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Bio-rad CFX96 realtime PCR 为何不稳定
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Bio-rad CFX96 realtime PCR 为何不稳定# Biology - 生物学
j*n
1
星座之间关系里,总有一个“对宫星座”之说。
是180度对面的那个星座,而非指对立、对抗的星座,更不是相克的星座;
相反,是潜在有共通性、一致性的星座,或者说是最最需要对方能量补济的星座。
即,最该学习和吸收的星座特点。当然,实际相处中,会是吸引和最大发现对方的星
座。
例如:金牛-天蝎,双子-射手、巨蟹-摩羯、狮子-水瓶、处女-双鱼,白羊—天秤。
十二个星座,其实只有六个能量点,一阴一阳的对称性发展,形成了十二个星座。
3、双子座 VS 射手座——并行不悖
双子属于多面向的自己,射手则非常单纯单一。
双子能够永远置身事外,冷静分析,射手则永远身临其境,看不到事态破绽。
双子和射手热爱自由而都没有耐心,对什么事三分钟热度容易移情别恋。
双子和射手在一起,就像吹响同一方向的两阵风一样,彼此不会约束和干扰。
但同时也因此不知道珍惜而放任对方,有交集没有凝结点,容易错过和远离。
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c*a
2
最近好像又发生了一起这样的事情,前段时间在录制歌手的谭晶突然间宣布退出了比赛
就有点让人有种谭晶和歌手节目闹掰了的感觉,虽然说后来有人辟谣说谭静的退出和歌
手的栏目并没有冲突,只是因为档期不对的原因,谭晶才会选择退出了歌手这个节目。
可按照以往的来看,包括之前孙楠那件事,我就觉得这里面很多事情咱们不知道的事情
,也就是说,很多见不得人的事情,比如说像歌手栏目的霸道,我让你唱什么,你就要
唱,你如果不唱的话我就在这个栏目封杀你。之前的邓紫棋,不就是碰见了这种事吗,
邓紫棋确实是被歌手给捧红的,可是后来因为选歌的原因又闹掰了。不管是从孙男的身
上还是从邓紫棋的身上都能看得出来,歌手这个栏目也是相当霸道的,因为他们比较火。
我今天在看上一期歌手突围赛的时候发现里面竟然没有赵雷,按说不应该,就得一个唱
民谣的还没有。你有赵雷也没有谭晶,如果说没有谭晶不感觉意外的话,那赵雷的不出
现,让我觉得是不是又闹掰了。因为大家都知道赵雷的性格,在刚到歌手这个节目的时
候赵雷就说了一些对,歌手不太感冒的话,当时我就觉,也许这些话会为赵雷以后在歌
手栏目上留下一个隐患。
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s*d
3
罗技的GOOGLE TV REVUE降价到了99刀,有人用吗?
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a*e
4
谢谢
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s*u
5
最近,我们实验室购买一台Bio-rad CFX96 real-time PCR, 用一个月后,数据不稳定
,特别是边缘效应明显,A12--H12数据偏高,中间也有数据乱跳的现象。公司派了一个
Engineer检查,说产品合格,Lid压力偏低,可能导致Plate压不紧,液体挥发。建议更
换新的Lid, 可是地区Manager不同意,说完全合格。
只几天8/27,8/28 作8块plate,效果还是比较好,8/29连续2块Plate均不好,数据乱跳
。我们现在每次Run完,均需要让PCR shut down15 分钟再继续Run,可是还是很不稳定
,正是愁死我了。我们有大量临床Sample。
请教使用过Bio-rad CFX96 realtime PCR的朋友们,仪器不稳定的原因有哪些?如何解
决?我们3人操作绝对没有问题,以前使用Biorad-IQ5也有同样问题。
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s*8
6
天秤.........

【在 j**n 的大作中提到】
: 星座之间关系里,总有一个“对宫星座”之说。
: 是180度对面的那个星座,而非指对立、对抗的星座,更不是相克的星座;
: 相反,是潜在有共通性、一致性的星座,或者说是最最需要对方能量补济的星座。
: 即,最该学习和吸收的星座特点。当然,实际相处中,会是吸引和最大发现对方的星
: 座。
: 例如:金牛-天蝎,双子-射手、巨蟹-摩羯、狮子-水瓶、处女-双鱼,白羊—天秤。
: 十二个星座,其实只有六个能量点,一阴一阳的对称性发展,形成了十二个星座。
: 3、双子座 VS 射手座——并行不悖
: 双子属于多面向的自己,射手则非常单纯单一。
: 双子能够永远置身事外,冷静分析,射手则永远身临其境,看不到事态破绽。

