternatively splice) 的可以被pulldown.
如果你开始用的是native buffer pulldown 的话，不妨换成denaturing pulldown
condition
比方说用 2 %SDS 把细胞给煮了，然后加缓冲液稀释到0.2% SDS再pulldown,
这样一方面可以解决大部分构象原因，另外一方面也会减少背景
当然，如果你比较倒霉的话，这样也有可能导致你什么都pulldown 不下来。这个你得
试一试，就没有人敢给你保证了。
【在 s******y 的大作中提到】
: 我做mouse NFAt c3的IP, 预测的分子量应该是115Kd， 我IP下来大概100Kd有带，
: 但是input 里面分子量变大了快到150Kd，（略小于100也有浅带，但不是IP那条）
: 为什么会这样呢？
: 有人说可能是sumoylation， 可是为啥IP下来这修饰就没了呢？
: 谢谢。
g*9
12 楼
only itemized deduction could claim...
you could ask for receipt for sure.
【在 n***p 的大作中提到】
: 我原本以为将旧衣服鞋子捐给Goodwill至少可以拿个估价的单子来抵税，结果就是直接
: 往他们的
: 仓库里一放就完了，只得到了一句Thank you.
: 是不是我明年报税的时候自己随便写个捐献数额，比如$1000, 就行了？
you could ask for receipt for sure.
【在 n***p 的大作中提到】
: 我原本以为将旧衣服鞋子捐给Goodwill至少可以拿个估价的单子来抵税，结果就是直接
: 往他们的
: 仓库里一放就完了，只得到了一句Thank you.
: 是不是我明年报税的时候自己随便写个捐献数额，比如$1000, 就行了？
j*f
13 楼
这种太少见了, 互相背后拆台的我见过, 但至少面上要过的去...
【在 w*s 的大作中提到】
: 【 以下文字转载自 Programming 讨论区 】
: 发信人: wds (退市了退市了), 信区: Programming
: 标 题: 从我们组看为什么华人对阿三节节败退
: 发信站: BBS 未名空间站 (Thu Jun 12 23:30:42 2014, 美东)
: 我们组基本是中国人，从进组的先后，a,b,c,d,e，我是c。
: d跟a,c吵架不合作，还跟以前2个中国人吵过。
: e跟b吵。
: 现在上班时组里一片静悄悄的，没人再愿意开口说话。
: a,b,c都在自责，为什么还要放中国人进来给自己添堵？
【在 w*s 的大作中提到】
: 【 以下文字转载自 Programming 讨论区 】
: 发信人: wds (退市了退市了), 信区: Programming
: 标 题: 从我们组看为什么华人对阿三节节败退
: 发信站: BBS 未名空间站 (Thu Jun 12 23:30:42 2014, 美东)
: 我们组基本是中国人，从进组的先后，a,b,c,d,e，我是c。
: d跟a,c吵架不合作，还跟以前2个中国人吵过。
: e跟b吵。
: 现在上班时组里一片静悄悄的，没人再愿意开口说话。
: a,b,c都在自责，为什么还要放中国人进来给自己添堵？
r*a
14 楼
我也碰到类似的情况
我的是IP下来的，比input稍微高一点
一个如果60，一个可能就60－65KD
一开始以为是磷酸化，加了ppase，还在原来位置
现在也不知道，那个到底是非特异性的
还是什么修饰
【在 s******y 的大作中提到】
: 我做mouse NFAt c3的IP, 预测的分子量应该是115Kd， 我IP下来大概100Kd有带，
: 但是input 里面分子量变大了快到150Kd，（略小于100也有浅带，但不是IP那条）
: 为什么会这样呢？
: 有人说可能是sumoylation， 可是为啥IP下来这修饰就没了呢？
: 谢谢。
我的是IP下来的，比input稍微高一点
一个如果60，一个可能就60－65KD
一开始以为是磷酸化，加了ppase，还在原来位置
现在也不知道，那个到底是非特异性的
还是什么修饰
【在 s******y 的大作中提到】
: 我做mouse NFAt c3的IP, 预测的分子量应该是115Kd， 我IP下来大概100Kd有带，
: 但是input 里面分子量变大了快到150Kd，（略小于100也有浅带，但不是IP那条）
: 为什么会这样呢？
: 有人说可能是sumoylation， 可是为啥IP下来这修饰就没了呢？
: 谢谢。
n*p
15 楼
Hmm, most probably standard deduction works better for me. Thanks.
Next time I will ask for a receipt when I donate something worth of $1000.
【在 g*********9 的大作中提到】
: only itemized deduction could claim...
: you could ask for receipt for sure.
Next time I will ask for a receipt when I donate something worth of $1000.
【在 g*********9 的大作中提到】
: only itemized deduction could claim...
