求助，proteasome inhibitor# Biology - 生物学
n*l
1 楼
各位大侠们，我在做用6ohda处理细胞的时候，发现一个蛋白的水平降低，文献表明可
能是proteasome（实验是过表达此蛋白，然后用MG132处理，发现蛋白增多；）或者
caspase降解（在细胞中过表达此蛋白和各种caspase酶,发现蛋白降解）。
我于是用proteasome inhibitor MG132与6OHDA 同时处理，并没有发现此蛋白水平回复
（保证MG132其作用，有阳性对照蛋白）。换用caspase inhibitor和6OHDA处理，也没
有发现次蛋白水平回复，换用lysosome inhibitor和6ohda同时处理，也没有发现次蛋
白水平恢复。
请教别人，说proteasome的inhibitor MG132 并不足以阻止proteasome。说一些好的杂
志都不接受MG132作为proteasome的inhibitor。是这样么、？那有什么好的推荐么？
另外一种可能行是我用药物处理之后，蛋白水平下调，是因为我的蛋白沉淀了，在我的
buffer里面是没有的。但是我是用cell signling公司的buffer20mM Tris， 150mM 氯
化钠，1%triton。收细胞的时候，加入lysis buffer，用细胞刮刮下来，超声后，直接
加入5*的loading buffer，煮样后上样，并没有看到有粘稠的东西啊。有这种可能么？？
多谢多谢啊
能是proteasome（实验是过表达此蛋白，然后用MG132处理，发现蛋白增多；）或者
caspase降解（在细胞中过表达此蛋白和各种caspase酶,发现蛋白降解）。
我于是用proteasome inhibitor MG132与6OHDA 同时处理，并没有发现此蛋白水平回复
（保证MG132其作用，有阳性对照蛋白）。换用caspase inhibitor和6OHDA处理，也没
有发现次蛋白水平回复，换用lysosome inhibitor和6ohda同时处理，也没有发现次蛋
白水平恢复。
请教别人，说proteasome的inhibitor MG132 并不足以阻止proteasome。说一些好的杂
志都不接受MG132作为proteasome的inhibitor。是这样么、？那有什么好的推荐么？
另外一种可能行是我用药物处理之后，蛋白水平下调，是因为我的蛋白沉淀了，在我的
buffer里面是没有的。但是我是用cell signling公司的buffer20mM Tris， 150mM 氯
化钠，1%triton。收细胞的时候，加入lysis buffer，用细胞刮刮下来，超声后，直接
加入5*的loading buffer，煮样后上样，并没有看到有粘稠的东西啊。有这种可能么？？
多谢多谢啊
