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在哺乳动物或者细胞里做筛选的郁闷
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在哺乳动物或者细胞里做筛选的郁闷# Biology - 生物学
T*o
1
我父亲今年6月大腿股骨骨折,在协和做髋关节置换术。
我想给他从美国汇钱,因父亲行动不便,写了一张$8000的支票给我哥。
支票7月中寄出,我哥在中国银行开了账户,将支票存入。
我8月底看到$8000从我checking account划走,就觉得一切OK了。
12月我哥说,钱还没有到帐。我上网查了一下,很多人都3个月才到帐,我想中国的银
行可能hold一下,因数额比较多。
现在一个月过去了,钱还没有到帐。请问我怎么查,中间出了什么差错?
我把我支票背面的影印版贴上(我哥的endorsement隐去),大家看看。
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s*a
2
这是个真实的故事,我在豆瓣上看着这个女孩娓娓道来她的5年,突然觉得这个世界很
无奈,只希望我们都能珍惜自己身边的人..
一辈子那么长,不要走着走着就这么丢了自己,丢了自己心爱的人...
正文:
4月9日 我们已经有10个月没有见了。
我6点钟起床,化妆,换衣,出门
赶地铁,到达机场,换登机牌,等待,登机
整个人紧张的好像被抽空了一样
我就要见到你了,曾经的朝夕相处
当飞机呼啸着降落在上海的浦东机场的时候。
我却挣扎着不愿意下飞机。
旁边座位的漂亮妈妈领着两个混血儿子一跳一跳的离开
后座的西装大叔挺着啤酒肚晃晃悠悠的下了飞机
漂亮端庄的空姐们已经在收拾旅客们离开的机舱
我却坐在靠窗的位置 时时不愿意离开。
近乡情更怯 不敢见来人。
我怕整夜未眠的黑眼圈让我看起来没有那么神采奕奕
我怕这个短途飞机让我的眼妆花掉
我怕我新买的长裙子你不喜欢
好吧,其实我是怕,怕我见到你,是否能回到10个月之前
我们还相亲相爱 朝朝暮暮的10个月前。
我磨磨蹭蹭 我犹犹豫豫 我挣扎再三
我还是要下飞机 ,穿过漫长的走道跟在热闹的人群后面
我还是第一眼在明亮的候机大厅看到你
怎么说呢
头发比离开我的时候短了些
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e*g
3
【东方台秘书处编者按】卢台长不但在电台里用《白话佛法》、《玄艺综述》、《玄
艺问答》救度众生,平时每天还要接待预约听众救苦众生,他更拨出宝贵的时间给年青
人讲佛法,他用最浅显的语言,跟青年人讲在现实生活当中怎么样运用佛法。卢台长说
青年人就是我们学佛人未来的希望,只有青年人学好了佛法我们今后的佛法才能代代相
传,所以他对年青人学佛法相当的重视。现在有青年佛友把台长在给青年人的开示整理
成文字,让更多的人收益,应一些网友要求我们把文字稿刊出,让更多的网友给自己的
孩子和年轻一代看一看,能够让年青人更好的学佛,等到我们百年之后也有人为我们来
超度,实际上这就是传承和弘扬佛法。
很感谢大家在下雨天也来听台长开示。昨天在网上放了一张秘书处工作的照片,网
友反响很热烈,都说秘书处工作条件不好,坐着塑料板凳(笑声),但是大家看上去还是
很开心,个个都是小菩萨。实际上青年人拨出宝贵的时间不去吃喝玩乐,不去做坏事,
来这里学学佛,这个就叫法喜充满,为什么叫法喜充满呢?因为当一个人学佛的时候,
他的气场是不一样的,法喜是什么意思呢?因为你闻到了佛法,你知道有救了,不怕了
,这个时候就叫法喜。当你怕事情发生的时候,你就没有法喜。如果医生给你一个证明
上面写你可能会长肿瘤,你回到家就瘫掉了。有个年青人,台长告诉他要小心开车,结
果车撞坏了,人没有事,就因为他是念经的。比如:前天台长就知道有交通警察要找我
麻烦,我知道了就很当心,一边开车一边念经,果然,被警察拦下来了,要测酒精,测
了一下就放行了。台长是从来不喝酒的,我开车就不怕交通警察来测,但是我就知道有
交通警察要来找我的麻烦,但是避开了就没有事了。现在我经常跟你们讲,感情上要当
心,我会说:小伙子啊,你跟女朋友谈恋爱要当心噢,结果呢,有的人相信,避开了吵
架,继续好下去。有的人不相信,吵一架,说不定散了。今天坐在下面的人,隔了两个
星期,有的人气场很好,有的人就很不好,这就是学与不学佛的差异。
中国自古以来就有句话,属什么象什么,这就是说你属什么就具有那个属相的性格
,这就跟西方的星座一样,什么样的星座是什么样的个性。很多人就觉得星座很准,说
:我是天秤座的,你看我这个人公平吗?台长是狮子座的,就非常有power (力量),实
际上人要正,就会有power(力量),人不正就不会有power(力量)。比方说你偷人家
东西了,说人家坏话了,心里有鬼了,你看到人就会躲躲闪闪的。就象你做坏事回到家
里,爸爸妈妈问你, 你到哪里去了?你就会胆战心惊的说,我没有到哪里去。如果你是
去补课的,你一定会理直气壮的说,我补课去了。其实学佛就是修心,很多人说:“我
们修心不知道有没有报应,我不相信。”实际上报应是如影随形的,报应是报在心里,
你们的身体就象手机,五脏六腑就象是手机里的电池板,它已经贮存在里面了,你动坏
脑筋它贮存在里面,别人打给你的电话也贮存在里面了。等到最后你打开手机,所有的
信息都能收到。就是你死的时候,就象手机最后结帐的时候,一打出来是多少帐单(鼓
掌),为什么人死的时候会很痛苦啊?因为他想到的太多了,“我对不起母亲,我对不
起孩子。”因为他死的时候才知道原来我做错了那么多事情,你们现在还不会想,因为
你们还年轻,还觉得自己做的没有错,想想你们年轻的时候其实已经做错了很多事情。
你们婚姻不圆满,就是做错了许多事情,对不对?为什么?不会处理问题,好的时候不