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c*s
7
跟pbo或者wd tv比起来有更大的优势吗?在目前还不能用android market的情况下
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f*y
8
點center key
拉着要關的,往上一拖,搞定,關閉
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A*y
9
What kind of plate are you using? It looks like you didn't seal the film
properly. The best plate is white semi-skirt. If you need the PCR to shut
down 15 mins, are you sure you cool down the plate after the run i.e. around
4 degree. Also, did you prep your plate on a well cooler?
There are also one possible problem. Did you check the linearity of your
primer? It is extremely crucial and I know a lot of lab don't do it (which
is hilarious). Primary simple should jump around a bit, and the N is your
friend, unless your technical repeat is not repeatable.
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j*n
10
是那股风把叔叔又吹回星版来啦
最近忙不?

【在 s**********8 的大作中提到】
: 天秤.........
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t*m
11
太贵,降到$10以下可以考虑。
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x*8
12
变成卡片 然后用手指划出屏幕外就关上了。
这个比庵猪好多了。庵猪你都不知道那些app是不是关上了。
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s*u
13
We use Bio-rad plate and Bio-rad film as they recommended.
I sealed the film properly each time, but sometimes I found solution
evaporate at A12 to H12 (right side), I don't know why.
I prepared my plates on a well cooler and put on ice.
I got an email from Bio-rad Technical service below this morning(8/31/11 9;
22 am):
I just wanted to send you an update on the status of your CFX96 case.
As I conveyed to you yesterday during our phone call, your situation is one
that we have never observed and has reached the highest level of our
technical support chain. Discussions are ongoing regarding how we can come
to the best resolution for your instrument's performance, though no decision
has been made at this point.
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s*8
14
忙到不忙, 就是心潮澎湃, 清越激昂. 小侄女最近好吗? 看星星有进不咩?

【在 j**n 的大作中提到】
: 是那股风把叔叔又吹回星版来啦
: 最近忙不?

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f*i
15
安猪的后台运行太蛋痛了
再高级的硬件,迟早也会被拖累死
当初google就应该收购palm,放弃安猪,这样硬件有了,软件有了,专利也有了
现在HP做了嫁衣给棒子,不爽啊!!!!

【在 x**8 的大作中提到】
: 变成卡片 然后用手指划出屏幕外就关上了。
: 这个比庵猪好多了。庵猪你都不知道那些app是不是关上了。

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s*u
16
We use Applied Biosystem MicroRNA commericial primer, the primer are all
good.
We just find solution evaporation on 2 plates on 8/29/11, one is FAM, one is
SYRB plate, and it never happened before although I run more than 100
plates using IQ5 and 30 plates using CFX-96.
还有这台CFX-96是作为公司demo用的,原价29,000, 因为作为demo用了半年,所以价
格为25,000,我们7月1日才刚刚购买拿到仪器。7月14日才刚刚完成培训。结果2-3个
星期就发现问题,至今也无法解决。
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j*n
17
啥事情那么心潮澎湃?
跟笑星星们分享下咩?

【在 s**********8 的大作中提到】
: 忙到不忙, 就是心潮澎湃, 清越激昂. 小侄女最近好吗? 看星星有进不咩?
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h*k
18
android怎么关啊。
我长按住back的箭头,也关不了了。
现在youtube, firefox, system setup, 还有其他的都一长串list在哪里。
这tnnd谁搞的脑残设计。

【在 x**8 的大作中提到】
: 变成卡片 然后用手指划出屏幕外就关上了。
: 这个比庵猪好多了。庵猪你都不知道那些app是不是关上了。

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A*y
19
Just because it is commercial primer, does not mean is good if you didn't
check it in your system. Bio-rad should replace the real-time unit, if it
is the problem.
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s*8
20
还不是老套, 闲来垂钓坐溪上 忽复乘舟梦日边啥的.

【在 j**n 的大作中提到】
: 啥事情那么心潮澎湃?
: 跟笑星星们分享下咩?

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v*2
21
Hi, have you run minus RT? and have you checked the primer dimer? I dislike
the BioRad instrument too, it is not as stable as the Applied Biosystem
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M*g
22
辈份不可以这么乱定!

