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跪求, 一个软件(甲基化结果分析的) 就是黑点和白点的,
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跪求, 一个软件(甲基化结果分析的) 就是黑点和白点的,# Biology - 生物学
p*1
1
看了置顶帖,觉得受益匪浅。可是Negotiation的节奏如何?是一点一点慢慢argue么?
这样别人会不会很烦啊?谢谢!
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m*5
2
会怎么通知我呢
要不要预约
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a*d
3
水版这个帖很火啊。这个大哥,我觉得像巨蟹男。
巨蟹最爱扮妈妈,家里多了个小十几岁的小妹妹,喜欢得不得了,当宝宝养了。
后来自己有了孩子,更是爱到骨头里,对老婆千依百顺,连老妈也顾不上了。更别说妹
妹了。呵呵。
论证完毕。
【 以下文字转载自 WaterWorld 讨论区 】
发信人: yueshang (月上人家), 信区: WaterWorld
标 题: 我为什么会说大嫂极品,这是最后一帖
发信站: BBS 未名空间站 (Fri Aug 16 23:36:06 2013, 美东)
我不知道发一个帖子会引来这么多人给我塞邮件来骂我,既然你们都这么认为我过分,
这是最后一个帖子
我父母都是老实巴交的农民,我大哥二哥年龄非常近,基本上都是一起上学,一个农家
要供两个孩子一起上小学,中学,高中,大学,这其中的经济压力根本不是你们所想象
得到的,大哥二哥上大学的时候我也开始上中学了,虽然一直很节俭,但再怎么省还是
会很困难,因此,我大哥为家里做了很多我都知道。
我爸妈经历过大饥荒,他们不想我们也饿着,从来都是天还没亮就出门,天黑才回来,
我出生后,是我大哥带大的我,教我走路叫我说话,连第一次月经来买卫生巾生理课都
是他给我上的,在我眼里他一直就是爸爸的存在,他结婚了,大嫂在我看来相当于一个
继母。
初中读完那会儿,家里实在负担不起,虽然我爸妈没有一直在我耳边说让我不要再读书
,但是,多多少少这样的意思已经传达给我,那是我考砸的原因,那时候我才十四岁,
就有了轻生的念头,加之大哥在外求学根本就不知道家里的情况,他一直打电话回来督
促非要让我复读,结果我就跑去跳河。随便你们怎么说,说我没良心任性也罢,之后是
我大哥负担起了我高中的学杂费直到大学,十四岁,发生了很多事,我不得不长大。
是,是我对这个家没有什么付出,就不该说这说那,我不是那不知道事,二十二岁了在
大学里还思想幼稚的小孩子。大学时候大哥开始谈恋爱,我大三时候他们开始谈婚论嫁
,到我出国了,他们才结婚,这其中,他们之间发生的很多事情我都知道,可我没有说
过我大嫂半句不是没说过什么要他们分手的话。为什么他们谈恋爱这么久才结婚?原因
不是我,而是大嫂爸妈提出来的要求!
那时候我大哥在北京光是给一些需要的公司做挂名和顾问,额外收入就有一百多万,加
之一份稳定的工作,很快就有了房子,但是北京的户口非常紧张,没有指标根本弄不下
来,而这其中的要求就是我哥必须要有北京户口,还要把我嫂子的户口给解决了!车更
是,买下来还只能上外地牌照,直到现在还没摇到号!
我大嫂是哪的人?具体我不想说,但我告诉你们她不是北京人,我们两家的家庭条件相
差不是很大。
我家是哪的?大体位置可以告诉你们,中部,离北京、广州都很远,我家在广州没有亲
戚。
关于这些我不想再多说,我来解释,为什么我会一直在花钱。
大学时候,我就提出自己贷款读,并不需要大哥再负担,但是他不准。不是不让,而是
不准,不让还有回旋余地,不准那就是他说的话我必须听!
我大学专业我喜欢吗?不,我一点都不喜欢,还非常讨厌,但是它是大哥给我选的,我
就读还要把它读好,读最好,该拿的都拿到手,从来没有输给任何人。来美国,你们说
我有奖学金为什么还要花大哥二哥的钱?我不想说具体原因,你们也别人肉,我只能说
,如果我和你们一样,那奖学金够我在美国花销,还会有很多时间来赚外快,过得比任
何人都惬意。
说这么多,我并没有埋怨过我大哥,二哥的话我还会反驳,对大哥我从来都不会去忤逆
,这其中太多事情就算有再多的问题或者看法在你们看来或许有解的,在我这里都没有
答案。
是我没能力赚钱吗?不,我想用自己的钱给大哥买个结婚礼物,抽八天时间赚了3000美
元,虽然不多,但你们有几个人敢站出来说你们在求学期间也能做得到!
大哥结婚时候,我爸妈来,妈妈特意弄了很多家乡小吃带去北京,可除了核桃留下来,
其他又都给背了回去,我妈给他们洗碗,大嫂又去洗第二遍,从他们结婚到现在,大嫂
一次都没有去过我老家,很多生活中的小事,我和大嫂相处的并不长但看到的就有不少
,我妈给我打电话重来不会说这些,至于吵架那件事,若不是她实在伤心我也不会知道。
大嫂的事情我从来没有说过半句话,但这件事我无论如何也不会咽下这口气!
还有你们有人说,既然说在北京租房这个提议,你们为什么不负担房租要让我大哥负担
。首先我要说,这是假设,其次,他们可以这么做,最后,因为是爸妈来照顾大嫂月子
,我们根本不知道事情会成后面那个样子,如果真有这样的做法,你们真以为这每月的
房租会让我大哥一个人掏吗?
最后,我想说,我甩大哥电话确实不对,你们说的我大哥结婚了以后他就不再和我是一
家我无法接受,前一个帖子那么气愤是我一时气头上,平常时候我根本不会告诉任何人
我有这样的想法,另外,如果你们衡量一件事情都是以金钱来作为标准的话,那么,我
只能说你们是可悲的。
我每天都要到晚上十点以后才会有自己的一点剩余时间,这是我在这里发的最后一个帖
子,祝你们的生活都幸福。
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h*e
4
我开始以为跟pageonce差不多呢
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t*8
5
原想这两天下个单,没想到居然涨价啦。坑爹呀!
别的笔记本都减价。为什么Thankpad涨价呢?
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l*s
6
在文章中一直看是用这种软件分析的,请问哪里能找到????
谢谢,
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m*c
7
不要很多来回,一个是对方烦,再来程序上来回多次也不可能。如果需要negotiate
地方
不多,那么一次提完,提到顶,让对方去还价。如果很多点都需要谈,分清主次,先谈
主要的三五点,这些是决定你是否要接这个offer的,第二轮再把trivial的提一提,属于
有了更好没有也可以接受的。一次列个十几二十条让人觉得有点太挑剔,而且,没有经验
的人,就算列二十条,还是会有漏下的,再提就让人更觉得烦。