知道珍惜,等到不好的时候还要相互骂,还要吵还要闹,那就更加罪上加罪了,所以一
定要懂得珍惜,在有的时候不珍惜,在没有的时候又想寻找,人就是这么个毛病。好的
时候不珍惜,等到一旦没有了就会想为什么人家有我没有,实际上就是你自己弄掉的。
有时候人总是不从自己心里想想自己的问题,你们女孩子都会戴戒指或是项链,刚戴上
去的时候感觉很好,走出去觉得别人都在看我的项链,戴了一年之后,就完全没有感觉
了,麻木了。一个人显露的心是很大的,什么事情都喜欢显露出来,包括好的和不好的
。告诉你们,大家学佛要用心来学佛,你们沐浴着观世音菩萨的阳光,所以你们什么都
不会怕了,因为有观世音菩萨保佑你们,一求就灵。年三十在这里烧头香的人,几乎80
%都灵验了,前几天打电话进来的听众还说,他年三十求的事情都如愿了。人要有良心
,要对得起菩萨,要做对的事情,做错的事情的人,他会很难过。当一个人做错事情的
时候,他会自责,之后就会影响他的心理平衡,然后就会影响内分泌,肠胃不好了,接
下来开始生病了。生病的人是没有运气的,躺在病床上的人就说明气血不通。我们做人
要实实在在,现在在社会上有太多人是做给人家看的,做的太假了,有的人给菩萨磕头
都是假的。大家要用心来学佛,现在大陆有许多学习台长法门的学习小组,一起学习佛
法还一起放生,台长看了那些照片很感动。年轻人最大的毛病就是变,念经灵验了就来
听课了,不灵验就不来了。
现在许多年青人都有感情婚姻的问题,台长教你们一个能让婚姻圆满的方法,那就
是你选择一个你最喜欢的对方的优点,其它的都忽略。比如这个人什么都好,就是不爱
干净,但是算了,就帮他洗洗吧。或是这个人长的很帅,带出去非常有面子,那其它的
一些缺点就不要去想了。一个人不可能十全十美,你只要注重他某一点就可以了。你要
抓住一个人的一个优点,你就觉得自己划的来了,“我决定奉献”,那你就不会觉得自
己吃亏,就会觉得自己活的舒服了,那你的婚姻就会圆满下去,因为你认为他某一点特
别好,是你愿意嫁给他的原因,其它的你都会原谅他的,因为一原谅他,你的感情运就
会顺利(笑声)。人的毛病就是不容易原谅人家,在佛教上讲就是嫉妒,连夫妻间都会
嫉妒,比如生了孩子,老婆会把爱转移到孩子身上,那老公就会嫉妒自己的爱变少了。
人的本性就是会嫉妒,一个人学佛境界一提高,他会原谅人家,原谅人家的人自己会过
的舒服。你不要以为老伯伯,老妈妈比你们过的辛苦,虽然你们的经济上有可能会比较
好,你们表面上的样子,身体上比他们好,实际上你们的痛苦是从心里发出来的,你们
不比他们活的容易。为什么?年青人心苦啊,而年纪大的呢,是辛苦。因为年青人容易
想不通,感情工作上都有问题啊。一个人不要做错事情,因为做错事情,会象视频一样
记录下来的。我们搞广播的,我经常跟节目主持人讲,你不要让自己遗憾终生,做事情
尽量不要做错,做错了之后你就会永远不断的后悔,录音说错一段话,在电台上重播放
,放一次就会后悔一次。所以让你们做事情的时候,要多想,叫前思后虑,思前想后啊
。什么事情多想想,就不会给你产生后遗症了,很多在人间的东西,明明你喜欢的,你
不能去喜欢它,明明你很爱他的,你不能去爱他。克制很难,在佛法界来说,就叫“戒
”。以戒为本,什么叫以戒为本啊?就是你戒了之后,你的本性良心就会出现并发生改
变了。一个不懂得戒的人,他就不懂得生活。好的东西拼命吃,一定吃坏你身体。台长
出去应酬,是滴酒不沾的,别人喝白酒,我喝白开水;他们喝黄酒,我喝茶叶水;他们
喝葡萄酒,我喝可乐水(笑声)。大家要知道,我们活在这个世上,开心一下,笑一笑
,很多事情就过去了,有什么过不了的事情啊?我看出一个人曾经自杀过,结果她说是
因为当年没有加入红卫兵,没有面子,就动了自杀的念头。人要气量大,要甩的开,想
想人家很可怜,算了,我原谅他吧,菩萨说过原谅人家就是原谅自己。人一定要懂得吃
亏就是占便宜啊,不吃亏的人是得不到便宜的(掌声)。人家不做,你做,人家不加班
,你加班,你吃了这些亏,之后你就会得到别人的认可,种善因得善果。
人不要愚痴,明明做不到的事,非要去做,明明求不到的事,非要去求。愚痴的人
并不是没有知识,他们很多是有知识的,他们是不懂得用智慧来使用他们的知识,所以
是指在善恶因缘当中不知道善恶夙业的所造,真正愚痴的人是不知道因果的。现在的人
很现实,现在的人嫉恶如仇,但现在的人又不懂得善恶。明明是坏的事情,他以为是好
的,明明是好的事情,他以为是坏的。你们年青人要把老一辈不好的东西舍弃,老一辈
身上有许多不好的毛病,比如:爱管闲事,嘴巴唠唠叨叨,不知道自己已经到了垂暮之
年了。我们要放下自己,年纪越来越大了,就要修身养性,刚才台长教你们的是好方法
,只要找到一个对方的优点,就一直无怨无悔,如果找不到合适的,无所谓,就随缘吧。
世界上所有的凡人都没有办法洗涤内心的污垢,因为我们每个人都有罪孽,我们从
小到大都想过不好的事情,我们做过很多爸爸妈妈不知道的事情,我们做过很多对不起
人的事情,那么这种事情怎么办呢?按照西方教来讲,就是进一间房间,跟牧师说。而
我们这里的方法更好,因为没有牧师,你自己直接跟观世音菩萨讲,观世音菩萨就是妈
妈,你跪在那里,爱怎么讲就怎么讲,没有人听的见(笑声,掌声),那就更好。你跟
菩萨讲:观世音菩萨我做错了。你看看灵不灵?母亲一定是爱孩子的,一个人一定要保
持一颗清静心,不要念头乱生,什么叫念头乱生啊?就是一会生出这个念头,一会生出
那个念头。看到别人好了,要真正的从心里为人家高兴,看到别人痛苦也要为人家感到
难过,这样才算是真正修心念经的人(鼓掌)。
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s*y
4
我们换个标题灌吧,楼都彻底歪掉了:)
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i*t
5
直接问中国银行不是挺好的?

