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最近用Qiagen HiSpeed Maxi kit大提质粒的奇闻
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最近用Qiagen HiSpeed Maxi kit大提质粒的奇闻# Biology - 生物学
y*7
1
其它系的老师过来请,做PHD学生的co-advisor,这算什么credit吗?
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C*X
2
下午2:40pmdismissal , 哭了4小时,吃了4片Advil.晚上只睡了4小时。
今天早上发了10封信,收到2封回信。
早上交了课本费,为了表示我对知识的渴望,我决定买下这书。
刚才收拾一下东西,放入一个塑料袋中。
I have tried .. I feel the belonging .. but ...
就象是我跑完了26.2 miles ...
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g*4
3
发信人: sautin (老将萨乌丁), 信区: Military
标 题: 八卦:女F2 出轨骗绿卡 接盘老公进监狱zz
发信站: BBS 未名空间站 (Fri Dec 23 17:09:24 2011, 美东)
【 以下文字转载自 WaterWorld 讨论区 】
发信人: ldpcrsturbo (hawabang), 信区: WaterWorld
标 题: 八卦:女F2 出轨骗绿卡 接盘老公进监狱zz
发信站: BBS 未名空间站 (Fri Dec 23 16:37:59 2011, 美东)
此女的照片
http://blog.ifeng.com/album/album_104431.html
人人网
http://www.renren.com/251140627
此人想多都躲不掉 大家给出出主意
戴雅洁(Yajie Dai) 在波士顿已经F2身份混了一年了 大家也要小心 出自暴发户家庭
陷害自己老公在网上利用不同身份到处招摇撞骗 生活中也是sleep around 人人网名
Jamie//
http://www.huaren.us/dispbbs.asp?boardid=331&id=1053964&page=0&
事到如今,已经不是我们的私人恩怨问题了,因为几个月前我们就没有任何联系,被恶心
透了, 但是最近发现还在和教会的人联系骗人求帮助,这才感觉到自己引荐有责任,她已
经成为boston华人社区的一大公害. 因为接触过一段时间,她在美国boston这边的事没
有人知道的有我知道的多. 初始印象和实际作为反差太大,不得不爆 有些是我亲眼见到
,有些是她告诉我的信息和说过的话(剔除谎话)
大致按照发生的时间顺序
她非常做作,校内上贴了不少艺术照,三五天就分享一个关于 爱情 女人保养 如何做一
个好女人之类的 你能想象这是一个同时在闹离婚的女人吗? 去年十月份,(我后来才知
道当时她已经f2来到美国和老公在一起),还给我校内留言,说看到一些爱情的文章很不
错,
2010-10-13 13:02 回复 ?jamie
悄悄话 http://blog.renren.com/share/***** (我略去) 我认为写得很有反思精神一篇文章。分享之 世间值得追求的东西很多,但惟有爱情,是必须真心相爱才可以尝到它的滋味的。 I LOVE YOU NOT BECAUSE OF WHO YOU ARE,BUT BECAUSE OF WHO I AM WHEN I AM WITH YOU。——我爱你并不是因为你是谁,而是因为和你在一起时我才是最真实的我。
实际上她在国内早就声名狼藉,预料到我可能看到网上的负面评价时,说:我不知道人家
为什么那么说我 当时我没仔细看那些评价,所以被她装糊涂糊弄过去,回头想想,那些负
面评价全都没冤枉她, 无数不明真相的人 居然被她装作美女才女给蒙蔽,无数人追捧,
估计就像我刚开始对她的印象吧
在国内申请没拿到offer,她就和这边一个官二代留学生迅速结婚,不认识也不了解她
老公多少,去年F2来到美国,自己继续申请美国各地的学校(最后也没拿到offer),
根本没打算和老公过日子(我说:你怎么和这么一个人结婚,幸亏你发现他出轨早,不然你
们有孩子咋办,她说 我从来没想过这个,能看出她根本就没有plan要和老公过日子. 来