: you could ask for receipt for sure.
o*e
16 楼
interview还是要把关,
给老中多问一些behavior
的问题，顺便教育了。或者叫他们
来bbs接受再教育吧。 哈哈。
我比较重视的不是
每个华裔从50分进步到100分的问题，
而是怎样让3个50分华裔变成150分的
问题， 或者10个50分华裔变成500分
的问题。
组织起来，reach out,
少拆台，多褒奖。
建立信用，互相帮助，
否则跟1882年一样，被排挤无解。
想要说服老美老中，需要举例子出来才能有说服力，这里有。 查置顶帖子：
http://www.mitbbs.com/clubarticle_t2/ITRelief/31117093.html
需要加入俱乐部：
http://www.mitbbs.com/club_bbsdoc/ITRelief.html
给老中多问一些behavior
的问题，顺便教育了。或者叫他们
来bbs接受再教育吧。 哈哈。
我比较重视的不是
每个华裔从50分进步到100分的问题，
而是怎样让3个50分华裔变成150分的
问题， 或者10个50分华裔变成500分
的问题。
组织起来，reach out,
少拆台，多褒奖。
建立信用，互相帮助，
否则跟1882年一样，被排挤无解。
想要说服老美老中，需要举例子出来才能有说服力，这里有。 查置顶帖子：
http://www.mitbbs.com/clubarticle_t2/ITRelief/31117093.html
需要加入俱乐部：
http://www.mitbbs.com/club_bbsdoc/ITRelief.html
s*y
17 楼
你们拖下来的带有没有WB confirm 并送去质谱证实一下？
【在 r**a 的大作中提到】
: 我也碰到类似的情况
: 我的是IP下来的，比input稍微高一点
: 一个如果60，一个可能就60－65KD
: 一开始以为是磷酸化，加了ppase，还在原来位置
: 现在也不知道，那个到底是非特异性的
: 还是什么修饰
【在 r**a 的大作中提到】
: 我也碰到类似的情况
: 我的是IP下来的，比input稍微高一点
: 一个如果60，一个可能就60－65KD
: 一开始以为是磷酸化，加了ppase，还在原来位置
: 现在也不知道，那个到底是非特异性的
: 还是什么修饰
n*p
18 楼
这不是比如说么？ lol
【在 w********e 的大作中提到】
: 超过400要收据。400以下自己填就行了。
: 1000，你捐了什么宝贝：-）？
【在 w********e 的大作中提到】
: 超过400要收据。400以下自己填就行了。
: 1000，你捐了什么宝贝：-）？
o*e
19 楼
LZ不错。 可以更上一层楼
A。有的人下围棋是下的13x13,
B。有的人下围棋是下的19x19,
C。有的人下围棋是下的99x99,
D。有的人下围棋是下的999x999,
老中好像都是A），即使下得很好，
也需要学习B），C），D）
A。有的人下围棋是下的13x13,
B。有的人下围棋是下的19x19,
C。有的人下围棋是下的99x99,
D。有的人下围棋是下的999x999,
老中好像都是A），即使下得很好，
也需要学习B），C），D）
j*s
20 楼
反正自己填，多填点也没关系，我们家捐的都是限量版，比新的还值钱。ＬＯＬ。
【在 n***p 的大作中提到】
: 这不是比如说么？ lol
【在 n***p 的大作中提到】
: 这不是比如说么？ lol
m*g
21 楼
周围一大妈，把一认识的中国新人介绍进来，结果主管给新人定的工资比她差不少，
结果丫破口大骂，嫉妒的发狂。
华人大妈一过40岁就该劝退，哪里大妈多哪里是非多。
【在 w*s 的大作中提到】
: 【 以下文字转载自 Programming 讨论区 】
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: 标 题: 从我们组看为什么华人对阿三节节败退
: 发信站: BBS 未名空间站 (Thu Jun 12 23:30:42 2014, 美东)
: 我们组基本是中国人，从进组的先后，a,b,c,d,e，我是c。
: d跟a,c吵架不合作，还跟以前2个中国人吵过。
: e跟b吵。
: 现在上班时组里一片静悄悄的，没人再愿意开口说话。
: a,b,c都在自责，为什么还要放中国人进来给自己添堵？
结果丫破口大骂，嫉妒的发狂。
华人大妈一过40岁就该劝退，哪里大妈多哪里是非多。
【在 w*s 的大作中提到】
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: 标 题: 从我们组看为什么华人对阿三节节败退
: 发信站: BBS 未名空间站 (Thu Jun 12 23:30:42 2014, 美东)
: 我们组基本是中国人，从进组的先后，a,b,c,d,e，我是c。
: d跟a,c吵架不合作，还跟以前2个中国人吵过。
: e跟b吵。
: 现在上班时组里一片静悄悄的，没人再愿意开口说话。
: a,b,c都在自责，为什么还要放中国人进来给自己添堵？
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