【在 T******o 的大作中提到】
: 我父亲今年6月大腿股骨骨折,在协和做髋关节置换术。
: 我想给他从美国汇钱,因父亲行动不便,写了一张$8000的支票给我哥。
: 支票7月中寄出,我哥在中国银行开了账户,将支票存入。
: 我8月底看到$8000从我checking account划走,就觉得一切OK了。
: 12月我哥说,钱还没有到帐。我上网查了一下,很多人都3个月才到帐,我想中国的银
: 行可能hold一下,因数额比较多。
: 现在一个月过去了,钱还没有到帐。请问我怎么查,中间出了什么差错?
: 我把我支票背面的影印版贴上(我哥的endorsement隐去),大家看看。

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Y*2
6
看完了,很难受~

【在 s****a 的大作中提到】
: 这是个真实的故事,我在豆瓣上看着这个女孩娓娓道来她的5年,突然觉得这个世界很
: 无奈,只希望我们都能珍惜自己身边的人..
: 一辈子那么长,不要走着走着就这么丢了自己,丢了自己心爱的人...
: 正文:
: 4月9日 我们已经有10个月没有见了。
: 我6点钟起床,化妆,换衣,出门
: 赶地铁,到达机场,换登机牌,等待,登机
: 整个人紧张的好像被抽空了一样
: 我就要见到你了,曾经的朝夕相处
: 当飞机呼啸着降落在上海的浦东机场的时候。

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l*9
7
谢谢分享。
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n*1
8
得,我把SUNNYDAY赶跑了,SORRY
在细胞里做筛选的还是很多吧,筛inhibitor,si/shRNA screening啥的

【在 s******y 的大作中提到】
: 我们换个标题灌吧,楼都彻底歪掉了:)
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h*a
9
结局会不同么

【在 Y*****2 的大作中提到】
: 看完了,很难受~
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s*y
10
你说的这个情况,其实已经是已经有了一个working model, 属于比较
比较后期的screening了,这些是比较常规的手段,使用的人也比较多,
但是,即使如此,除非你是大牛,或者大牛实验室里的,否则要写在grant 里
也得万分小心。因为审批者如果要找岔子,就说:
“你这个筛选,万一什么都筛不到,你这个项目不就全完了? 而且即使得到一些结果,如果和你预计的不相符,那么你下面的几个aim 就得全部改写,那么就完全是一个新的proposal 了。我们不能直接给一个我们还没看到的全新的proposal 发钱。”
这种批评,我已经是亲身吃过好几次亏了。即使我后来在resubmission 里面
拼命强调这个筛选将会是多么多么的重要,然后在初始数据里,说我已经筛过
一次了,而且得到了几个非常重要的线索。。。即使如此,还是被锯了!
你可能不知道各种批资金的机构,对于我们这种非牛人的实验室,会是多么的刁难,最好就是告诉她们说:啊,这个筛选的过程啊,我们已经作完了,然后得出了
这个和那个非常重要的线索,我们这个proposal 会跟踪作下去,这样才有一线
希望能拿到钱。
所以你说的那个实验方法,虽然是大家都很常用的一个方法,但是一般人(至少
我)是不敢写到grant proposal 里面去的。]
除非你是专门作优化筛选方法的,那个就另当别论了。
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R*y
11
他不是脚踏两只船,骑驴找马吗?人品问题啊,可鄙。
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s*y
12
呵呵,还是专题专用吧。不要担心,我心眼没有那么小。