美之前也没有共同生活过,只是领证酒席而已),赤裸裸的拿老公当跳板。后来她老公出
轨,和吵架意外让她受伤 她隐瞒了自己的责任,装无辜,装可怜,骗同情骗帮助。如
果谎话撒不出来,就会装糊涂。她避难到boston,到处拿自己的经历骗同情骗帮助,装
受害者。很多人刚开始都被她的悲惨经历给骗,帮助她很多。她到处欠人人情,从来没
打算还,偶尔施以小恩小惠,假得令人作呕。很多自己能力范围内的都不做,反复的让
别人帮她做。后来找的政府的律师,要把她老公弄到监狱里去,自己好拿家暴避难U签
证(这个持有三年拿绿卡)。
此人没有一个朋友,见过她做人做事的都说她很假。如果谁和她认识,回头她就会在
别人那里装作和你很熟。如果你和她说过什么,回头就成了她出去卖弄的谈资,给自己
脸上贴金。各种极品的事情简直是罄竹难书。
来boston避难后, 到处去蹭讲座,校友聚会,华人聚会. qq gtalk不敢上线,qq和邮箱里
无数人的联系方式,都是等待她利用的人.我都见过她做事,qq或者邮件上拉一个人,像个
boss一样把任务给人一布置,就下线 拿着自己央视国学比赛的碟四处给自己做广告,她
在那场比赛中错误百出,极度做作,网上骂声一片 去mit蹭舞蹈课,认识一个白老头,每次
老头给她打电话,都要给我解释说:”我不知道他为啥老打电话给我,他说他很喜欢中国
文化…”自己去找人白老头回头在我面前装
去纽约玩,在大巴上,说好累,说要把头靠在我肩膀上 遇到我们共同认识的人,立马就变
得好像不认识我一样 一次她去坐车,我去学校,一个路口我们该分道扬镳了,她非要我陪
她走到公交车站那里,只有100米远而已,在我面前卖萌 做了这些,回头多次还明确的跟
我说:我们只是普通朋友 此女心机深, 见到老实人就拼命欺负
刚到boston的前一两个月,一边找人诉苦闹离婚,一边天天在外面逛街,认识新人请她吃
饭,参加舞会啥的,能想象这是一个闹离婚的人么? 刚来时天气寒冷,她说她没钱,哥给她
买了ck的被子,80多,当时说好 将来家里寄钱就还给我钱,或者如果离开boston不用了,
就把被子还给我也行 因为当时以为她在boston呆不久 后来找她要这个钱她就不肯给,
还说被子在搬家的时候弄丢了
谎话:
大家都对我很好( 装,明明是你去结交别人,利用很多人还不是很了解你, 占人便宜或者
利用人,在我面前造成一种朋友广泛的假象,实际上网上评价是一个朋友也没有)
我有一个好朋友/同学 (反正你也无法证实,她就吹,只是为了骗取好感信任帮助继续害
人而已)
我也不知道这是为什么(谎话撒不过去,前后无法自圆其说时糊弄人的)
在纽约中央公园,说邓姐就住在楼上富人区,说邓姐是她偶像,这是我第一次知道邓姐发
家史,以前只知道邓姐是默多克老婆而已. 平时装作一副很进取的样子,实际上十分物质
虚荣 各种名牌啥的非常熟悉 对自己非常重视,各种钻营 自从政府给了她免费医疗卡后
,就有事没事去mgh看病,什么皮肤上有小包啊,什么视力不好啊 看心理医生也是为了在
案子中争取对自己有利的证据(实际上天天到处认识人吃饭玩舞会聚会逛街买衣服化妆
品) 她认识许多人之后,身边一刻少不了别人,想吃饭了或者逛街了就打电话给认识的人,
这个陪完了换下一个,全是给她做工具用,
她如果认识个人,回来就写封校内日志,装,让人以为别人和她关系多好多好,实际上每个
和她接触过的见过她几次做人做事的,都很讨厌她,一个朋友都没有. 她去骚扰了GE的
CEO,Jack Welch, 在boston,和她聊了5分钟而已,回来写日志,继续装 骚扰了哈佛某华
裔教授,说要讨论诗歌,自己在newbury st逛街突然想起来好像错过了meeting,放了教授
鸽子 自己和奥巴马同月日出生,所以写好了给奥巴马的信,希望能和奥巴马共进晚餐,说
会对中美外交有很大意义(以为长得像芙蓉姐姐, 凤姐的相好也敢抢?)
骗教会的钱 一边老爸托她在美国买个劳力士,说美国便宜,一边还能接受教会的2000刀
资助 和牧师两个人在老四川吃饭,点了五六道菜….
每次教会负责帮助她的那位女士出去吃饭,都默认人家付钱,那位女士都说她感觉自己
overburden 找教会的人或者boston的华人诉说自己家暴的事情,隐瞒了自己赤裸裸利用
老公当跳板的事实,以及自己国内名声狼藉 那么多人帮她,丝毫不感恩, 好像别人帮助
她是应该的一样, 更是一点对帮助的人的体谅都没有 回头施以小恩小惠假得令人作呕
如果所有的人知道真实原因和她的为人,还会帮助她嘛? 有一次我通过她自己给我的信
息,得出结论:你们就是不怎么认识了解,他父母喜欢你,你父母喜欢他,才结婚的吧?当时