【在 p********1 的大作中提到】
: 看了置顶帖,觉得受益匪浅。可是Negotiation的节奏如何?是一点一点慢慢argue么?
: 这样别人会不会很烦啊?谢谢!

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f*u
8
不用预约
我是15天收到通知
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c*g
9
只看这贴感觉是穷人家惯出来的公主
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w*t
10
问siri:这个passbook怎么用

【在 h**********e 的大作中提到】
: 我开始以为跟pageonce差不多呢
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c*y
11
稳定、散热好、抗造
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l*s
12
找到好几个别的 都不是,而且没有哪个好,
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p*1
13
明白了!十分感谢!

negotiate
属于
经验

【在 m***c 的大作中提到】
: 不要很多来回,一个是对方烦,再来程序上来回多次也不可能。如果需要negotiate
: 地方
: 不多,那么一次提完,提到顶,让对方去还价。如果很多点都需要谈,分清主次,先谈
: 主要的三五点,这些是决定你是否要接这个offer的,第二轮再把trivial的提一提,属于
: 有了更好没有也可以接受的。一次列个十几二十条让人觉得有点太挑剔,而且,没有经验
: 的人,就算列二十条,还是会有漏下的,再提就让人更觉得烦。

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m*5
14
通知怎么讲的
让你在特定的一天去?
你的通知是寄来的还是EMAIL的
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a*d
15
嗯,我也不太喜欢这个小姑娘。
可是看着她对大哥的感情好像也超过了一个妹妹应该有的,忽然觉得她也好可怜的。

【在 c********g 的大作中提到】
: 只看这贴感觉是穷人家惯出来的公主
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h*e
16
谁帮我问问
土人用的是iPhone4

【在 w******t 的大作中提到】
: 问siri:这个passbook怎么用
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A*s
17
带鱼屏太可恨