【在 n***1 的大作中提到】
: 得,我把SUNNYDAY赶跑了,SORRY
: 在细胞里做筛选的还是很多吧,筛inhibitor,si/shRNA screening啥的

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Y*2
13
不会,这个男的不行

【在 h********a 的大作中提到】
: 结局会不同么
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s*y
14
在哺乳动物里面有一个麻烦就是,如果用细胞来筛选,因为细胞不能代表全体,
所以筛出来的结果不一定有意义。
而如果用整个动物来筛选,那么因为费用太高,时间太长,一般实验室承受不起。
前不久听说过一篇文章,直接往老鼠脑子里注射RNA来筛选。我第一个反应就是:
我的天哪!这得花多少钱啊!
所以哺乳动物里面,一般都是已经有了比较清晰的思路和初步数据,比方说已经
大概对某个基因的功能心里有个数了,才会作你说的那种“screening”,
但是因为已经有了一个期望值,就很难避免一些解读数据时候的bias.
所以这个哺乳动物里面的筛选,目前还不是一个主流。
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w*e
15
祝福所有LD的情侣!
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b*l
16
哈哈,我们这里有个 AP,我们戏称他是“玩儿蛋的”。他用鸡蛋来筛选,做大脑发育
。方法是把 RNA 注到鸡胚胎大脑的中央,然后用电场控制其向一侧扩散,这样可以用
另一侧做 control。找到了想要的故事后,再在老鼠上验证,然后在病人的 samples
里再次验证。上次来我们组做报告,着重强调了鸡蛋的方便和便宜。

【在 s******y 的大作中提到】
: 在哺乳动物里面有一个麻烦就是,如果用细胞来筛选,因为细胞不能代表全体,
: 所以筛出来的结果不一定有意义。
: 而如果用整个动物来筛选,那么因为费用太高,时间太长,一般实验室承受不起。
: 前不久听说过一篇文章,直接往老鼠脑子里注射RNA来筛选。我第一个反应就是:
: 我的天哪!这得花多少钱啊!
: 所以哺乳动物里面,一般都是已经有了比较清晰的思路和初步数据,比方说已经
: 大概对某个基因的功能心里有个数了,才会作你说的那种“screening”,
: 但是因为已经有了一个期望值,就很难避免一些解读数据时候的bias.
: 所以这个哺乳动物里面的筛选,目前还不是一个主流。

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g*t
17
在校内上看到了。从描述来看,那小三的确挺贤妻良母的。优胜劣汰。这个没办法。把
自己也变得很贤惠,这样即使自己的男人跟别人跑了,也可以去抢别人的男人。
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s*y
18
嗯。。。这个其实是一个很有意思的手段。哈哈哈。
不过我好奇地问一下,为什么用鸡蛋啊?他用的那个手段,在青蛙里岂不是
更容易办到?

【在 b*****l 的大作中提到】
: 哈哈,我们这里有个 AP,我们戏称他是“玩儿蛋的”。他用鸡蛋来筛选,做大脑发育
: 。方法是把 RNA 注到鸡胚胎大脑的中央,然后用电场控制其向一侧扩散,这样可以用
: 另一侧做 control。找到了想要的故事后,再在老鼠上验证,然后在病人的 samples
: 里再次验证。上次来我们组做报告,着重强调了鸡蛋的方便和便宜。

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f*e
19
20出头的年纪变化多,加上LD。
grow apart很常见的。
没关系,至少mm年轻,心态还好,以后会幸福的。
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a*k
20
鸡胚啊,绝好的发育model之一了
神经管单侧电转,另外一侧天然control
Xenopus和zebrafish里面也有人做,当然老鼠里面也有人做,不过前两个胚胎太小,后
面一个取胚胎太难,根本不可能做筛选。鸡胚一天弄个几十上百电转都行,后面几个就
很麻烦了,不光要手巧还要运气好。
当然纯做鸡胚我还是觉得死路一条,一般老鼠实验室用来做前期筛选,生化实验室用来
做后期in vivo是再好不过了。仅仅知道神经发育这么干非常方便,不了解其他tissue
的。

【在 s******y 的大作中提到】
: 嗯。。。这个其实是一个很有意思的手段。哈哈哈。
: 不过我好奇地问一下,为什么用鸡蛋啊?他用的那个手段,在青蛙里岂不是
: 更容易办到?

