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响应不要八卦要学术的号召,问个学术问题,有关蛋白表达的
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响应不要八卦要学术的号召,问个学术问题,有关蛋白表达的# Biology - 生物学
p*l
1
【 以下文字转载自 Visa 讨论区 】
发信人: pussycatdoll (mimi), 信区: Visa
标 题: 【包子答谢】H1b和OPT配偶应该一起签证还是分开签比较好
发信站: BBS 未名空间站 (Fri Aug 15 10:55:48 2014, 美东)
大致情况是这样的:我2013年的h1b,去年年底已经在北京签过,今年年底再回去递签
就可以了,不需要面签,但是回国时间比较紧,面签能比递签快一些
老公2014的opt,已经在full time工作,3年没有回过,今年要带他父母一起签B2过来旅游
我的疑问是:
老公作为h1b的配偶,是否可以有移民倾向 (我猜测是不可以的,因为他是申请f1-
opt签证),
如果是不可以有移民倾向的话,我是不是最好不要和他一起预约去面签比较好,
如果我们去面签故意分开两个窗口会不会被怀疑
他父母是跟他一起签比较容易过,还是跟我一起签
我俩之前一直在北京签证,记录良好,这次因为要去苏州,想在上海签证,这样跨区是
否不好,听说北京对b2签证比上海严格,是否属实
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h*g
3
提到张馨予,想到的就是狐媚妖气的苏妲己,以及各种李晨,吴卓羲床照,坐台的
照片。其实除去负面新闻不说,张馨予还真是个大美人,那种长相是一看就美的让你记
住。可能出名前一定要有炒作吧,她的绯闻还真不少,但是也成功上位了。看她的一些
电视剧,《武媚娘传奇》里的萧淑妃啊等等,目前都停留在一些蛇蝎美人的角色。最近
看了一则新闻,说她拍戏多苦,让人向她扔鸡蛋。坦白说她也算真的敬业,负面新闻是
上位的一种方式吧,虽然大众对她并不看好,加上李晨范冰冰的恋情,总将她推向风口
浪尖。不过不管怎么说,她还年轻,长得又这么美,一定会有自己的舞台!
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c*l
4
现在在家里面布线,
按照标准的T568方法压线
压完线之后用测试仪测试连通性
结果第8号灯不亮,说明该线不通。只亮1-7号灯
测试仪本身是好的,因为如果测试仪试别的网线1到8号灯都亮
请问这到底是什么原因?是不是一定说明8号线是断的?或者说明没压好?
另外,如果8号线没连通,有影响吗?
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X*0
5
某原核蛋白,在其原来的菌里的定位未知,蛋白序列本身找不到信号肽.
在大肠杆菌里表达.由于胞质表达总是包涵体,于是改周质表达.用的是pET26b,就是N端
加了一段pelB信号肽的.问题来了,表达完的蛋白去哪儿找?用哪部分纯化?是用细胞,还
是用培养基上清?问题等价于,蛋白(46kD)会不会大多数穿过细胞壁漏到培养液中.
做生化的,大量提蛋白解结构的,比较容易解答我的问题.
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C*2
6
分开吧,要不就h4一起签
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W*S
7
看你连什么网,百兆网没问题,千兆网不行
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a*k
8
http://lifeserv.bgu.ac.il/wb/zarivach/media/protocols/Novagen%2
page 45

【在 X*******0 的大作中提到】
: 某原核蛋白,在其原来的菌里的定位未知,蛋白序列本身找不到信号肽.
: 在大肠杆菌里表达.由于胞质表达总是包涵体,于是改周质表达.用的是pET26b,就是N端
: 加了一段pelB信号肽的.问题来了,表达完的蛋白去哪儿找?用哪部分纯化?是用细胞,还
: 是用培养基上清?问题等价于,蛋白(46kD)会不会大多数穿过细胞壁漏到培养液中.
: 做生化的,大量提蛋白解结构的,比较容易解答我的问题.

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j*i
9
老公作为h1b的配偶,是否可以有移民倾向 (我猜测是不可以的,因为他是申请f1-
opt签证),
如果是不可以有移民倾向的话,我是不是最好不要和他一起预约去面签比较好,
如果我们去面签故意分开两个窗口会不会被怀疑
<<< 个人感觉分开签/一起签证差别不会太大,因为你们的关系都会在DS160表格上显示
出来,VO也有可能会问到。你如果可以递签那就递签吧,省事儿。对OPT期间返签不是
很了解,建议LZ老公多做下相关功课。
他父母是跟他一起签比较容易过,还是跟我一起签
<<< 你公婆即便和你一起签证,在160表上一样需要填写你老公的信息,而且签证时难
免VO会问起你老公的情况,所以我感觉你公婆和你老公一起签或者他们单独签比较好。
我俩之前一直在北京签证,记录良好,这次因为要去苏州,想在上海签证,这样跨区是
否不好,听说北京对b2签证比上海严格,是否属实
<<< 跨区最好给出合理理由。
祝通过
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c*l
10
thanks

【在 W****S 的大作中提到】
: 看你连什么网,百兆网没问题,千兆网不行
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C*e
11
osmotic shock取periplasmic fraction
但是带pLysS的不好用这个protocol
会不会leak是case by case
另外跟induce强度及时间长短有关
pelB signal peptide不一定好用
好不好用也是case by case
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d*o
12
如果是plug,剪断重新切,切的时候不要把前边的皮剥掉太长。
如果是walljack,扯出来重新压,没有理由不通。

【在 c********l 的大作中提到】
: 现在在家里面布线,
: 按照标准的T568方法压线
: 压完线之后用测试仪测试连通性
: 结果第8号灯不亮,说明该线不通。只亮1-7号灯
: 测试仪本身是好的,因为如果测试仪试别的网线1到8号灯都亮
: 请问这到底是什么原因?是不是一定说明8号线是断的?或者说明没压好?
: 另外,如果8号线没连通,有影响吗?

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