【在 c*********y 的大作中提到】
: 稳定、散热好、抗造
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b*8
18
那个棒棒糖图啊,参考这个链接
http://www.dxy.cn/bbs/thread/15900186?keywords=BSP#15900186
BSP 主要目的是,通过测定亚硫酸盐修饰后的DNA序列,了解特定基因的具体CpG位点的
甲基化情况。而MSP只能获得该样本是否发生甲基化的信息,BSP则可以详细了解每一个
CpG位点的甲基化情况。
1,首先,按前帖设计引物后,确定BSP反应条件。我们实验室一般都做45个cycle.
提个有意思的题外话,通常BSP的退货温度,会比相应的MSP的退货温度低。
2,BSPCR后,取10ul跑PCR,如条带单一,则直接克隆,具体操作按照Invitrogen的
TOPO试剂盒进行;如条带有杂带,需要进行PCR Screen,具体操作及原理以后再讲;
3,克隆后在LB胶上,培养过夜后,后通常取8-12个克隆,LB培养过夜;
4,过夜后LB液浑浊;按照5-Primer的Mini Plasmid DNA提取试剂盒操作说明,提取质
粒DNA;
5,半量反应后,送Genomic Core测序;
6,测序结果报告用FinchTV软件阅读(可用GOOGLE搜索后在线注册下载安装),寻找出目
的片段后,建立每一个克隆序列的TEXT文章(后续的BiQ Analyzer用这个文件导入)。
7,将上述文件导入BiQ Analyzer后,按研究需要质控,最后生成BSP直观图,如附图。
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s*y
19
说得对,一般只谈两个来回。最多谈三个来回。
如果反复提出不同的新要求,会被对方觉得你要么是在故意拖时间或者是有其他用意。

negotiate
属于
经验

【在 m***c 的大作中提到】
: 不要很多来回,一个是对方烦,再来程序上来回多次也不可能。如果需要negotiate
: 地方
: 不多,那么一次提完,提到顶,让对方去还价。如果很多点都需要谈,分清主次,先谈
: 主要的三五点,这些是决定你是否要接这个offer的,第二轮再把trivial的提一提,属于
: 有了更好没有也可以接受的。一次列个十几二十条让人觉得有点太挑剔,而且,没有经验
: 的人,就算列二十条,还是会有漏下的,再提就让人更觉得烦。

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k*1
20
coask
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c*g
21
买卖提好多极品为题的抱怨贴,看完后大多感觉贴主自己是那什么:)

【在 a***d 的大作中提到】
: 嗯,我也不太喜欢这个小姑娘。
: 可是看着她对大哥的感情好像也超过了一个妹妹应该有的,忽然觉得她也好可怜的。

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w*t
22
那,先升级iOS6,然后问。

【在 h**********e 的大作中提到】
: 谁帮我问问
: 土人用的是iPhone4

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c*h
23
re

★ 发自iPhone App: ChineseWeb - 中文网站浏览器

【在 A*****s 的大作中提到】
: 带鱼屏太可恨
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l*s
24
谢谢楼上大哥了,, 我看了,不是bio analyzer,,,, 那个我有。 就是yamanaka
ips 里用过的
那个像马蜂窝一样的。
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p*1
25
谢谢了! 之前接口头offer的时候Dean说会send email,结果一周就把hardcopy寄过来
了。我本来是打算argue两轮的,现在收到的是hardcopy不是email,argue两轮可行么?

【在 s******y 的大作中提到】
: 说得对,一般只谈两个来回。最多谈三个来回。
: 如果反复提出不同的新要求,会被对方觉得你要么是在故意拖时间或者是有其他用意。
:
: negotiate
: 属于
: 经验

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f*u
26
寄信到你的地址
给定一天
去不了可以延期,很多人说也可以提前去。
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c*g
27
家家有本难念的经啊~~~~~~~~~~~~~~~~~~~
有时候觉得 一个孩子也挺好 父母不用想皮球一样踢来踢去
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o*n
28
iPhone 4没有siri,升级了也没有

【在 w******t 的大作中提到】
: 那,先升级iOS6,然后问。
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a*e
29
俺把菜单条立起来,好像还可以

【在 A*****s 的大作中提到】
: 带鱼屏太可恨
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s*y
31
可以。一般都是等你的negotiation 完全结束之后再给你发一封新的hardcopy

么?

【在 p********1 的大作中提到】
: 谢谢了! 之前接口头offer的时候Dean说会send email,结果一周就把hardcopy寄过来
: 了。我本来是打算argue两轮的,现在收到的是hardcopy不是email,argue两轮可行么?