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l*l
21
long distance....我以后再不也不试LD了。。太多弊端。
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a*k
22
大牛也不是经常写的,一般都是用手头的钱做点东西出来了再写。
我觉得遗传实验室也很少写要做genetic screen吧?至少也要screen出几个东西,做了
点preliminary才敢写到grants里面。不然十个有八个会看你不爽。

果,如果和你预计的不相符,那么你下面的几个aim 就得全部改写,那么就完全是一个
新的proposal 了。我们不能直接给一个我们还没看到的全新的proposal 发钱。”
最好就是告诉她们说:啊,这个筛选的过程啊,我们已经作完了,然后得出了

【在 s******y 的大作中提到】
: 你说的这个情况,其实已经是已经有了一个working model, 属于比较
: 比较后期的screening了,这些是比较常规的手段,使用的人也比较多,
: 但是,即使如此,除非你是大牛,或者大牛实验室里的,否则要写在grant 里
: 也得万分小心。因为审批者如果要找岔子,就说:
: “你这个筛选,万一什么都筛不到,你这个项目不就全完了? 而且即使得到一些结果,如果和你预计的不相符,那么你下面的几个aim 就得全部改写,那么就完全是一个新的proposal 了。我们不能直接给一个我们还没看到的全新的proposal 发钱。”
: 这种批评,我已经是亲身吃过好几次亏了。即使我后来在resubmission 里面
: 拼命强调这个筛选将会是多么多么的重要,然后在初始数据里,说我已经筛过
: 一次了,而且得到了几个非常重要的线索。。。即使如此,还是被锯了!
: 你可能不知道各种批资金的机构,对于我们这种非牛人的实验室,会是多么的刁难,最好就是告诉她们说:啊,这个筛选的过程啊,我们已经作完了,然后得出了
: 这个和那个非常重要的线索,我们这个proposal 会跟踪作下去,这样才有一线

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d*k
23
这个可以算摘要吗?

【在 g*****t 的大作中提到】
: 在校内上看到了。从描述来看,那小三的确挺贤妻良母的。优胜劣汰。这个没办法。把
: 自己也变得很贤惠,这样即使自己的男人跟别人跑了,也可以去抢别人的男人。

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p*m
24
嗯 NIH基本不会接受一个screen-based proposal...

【在 a********k 的大作中提到】
: 大牛也不是经常写的,一般都是用手头的钱做点东西出来了再写。
: 我觉得遗传实验室也很少写要做genetic screen吧?至少也要screen出几个东西,做了
: 点preliminary才敢写到grants里面。不然十个有八个会看你不爽。
:
: 果,如果和你预计的不相符,那么你下面的几个aim 就得全部改写,那么就完全是一个
: 新的proposal 了。我们不能直接给一个我们还没看到的全新的proposal 发钱。”
: 最好就是告诉她们说:啊,这个筛选的过程啊,我们已经作完了,然后得出了

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S*e
25
不顶说不过去了... mm加油...
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d*p
26
这种以screening为主的Proposal,牛人也拿不到钱的,这种high risk的project, NIH
基本没戏。听牛人们讨论,private fund还可以考虑一下。筛完了以后,有有意思的东
西了,NIH grant 才有戏.
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g*t
27
可以。结局是女人公安静的自动退位。

【在 d**k 的大作中提到】
: 这个可以算摘要吗?
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s*y
28
哦,我对这个方向还真的不熟悉呢。我们这里做鸡蛋的都是搞疫苗的,
或者用来表达一些特别难表达的蛋白。
你说的转在鸡胚里面的,是RNAi之类的东西么? 还是可以有比较长效的东西可以
转进去?
另外,鸡胚多大的时候转啊?

tissue

【在 a********k 的大作中提到】
: 鸡胚啊,绝好的发育model之一了
: 神经管单侧电转,另外一侧天然control
: Xenopus和zebrafish里面也有人做,当然老鼠里面也有人做,不过前两个胚胎太小,后
: 面一个取胚胎太难,根本不可能做筛选。鸡胚一天弄个几十上百电转都行,后面几个就
: 很麻烦了,不光要手巧还要运气好。
: 当然纯做鸡胚我还是觉得死路一条,一般老鼠实验室用来做前期筛选,生化实验室用来
: 做后期in vivo是再好不过了。仅仅知道神经发育这么干非常方便,不了解其他tissue
: 的。

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S*f
29
没劲,害我看半天
这姑娘的bf其实挺在乎她的还
就为了一姿态自己放弃
演戏演太过了

【在 s****a 的大作中提到】
: 这是个真实的故事,我在豆瓣上看着这个女孩娓娓道来她的5年,突然觉得这个世界很
: 无奈,只希望我们都能珍惜自己身边的人..
: 一辈子那么长,不要走着走着就这么丢了自己,丢了自己心爱的人...
: 正文:
: 4月9日 我们已经有10个月没有见了。
: 我6点钟起床,化妆,换衣,出门
: 赶地铁,到达机场,换登机牌,等待,登机
: 整个人紧张的好像被抽空了一样
: 我就要见到你了,曾经的朝夕相处
: 当飞机呼啸着降落在上海的浦东机场的时候。

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p*m
30
鸡胚里做electroporation是经典系统 什么都能做基本上 近些年大家一般都用retrovi
rus 给你看个不错的review
http://www.nature.com/ncb/journal/v1/n8/full/ncb1299_E203.html

【在 s******y 的大作中提到】
: 哦,我对这个方向还真的不熟悉呢。我们这里做鸡蛋的都是搞疫苗的,
: 或者用来表达一些特别难表达的蛋白。
: 你说的转在鸡胚里面的,是RNAi之类的东西么? 还是可以有比较长效的东西可以
: 转进去?
: 另外,鸡胚多大的时候转啊?
:
: tissue