她立马就急了,说:你怎么知道? 当我没看出来….
回想起来真是好笑, 不过自己也是傻 我找她要钱(早期借她的,她找人做事或者借钱,自
己不直接说的,因为她知道谁是好人,有哪些可以被利用,就直接说她遇到困难, 所以当
初我才借了她钱),说我要寄钱回国了,她就开始推脱,完全不放在心上,还说”谁在乎这
点小钱?”你家里是不差钱啊 哥认识你就脱不了身了 还我支票,她没确认帐户里的钱,
导致check被return,我这边钱被扣回导致overdraft扣钱,她不肯负责,说:”银行也扣了
我的钱啊” 最后算欠我的钱,还跟我讨价还价,跟菜市场买菜一样的. 我说你自己送过
来吧,我要工作,结果她自己在newbury st逛forever21买衣服,不肯送,要我自己去拿 你
能相信这是对一个请她吃饭无数次 搬家三次 的人做出来的嘛?
然后我彻底和她明确说明断绝所有联系
和湿地去Cambridge那边一个广东省过来的招聘会,大家都衣着正式,她就穿着露背dress
来了,蹭到成功人士的桌子上去聊天(不要告诉我大家看不明白这是想干嘛) 当时我已经
说了和她不想有任何联系了,但是还是过来像第一次认识我一样打招呼,说自己在申请商
学院之类的,blabla说完就走(她申请的事之前和我说过多次,但是每次见到我或者别人,
都像第一次见到我或者别人一样,假) 对于这种女人,不要给她任何利用的机会,不要
告诉她任何信息。多多盘问她细节,就能看出破绽。
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s*n
4
1.免费的100刀 Chase SapphireSM Card 只需消费一笔
http://creditcardbonus.spaces.live.com/blog/
最近申请chase家的这个信用卡会弹出一个页面,写着Before you go…We hope you
will reconsider 难不成他们家最近被人拿太多这个100刀了! 不用对它客气,赶
紧点击Return&Apply, 拿到落袋为安。
http://creditcardbonus.spaces.live.com/blog/
2. 免费的250刀 Chase SapphireSM Preferred Card需要满足这个offer的条件 优先
考虑哈 里面有指导如何满足条件
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3. Free $75 Cashback Bonus from Discover More® Card 最适合中美间使用的
多彩卡片Discover信用卡 而且现在连续三个月消费一定笔数还送额外60刀
http://credit
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n*l
5
屏幕上有几块亮斑,内容显示没问题,就是亮度比周围高
一次不小心碰了屏幕之后就成这样了
如果不是背光管的问题的话,是不是就只能换整个屏幕了?
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s*f
6
这在Windows下莫名其妙就死了。每天死好几回,有时跑程序中间都会死。有人有相同
情况吗?
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s*y
7
处理了大概30个质粒,还有30-50个需要大提,
处理的30个中,主要是pCDNA和peGFP的质粒,插入大概3k 到 8k的基因片段
部分比较好,150ml菌,能有1000ng per ul浓度,有1ml体积
部分比较的诡异,浓度只有30 ng per ul,在1ml的体积中。
但是测序的 时候 都是 对的!!!!而且浓度低的 mini prep没有任何的问题
浓度在200 ng per ul,体积在 50ul
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a*u
8
better than nothing.
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g*4
9
此女蛮好看的嘛。被小骗一下,如果没吃大亏就算了吧。
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p*r
10
瞎猜一下:反光板变形了