【在 s**********8 的大作中提到】
: 忙到不忙, 就是心潮澎湃, 清越激昂. 小侄女最近好吗? 看星星有进不咩?
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A*y
23
I used both, AP's new one has software problem, when it crashes you lost the
entire run. The Bio-rad one still have the best software and hardware
setting. I don't see things evaporate from mine.

dislike

【在 v***2 的大作中提到】
: Hi, have you run minus RT? and have you checked the primer dimer? I dislike
: the BioRad instrument too, it is not as stable as the Applied Biosystem

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l*a
24
射手没有耐心,三分钟热度。这个是否有可疑?
我们家射手一部一个半小时的动画片反复看了半年呢!
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o*d
25
我们这里前有台CFX96,也是盖子坏了,现在在返厂修理,前期的症状和你遇到的情况
一样,边缘的孔被蒸空了。
和bio-rad好好沟通一下,让他们换修。
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x*e
26
以前看过一系列讲对宫的
忘记出处了= =

【在 j**n 的大作中提到】
: 星座之间关系里,总有一个“对宫星座”之说。
: 是180度对面的那个星座,而非指对立、对抗的星座,更不是相克的星座;
: 相反,是潜在有共通性、一致性的星座,或者说是最最需要对方能量补济的星座。
: 即,最该学习和吸收的星座特点。当然,实际相处中,会是吸引和最大发现对方的星
: 座。
: 例如:金牛-天蝎,双子-射手、巨蟹-摩羯、狮子-水瓶、处女-双鱼,白羊—天秤。
: 十二个星座,其实只有六个能量点,一阴一阳的对称性发展,形成了十二个星座。
: 3、双子座 VS 射手座——并行不悖
: 双子属于多面向的自己,射手则非常单纯单一。
: 双子能够永远置身事外,冷静分析,射手则永远身临其境,看不到事态破绽。

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M*n
27
demo至少应该40% off。
才便宜15% 太亏了。
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x*e
28
其实有点像南北交点的感觉

【在 j**n 的大作中提到】
: 星座之间关系里,总有一个“对宫星座”之说。
: 是180度对面的那个星座,而非指对立、对抗的星座,更不是相克的星座;
: 相反,是潜在有共通性、一致性的星座,或者说是最最需要对方能量补济的星座。
: 即,最该学习和吸收的星座特点。当然,实际相处中,会是吸引和最大发现对方的星
: 座。
: 例如:金牛-天蝎,双子-射手、巨蟹-摩羯、狮子-水瓶、处女-双鱼,白羊—天秤。
: 十二个星座,其实只有六个能量点,一阴一阳的对称性发展,形成了十二个星座。
: 3、双子座 VS 射手座——并行不悖
: 双子属于多面向的自己,射手则非常单纯单一。
: 双子能够永远置身事外,冷静分析,射手则永远身临其境,看不到事态破绽。

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l*s
29
1 你的总体系别做太小了,至少保证15ul以上,
2 我感觉其实塑料管好于那个贴膜的plate,那个多少会有些leaking
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j*n
30
爷爷好

【在 M****g 的大作中提到】
: 辈份不可以这么乱定!
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m*p
31
Mine CFX-96 costs 25,000, brand new, works well.

is

【在 s**u 的大作中提到】
: We use Applied Biosystem MicroRNA commericial primer, the primer are all
: good.
: We just find solution evaporation on 2 plates on 8/29/11, one is FAM, one is
: SYRB plate, and it never happened before although I run more than 100
: plates using IQ5 and 30 plates using CFX-96.
: 还有这台CFX-96是作为公司demo用的,原价29,000, 因为作为demo用了半年,所以价
: 格为25,000,我们7月1日才刚刚购买拿到仪器。7月14日才刚刚完成培训。结果2-3个
: 星期就发现问题,至今也无法解决。

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M*g
32
哈哈,好好好,太尉大侄子你压岁钱怎么给这么少?!至少翻个番。

【在 j**n 的大作中提到】
: 爷爷好
avatar
x*e
33
我上次在版上也问了同样的问题。和你们一模一样的仪器,我也是很多次(但不是每一
次)做技术重复间的差异都非常大,3个技术重复给的Ct值有1-2的差异。我没有仔细检
查样品蒸发的问题,目测反应后的体积没有发现明显的差异。下次也应该仔细查看样品
的蒸发情况。
看了你的情况,我也不由得怀疑起是不是这个仪器的问题了。
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M*9
34
什么片儿啊, 这么好看。。。分享一下吧。。。

【在 l********a 的大作中提到】
: 射手没有耐心,三分钟热度。这个是否有可疑?
: 我们家射手一部一个半小时的动画片反复看了半年呢!

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s*u
35
昨天下午,我做了一块,发现又有更加奇怪的现象发生,96 well Plate右边一半没有
加任何sample, 完全空白,竟然也会出现大量读数,而不是N/A。
我们老板很生气,决定向Biorad公司交涉更换一台。要到下星期二上班后发email,把
最近一个星期的奇怪现象再次反映给Biorad
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l*a
36
宫崎骏的(龙猫)
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A*y
37
What's your plate? I am just curious. It does look like is your instrument.