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n*u
31
恩,如果努力把说不准可以挽回
不过那姑娘可能是觉得别人背叛了自己
有些心灰意冷了
再加上平时相处已经没有热情了,
也没有试图去维护经营
火快灭了,正好又吹来一阵风,吹熄了。。。

【在 S*********f 的大作中提到】
: 没劲,害我看半天
: 这姑娘的bf其实挺在乎她的还
: 就为了一姿态自己放弃
: 演戏演太过了

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s*y
32
谢谢!我因为不是具体作神经的,对这个还真的没有怎么听说过 :)
有空得看看。

retrovi

【在 p*****m 的大作中提到】
: 鸡胚里做electroporation是经典系统 什么都能做基本上 近些年大家一般都用retrovi
: rus 给你看个不错的review
: http://www.nature.com/ncb/journal/v1/n8/full/ncb1299_E203.html

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h*a
33
谁努力?

【在 n****u 的大作中提到】
: 恩,如果努力把说不准可以挽回
: 不过那姑娘可能是觉得别人背叛了自己
: 有些心灰意冷了
: 再加上平时相处已经没有热情了,
: 也没有试图去维护经营
: 火快灭了,正好又吹来一阵风,吹熄了。。。

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m*5
34
谢谢回复!!
说到sorting,你有用FACS-Gal sort过lacz expressing line么?
protocol到处都有,但文章上大家还是爱用EGFP/DsRed expressing来 sorting,是有
什么trick在里面么 ?

【在 s******y 的大作中提到】
: 我们换个标题灌吧,楼都彻底歪掉了:)
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n*u
35
显然是两个人了
不过局外人不了解他们的具体情况,也只是发议论而已

【在 h********a 的大作中提到】
: 谁努力?
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s*y
36
没有这么做过,我们都是用荧光蛋白的。
如果是用Gal-Lacz系统的话,就必须把细胞给固定了,这样筛出来的就不是
活细胞了.
而且LacZ染色一般都是黑咕隆咚的,属于absorption-based screening,
我不知道一般的sorting device 有没有能力用这种方法来分细胞,即使有,也
需要比较强的光才能分出染色和没有染色的细胞。

【在 m******5 的大作中提到】
: 谢谢回复!!
: 说到sorting,你有用FACS-Gal sort过lacz expressing line么?
: protocol到处都有,但文章上大家还是爱用EGFP/DsRed expressing来 sorting,是有
: 什么trick在里面么 ?

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r*n
37
两地分居基本上很难。我觉得他们当时决定分开的时候就太单纯了。
感情的东西是经不起考验的。尤其是LD的考验

【在 n****u 的大作中提到】
: 显然是两个人了
: 不过局外人不了解他们的具体情况,也只是发议论而已

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m*5
38
有一个protocol是用FACS-Gal一个荧光底物,被LacZ催化后释放出FITC,
看着不错,而且针对活细胞,不过确实在细胞suspension后多了一步处理,而且背景可
能会比较大

【在 s******y 的大作中提到】
: 没有这么做过,我们都是用荧光蛋白的。
: 如果是用Gal-Lacz系统的话,就必须把细胞给固定了,这样筛出来的就不是
: 活细胞了.
: 而且LacZ染色一般都是黑咕隆咚的,属于absorption-based screening,
: 我不知道一般的sorting device 有没有能力用这种方法来分细胞,即使有,也
: 需要比较强的光才能分出染色和没有染色的细胞。

avatar
h*a
39
恩,等待也是一种努力

【在 n****u 的大作中提到】
: 显然是两个人了
: 不过局外人不了解他们的具体情况,也只是发议论而已

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s*y
40
听起来应该是一个包含着荧光分子的东西先渗透到细胞里面去,
这个即使可以用在活细胞上,对细胞也不好。而且背景肯定很大

【在 m******5 的大作中提到】
: 有一个protocol是用FACS-Gal一个荧光底物,被LacZ催化后释放出FITC,
: 看着不错,而且针对活细胞,不过确实在细胞suspension后多了一步处理,而且背景可
: 能会比较大

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n*u
41
唉,大家都是那么走过来的,不经世事洗礼也难走向成熟
LD确实严峻,在一起一句话一个拥抱就解决的事情,LD一天电话都不说清

【在 r*******n 的大作中提到】
: 两地分居基本上很难。我觉得他们当时决定分开的时候就太单纯了。
: 感情的东西是经不起考验的。尤其是LD的考验

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m*5
42
从protocol上来说是这样的……

【在 s******y 的大作中提到】
: 听起来应该是一个包含着荧光分子的东西先渗透到细胞里面去,
: 这个即使可以用在活细胞上,对细胞也不好。而且背景肯定很大

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c*i
43
问题根本不是那个女生贤不贤惠
介入别人的感情就已经错了
就算他们之间的感情已经不在了
也要男生去做了断,她去给人家写信算什么
那个男生也太恶心,脚踏两只船,他以为他是张无忌啊
所以,挽回又如何
有些事情一旦发生就再也回不去了
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f*e
44
未必是两只船,可能男生先暧昧着呢。
另外那个女生不过是为自己争取,也没有什么吧,遇到喜欢的人不争取对不起自己。
这个女煮饺也可以去抢回自己的男人。
这个世界诱惑很多,最好的办法是两个人一起面对和抵抗,而不是责备别人,有良心的
你说说她就走
了,predatory的男女你玩得过嘛。
世界本来就不公平,自己不去守卫自己的东西,也不去抢,怨不得别人。