【在 n*l 的大作中提到】
: 屏幕上有几块亮斑,内容显示没问题,就是亮度比周围高
: 一次不小心碰了屏幕之后就成这样了
: 如果不是背光管的问题的话,是不是就只能换整个屏幕了?

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S*e
11
你说的浓度低的都是插入的大片段质粒吧,
如果是,那就算常见,我常碰到。
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d*0
12
义务劳动
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y*n
13
脸侧面不错,但是太宽了,下肢粗壮有力。
不过原贴主有点输不起。

【在 g********4 的大作中提到】
: 此女蛮好看的嘛。被小骗一下,如果没吃大亏就算了吧。
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s*y
14
do you have a way to get high quantity of plasmid instead?

【在 S******e 的大作中提到】
: 你说的浓度低的都是插入的大片段质粒吧,
: 如果是,那就算常见,我常碰到。

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s*s
15
本身长的少办法也不多。土方是摇10倍体积,对数期加低浓度氯霉素

【在 s*********y 的大作中提到】
: do you have a way to get high quantity of plasmid instead?
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S*e
16
4楼说的是一个方法,不过我没试过,
根据我的经验有几点你或许试试,
1 用新transformed 的克隆,2 加大体积,3 菌不要长老了,宁可稀一点,
4 可稍降低一下培养温度

【在 s*********y 的大作中提到】
: do you have a way to get high quantity of plasmid instead?
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t*z
17
大量培养之前要先活化,这步省掉了,很可能产量低。培养这几步照说明书严格操作试
试。(single colony, start culture 8h, mass culture 12-16h)
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s*y
18
thanks. We did exactly follow the manufacture instructions...

【在 t*****z 的大作中提到】
: 大量培养之前要先活化,这步省掉了,很可能产量低。培养这几步照说明书严格操作试
: 试。(single colony, start culture 8h, mass culture 12-16h)

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b*r
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请问所谓活化,是说先摇小体积?

【在 t*****z 的大作中提到】
: 大量培养之前要先活化,这步省掉了,很可能产量低。培养这几步照说明书严格操作试
: 试。(single colony, start culture 8h, mass culture 12-16h)

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t*z
20
是的,特别是对于冷冻的菌株,先划板,然后小体积,然后大体积。

【在 b****r 的大作中提到】
: 请问所谓活化,是说先摇小体积?
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t*z
21
我也遇到过,某个常见的4kb左右的小质粒,大抽出来,总共100ul,浓度是150ng/ul。
抽了两次都是这样。看看质粒本身没什么特别的,不知道怎么回事。我觉得这事情和质
粒大小关系不大。你的也才大了一些些而已啊。
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a*d
22
for the 2-propanol precipitation step, I put the DNA/propanal mix at -20
overnight, then follow the rest procedure. By doing this, you get get good
yield.
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