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请问影响real-time qPCR扩增效率的因素？

请问影响real-time qPCR扩增效率的因素？# Biology - 生物学

t*g2011-03-29 07:03

1 楼

【以下文字转载自 PhotoGear 讨论区】
发信人: tyning (全副*你上过了么？), 信区: PhotoGear
标题: illuminated keyboard创新低了
发信站: BBS 未名空间站 (Sun Dec 19 21:50:58 2010, 美东)
这键盘不错
$35AR amazon

k*o2011-03-29 07:03

2 楼

假设引物和dNTP都是过量的，我一下能想到这些：
1. 引物的序列
2. 样品的杂质含量（genomic DNA，蛋白）
3. 混入的聚合酶抑制剂
请问还有其它什么吗？

M*y2011-03-29 07:03

3 楼

一个有线键盘这个价钱好贵啊，不知道手感能好到哪里去。俺有一个2年前35买的
Saitek背光，手感挺满意的。

【在 t****g 的大作中提到】

: 【以下文字转载自 PhotoGear 讨论区】
: 发信人: tyning (全副*你上过了么？), 信区: PhotoGear
: 标题: illuminated keyboard创新低了
: 发信站: BBS 未名空间站 (Sun Dec 19 21:50:58 2010, 美东)
: 这键盘不错
: $35AR amazon

Z*52011-03-29 07:03

4 楼

其实对于Real Time来说，对数期之前的扩增效率对你的实验结果才是至关重要的（就
是Ct值之前的地方）。比较重要的因素有：
1，引物的结合是否充分（重要的是引物序列，退火延伸温度，特异性；模板二级结构）
2，延伸反应是否完全，充分（延伸时间，虽然一般目的片段大小只有一到两百bp，但
是都会延伸1分钟；聚合酶抑制剂）