【在 c****i 的大作中提到】
: 问题根本不是那个女生贤不贤惠
: 介入别人的感情就已经错了
: 就算他们之间的感情已经不在了
: 也要男生去做了断,她去给人家写信算什么
: 那个男生也太恶心,脚踏两只船,他以为他是张无忌啊
: 所以,挽回又如何
: 有些事情一旦发生就再也回不去了

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c*y
45
555~~~好想哭啊.
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c*i
46
可是照那个女孩子描述的来看,已经不是暧昧那么简单了
为自己争取是没错,可是也要看情况而论,伤害别人就是她的不对
如果不知道男生的情况就算了
她明明知道还要那样做,骚扰女生,而且人家在一起的时候还一直联络男生
就算打着爱情的旗号,为何不给那个男生时间去自己解决
说到底也就是个自私的人
跟这样子的人在一起,她“爱”你还好,有问题的时候就……
世界上的诱惑是很多,难道女生就没有遇到过吗
为什么有人能坚持,有人就不行呢
退一万步讲,如果那个男生变心的时候能坦白跟女生讲清楚,还好些
他那样做到底什么意思啊
有些人可以接受有残缺的爱,有些人就有自己的坚持
不是每个人都喜欢去“抢”
可惜了一段纯纯的爱,祝福那个女孩子早日找到自己真正的幸福
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f*e
47
I would think it's because you value pride and intergrity over the person
you love.
I do too, I am sure a lot of girls think the same way.
But some girls will value the man over anything else, and they will get
the things you want even may not be the way you want it.

有些人可以接受有残缺的爱,有些人就有自己的坚持
不是每个人都喜欢去“抢”

【在 c****i 的大作中提到】
: 可是照那个女孩子描述的来看,已经不是暧昧那么简单了
: 为自己争取是没错,可是也要看情况而论,伤害别人就是她的不对
: 如果不知道男生的情况就算了
: 她明明知道还要那样做,骚扰女生,而且人家在一起的时候还一直联络男生
: 就算打着爱情的旗号,为何不给那个男生时间去自己解决
: 说到底也就是个自私的人
: 跟这样子的人在一起,她“爱”你还好,有问题的时候就……
: 世界上的诱惑是很多,难道女生就没有遇到过吗
: 为什么有人能坚持,有人就不行呢
: 退一万步讲,如果那个男生变心的时候能坦白跟女生讲清楚,还好些

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c*i
48
一个人如果连自己都不爱的话,会真的懂得爱别人吗
她如果不爱那个男生,为何自己不去暧昧,难道她一个人就没有寂寞辛苦的时候吗
人不是物品,有自己的感情
正是因为喜欢他,尊重他,才给他自由让他自己选择
实际上她还是为他留有余地,可惜的是男生自己不懂得珍惜罢了
至于另外一个女生
位置倒过来,她不一定能为他在千里之外坚持那么久
她不惜伤害别人,所做的不过只是自私的想要留那个男生在自己身边罢了
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w*s
49
聪明的女孩不是选择退出和成全,而是选择争取和努力,什么都可以大方,唯独爱情自
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b*l
50
抓虫:上海有长安街么?
请修改以后再发表。
》我们晚上在一直沿着长安街一直走一直走。
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A*e
51
看的我一把鼻涕一把眼泪的
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b*2
52
要我也选择退出。
因为我要的是爱我的人。男主角明显已经爱别人胜过爱自己了。
离开只不过是暂时难过摆了,前面还有更值得自己珍惜的人的。
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x*m
53
看完了。。
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S*9
54
看8卦都讲缘分的(像这篇,我怎么也看不进去),更何况搞对象呢。
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w*e
55
看哭了
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w*e
56
看哭了
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j*t
57
叶子你错了。
这不仅仅是姿态。就好像莉香要提前坐火车离开一样。

【在 S*********f 的大作中提到】
: 没劲,害我看半天
: 这姑娘的bf其实挺在乎她的还
: 就为了一姿态自己放弃
: 演戏演太过了

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S*f
58
好吧,我错了
莉香是提前离开的啊?

【在 j**********t 的大作中提到】
: 叶子你错了。
: 这不仅仅是姿态。就好像莉香要提前坐火车离开一样。

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j*j
59
这版排的。。。小女生是这样的吧,当场放弃不是她不自信,其实是自我保护过度,然
后太自信却又心软。宁肯自己锥心,也不能让别人蹭花皮肤。
哎,情商是一种,很玄的东西。。。

【在 s****a 的大作中提到】
: 这是个真实的故事,我在豆瓣上看着这个女孩娓娓道来她的5年,突然觉得这个世界很
: 无奈,只希望我们都能珍惜自己身边的人..
: 一辈子那么长,不要走着走着就这么丢了自己,丢了自己心爱的人...
: 正文:
: 4月9日 我们已经有10个月没有见了。
: 我6点钟起床,化妆,换衣,出门
: 赶地铁,到达机场,换登机牌,等待,登机
: 整个人紧张的好像被抽空了一样
: 我就要见到你了,曾经的朝夕相处
: 当飞机呼啸着降落在上海的浦东机场的时候。