【在 s**u 的大作中提到】
: 昨天下午,我做了一块,发现又有更加奇怪的现象发生,96 well Plate右边一半没有
: 加任何sample, 完全空白,竟然也会出现大量读数,而不是N/A。
: 我们老板很生气,决定向Biorad公司交涉更换一台。要到下星期二上班后发email,把
: 最近一个星期的奇怪现象再次反映给Biorad

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M*9
38
谢谢。 哪天瞧瞧。 看看能坚持多久, 呵呵。

【在 l********a 的大作中提到】
: 宫崎骏的(龙猫)
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s*u
39
We use Biorad multiplate PCR plates Low 96-well clear (MLL9601, LOT# LCRN1,
DOM: 230311), and PCR sealer Microseal 'B' film (MSB1001, LOT# 115084, DOM:
230211) to do our experiment.
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m*o
40
身边的射手很有耐心啊~

【在 l********a 的大作中提到】
: 射手没有耐心,三分钟热度。这个是否有可疑?
: 我们家射手一部一个半小时的动画片反复看了半年呢!

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A*y
41
Interesting. Did you check your heating element to see if it is clean? For
all RT-PCR,I will recommend semi-skirt white plate to eliminate potential
plate flex and maximum signal.
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a*d
42
好奇一问,射手是不是很情绪化阿。好像我认识的两个都这样

【在 m***o 的大作中提到】
: 身边的射手很有耐心啊~
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s*u
43
Bioread sales representative came to our Lab this morning and told us that
Biorad will replace our current CFX96 and replace a new one, hopefully we
will get it next week.
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s*8
44
男女有别吧,我觉得男射手比较稳得住,女射手就很火爆,以前宿舍有个女射手舍友,
跟她男朋友打电话吵架,最后把电话砰地一摔,吓得我们大气不敢喘啊,心想,这可是
宿舍的公用电话啊。

【在 a***d 的大作中提到】
: 好奇一问,射手是不是很情绪化阿。好像我认识的两个都这样
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s*u
45
I just got email from FEDEX, our new biorad CFX96 realtime PCR has been
picked up in CA, on 9/9/11 16:19 pm (Eastern time 19:19).
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a*d
46
哈哈,太对了。我认识的也是这种状态。女生

【在 s********8 的大作中提到】
: 男女有别吧,我觉得男射手比较稳得住,女射手就很火爆,以前宿舍有个女射手舍友,
: 跟她男朋友打电话吵架,最后把电话砰地一摔,吓得我们大气不敢喘啊,心想,这可是
: 宿舍的公用电话啊。

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s*u
47
Thanks for your suggestion, from 9/12/11 we started using this kind of plate
, instrument runs well
No edge effects happened, no evaporation happened again.

For

【在 A******y 的大作中提到】
: Interesting. Did you check your heating element to see if it is clean? For
: all RT-PCR,I will recommend semi-skirt white plate to eliminate potential
: plate flex and maximum signal.

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m*o
48
我认识的没有啊

【在 a***d 的大作中提到】
: 好奇一问,射手是不是很情绪化阿。好像我认识的两个都这样
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m*o
49
唉,可惜男友看不到啊

【在 s********8 的大作中提到】
: 男女有别吧,我觉得男射手比较稳得住,女射手就很火爆,以前宿舍有个女射手舍友,
: 跟她男朋友打电话吵架,最后把电话砰地一摔,吓得我们大气不敢喘啊,心想,这可是
: 宿舍的公用电话啊。

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m*e
50

我不火爆。
一射手座美女同学,脾气可好了,从来没跟哪个同学闹翻过,姐弟恋,对LG说话也是温
温柔柔的,总觉得她跟薛宝钗似的。
看来两极分化蛮严重的。

【在 s********8 的大作中提到】
: 男女有别吧,我觉得男射手比较稳得住,女射手就很火爆,以前宿舍有个女射手舍友,
: 跟她男朋友打电话吵架,最后把电话砰地一摔,吓得我们大气不敢喘啊,心想,这可是
: 宿舍的公用电话啊。

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m*e
51
很有耐心,也许是恋旧,喜欢炒冷饭,比如六小龄童版西游记看了不知道多少遍了。

【在 l********a 的大作中提到】
: 射手没有耐心,三分钟热度。这个是否有可疑?
: 我们家射手一部一个半小时的动画片反复看了半年呢!

avatar
S*p
52
kaka

【在 m********e 的大作中提到】
: 很有耐心,也许是恋旧,喜欢炒冷饭,比如六小龄童版西游记看了不知道多少遍了。
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