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m*5
32
有没有给定该去哪个办公楼?
是不是要一早去排队
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m*2
33
没看懂她想说啥。。。大家都欠她的?
处女座?
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w*t
34
哦,对了,忘了这个了。

【在 o*****n 的大作中提到】
: iPhone 4没有siri,升级了也没有
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h*n
35
是啊,如果是普屏的话,那就真的是perfect了

【在 A*****s 的大作中提到】
: 带鱼屏太可恨
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l*s
36
谢谢楼上大哥了,, 我看了,不是bio analyzer,,,, 那个我有。 就是yamanaka
ips 里用过的
那个像马蜂窝一样的。
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p*1
37
哈哈好的!真是谢谢了!

【在 s******y 的大作中提到】
: 可以。一般都是等你的negotiation 完全结束之后再给你发一封新的hardcopy
:
: 么?

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c*g
38
下周就到处女月了

【在 m**2 的大作中提到】
: 没看懂她想说啥。。。大家都欠她的?
: 处女座?

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k*y
39
Agree, 现在taskbar都放右边。

【在 a***e 的大作中提到】
: 俺把菜单条立起来,好像还可以
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a*d
41
感觉不太像处女。占有欲好强,有点像金牛。

【在 c********g 的大作中提到】
: 下周就到处女月了
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x*s
42
貌似受汇率及泰国大水的影响,笔记本都会慢慢小涨一点点吧?

【在 t**********8 的大作中提到】
: 原想这两天下个单,没想到居然涨价啦。坑爹呀!
: 别的笔记本都减价。为什么Thankpad涨价呢?

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B*M
43
旁边一个实验室的男生说,BSPCR的效率很低,company许诺90% cover,他做出来的只有10
% cover, 真的吗?

【在 b**********8 的大作中提到】
: 那个棒棒糖图啊,参考这个链接
: http://www.dxy.cn/bbs/thread/15900186?keywords=BSP#15900186
: BSP 主要目的是,通过测定亚硫酸盐修饰后的DNA序列,了解特定基因的具体CpG位点的
: 甲基化情况。而MSP只能获得该样本是否发生甲基化的信息,BSP则可以详细了解每一个
: CpG位点的甲基化情况。
: 1,首先,按前帖设计引物后,确定BSP反应条件。我们实验室一般都做45个cycle.
: 提个有意思的题外话,通常BSP的退货温度,会比相应的MSP的退货温度低。
: 2,BSPCR后,取10ul跑PCR,如条带单一,则直接克隆,具体操作按照Invitrogen的
: TOPO试剂盒进行;如条带有杂带,需要进行PCR Screen,具体操作及原理以后再讲;
: 3,克隆后在LB胶上,培养过夜后,后通常取8-12个克隆,LB培养过夜;

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b*8
44

10
不明白,你这里说的90% or 10% cover是什么意思?

【在 B*M 的大作中提到】
: 旁边一个实验室的男生说,BSPCR的效率很低,company许诺90% cover,他做出来的只有10
: % cover, 真的吗?

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l*s
45
他说的是不是 CpG岛预测?? 不知道了,反正做bsp比较麻烦。 主要是ta克隆
谢谢楼上大哥
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l*s
46
是这个图谱,一直没找到相关软件

【在 b**********8 的大作中提到】
:
: 10
: 不明白,你这里说的90% or 10% cover是什么意思?

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b*8
47

你这个图应该也要先做BSP+克隆测序,拿到序列后才能进行分析
所以TA克隆应该是不可避免的

【在 l********s 的大作中提到】
: 是这个图谱,一直没找到相关软件
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a*7
48
帮顶一个,虽然不懂
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D*9
49
KAO, use EXCEL
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l*s
50

不会是excel吧??

【在 D******9 的大作中提到】
: KAO, use EXCEL
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b*8
51
这位一看ID就知道是做甲基化的高手了,能否展开说说如何用excel来做这类figure?
学习一下

【在 D******9 的大作中提到】
: KAO, use EXCEL
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c*4
52
QUMA: quma.cdb.riken.jp/
Very straightforward. Good luck!

【在 l********s 的大作中提到】
: 在文章中一直看是用这种软件分析的,请问哪里能找到????
: 谢谢,

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b*8
53

这个挺好的

【在 c*********4 的大作中提到】
: QUMA: quma.cdb.riken.jp/
: Very straightforward. Good luck!

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