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A*e
60
呼唤摘要

【在 s****a 的大作中提到】
: 这是个真实的故事,我在豆瓣上看着这个女孩娓娓道来她的5年,突然觉得这个世界很
: 无奈,只希望我们都能珍惜自己身边的人..
: 一辈子那么长,不要走着走着就这么丢了自己,丢了自己心爱的人...
: 正文:
: 4月9日 我们已经有10个月没有见了。
: 我6点钟起床,化妆,换衣,出门
: 赶地铁,到达机场,换登机牌,等待,登机
: 整个人紧张的好像被抽空了一样
: 我就要见到你了,曾经的朝夕相处
: 当飞机呼啸着降落在上海的浦东机场的时候。

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H*H
61
放弃是对的。
这种裂痕一旦出现,会越来越大。还不如早做了断。
再次告诫,恋人最好不要分开,至少不要太久。
越是两个人幸福过,一个人的寂寞就越有杀伤力。
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w*i
62
看到“你从我的世界消失了,但是为什么每天每晚我还这么想念你”的时候,真的眼泪
刷刷的下来了
这篇文章给了我很多鼓励~

【在 s****a 的大作中提到】
: 这是个真实的故事,我在豆瓣上看着这个女孩娓娓道来她的5年,突然觉得这个世界很
: 无奈,只希望我们都能珍惜自己身边的人..
: 一辈子那么长,不要走着走着就这么丢了自己,丢了自己心爱的人...
: 正文:
: 4月9日 我们已经有10个月没有见了。
: 我6点钟起床,化妆,换衣,出门
: 赶地铁,到达机场,换登机牌,等待,登机
: 整个人紧张的好像被抽空了一样
: 我就要见到你了,曾经的朝夕相处
: 当飞机呼啸着降落在上海的浦东机场的时候。

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s*r
63
距离是个问题.
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c*o
64
大哭
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h*0
65
这个格式的东西,看起来也太累人了吧。
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I*e
66
我也觉得.

【在 h*******0 的大作中提到】
: 这个格式的东西,看起来也太累人了吧。
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a*p
67
哎,,人生啊
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w*b
68
拖这么久,女人都神经了
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y*y
69
唉,这种事情发生了怪谁呢? 女人都是比较珍惜和痴情的,男人要是不珍惜你说又能
怎么样?
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g*s
70
我居然看完了
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h*n
71
哭~~~
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S*9
72
烦死我了。背叛谁也不要背叛一个文艺女青年,她专门会打双空行的长篇墨迹文来烦不
相干的人。
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S*9
73
更正:空了三行

【在 S****9 的大作中提到】
: 烦死我了。背叛谁也不要背叛一个文艺女青年,她专门会打双空行的长篇墨迹文来烦不
: 相干的人。

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j*n
74
姐妹儿,求你了下次换个格式吧。 这个看起来太累了。不过鼓励下坚强的妹妹, 一切
都会好起来得!
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e*l
75
真不该看完这篇文章
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z*t
76
没什么啦, 那男主人公现在背叛她总好过结婚之后,帅的男人就是这样,总有女生围
着他转,衣食住行都细心照料。
那男人话不多,人又帅,简直少女杀手。可是他什么家务都不干,回头遇到对他好的,
他就把旧的甩了。说实话这样男人不是做丈夫的人选,可惜20多岁的年轻女生永远看不
透着一点。
人一辈子总要经历失恋,被甩或者甩别人。当成体验生活吧。

【在 s****a 的大作中提到】
: 这是个真实的故事,我在豆瓣上看着这个女孩娓娓道来她的5年,突然觉得这个世界很
: 无奈,只希望我们都能珍惜自己身边的人..
: 一辈子那么长,不要走着走着就这么丢了自己,丢了自己心爱的人...
: 正文:
: 4月9日 我们已经有10个月没有见了。
: 我6点钟起床,化妆,换衣,出门
: 赶地铁,到达机场,换登机牌,等待,登机
: 整个人紧张的好像被抽空了一样
: 我就要见到你了,曾经的朝夕相处
: 当飞机呼啸着降落在上海的浦东机场的时候。

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c*n
77
天啊!~不用梨花体不能写文章吗,梨花体就算了,还空行!
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f*e
78
要是我怎么也的抽他一顿,然后把那个女的收拾一顿。
想找新人不会直接说嘛,一边捞一个真萎缩阿。
文艺女青年应该剽悍一些。

【在 z**t 的大作中提到】
: 没什么啦, 那男主人公现在背叛她总好过结婚之后,帅的男人就是这样,总有女生围
: 着他转,衣食住行都细心照料。
: 那男人话不多,人又帅,简直少女杀手。可是他什么家务都不干,回头遇到对他好的,
: 他就把旧的甩了。说实话这样男人不是做丈夫的人选,可惜20多岁的年轻女生永远看不
: 透着一点。
: 人一辈子总要经历失恋,被甩或者甩别人。当成体验生活吧。

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w*a
79
谢谢分享,我找到douban的原贴了:)
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S*t
80
好长哦...
那男生既然有了新欢为何还要和女生纠缠不休
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