关于real-time PCR 内参基因选择# Biology - 生物学
p*r
1 楼
準備搬家了,需要刷牆,有沒有在San Francisc附近的xdjms用過好的contractor可以介
紹呢? 謝謝!!
紹呢? 謝謝!!
l*s
2 楼
最近发现 内参基因有时候换掉了，结果可能会不太变化，有肯会变化很大。
请问兄第们如何选内参啊。总不能说那个能得到好结果用那个，，，
心里话，觉得qPCR 是个不太靠谱的东西。 怕了
请问兄第们如何选内参啊。总不能说那个能得到好结果用那个，，，
心里话，觉得qPCR 是个不太靠谱的东西。 怕了
c*g
3 楼
感觉不靠谱的时候就多选几个
a*7
4 楼
太浪费sybrgreen了
n*0
5 楼
我最近也要开始做，没什么经验，请问为什么不靠谱？
【在 l********s 的大作中提到】
: 最近发现 内参基因有时候换掉了，结果可能会不太变化，有肯会变化很大。
: 请问兄第们如何选内参啊。总不能说那个能得到好结果用那个，，，
: 心里话，觉得qPCR 是个不太靠谱的东西。 怕了
【在 l********s 的大作中提到】
: 最近发现 内参基因有时候换掉了，结果可能会不太变化，有肯会变化很大。
: 请问兄第们如何选内参啊。总不能说那个能得到好结果用那个，，，
: 心里话，觉得qPCR 是个不太靠谱的东西。 怕了
l*s
6 楼
您做做就知道了，除非表达量差异真的非常大，
【在 n****0 的大作中提到】
: 我最近也要开始做，没什么经验，请问为什么不靠谱？
l*s
7 楼
还好那两只差别不是特别大，凑活能用
【在 a******7 的大作中提到】
: 太浪费sybrgreen了
r*y
8 楼
我用18s一般还好，有的用ubq貌似不行特别是有可能下游有ubiquitination的。。。。
【在 l********s 的大作中提到】
: 最近发现 内参基因有时候换掉了，结果可能会不太变化，有肯会变化很大。
: 请问兄第们如何选内参啊。总不能说那个能得到好结果用那个，，，
: 心里话，觉得qPCR 是个不太靠谱的东西。 怕了
【在 l********s 的大作中提到】
: 最近发现 内参基因有时候换掉了，结果可能会不太变化，有肯会变化很大。
: 请问兄第们如何选内参啊。总不能说那个能得到好结果用那个，，，
: 心里话，觉得qPCR 是个不太靠谱的东西。 怕了
r*y
9 楼
对了，我有一个跑胶跟qPCR结果不一致，跑胶表达量几乎没有，q出来根control没区别
。。。
【在 l********s 的大作中提到】
: 最近发现 内参基因有时候换掉了，结果可能会不太变化，有肯会变化很大。
: 请问兄第们如何选内参啊。总不能说那个能得到好结果用那个，，，
: 心里话，觉得qPCR 是个不太靠谱的东西。 怕了
。。。
【在 l********s 的大作中提到】
: 最近发现 内参基因有时候换掉了，结果可能会不太变化，有肯会变化很大。
: 请问兄第们如何选内参啊。总不能说那个能得到好结果用那个，，，
: 心里话，觉得qPCR 是个不太靠谱的东西。 怕了
l*s
10 楼
你看看你引物设计的如何把，如果二聚体丰富信号也会收集，或者非特异
【在 r******y 的大作中提到】
: 对了，我有一个跑胶跟qPCR结果不一致，跑胶表达量几乎没有，q出来根control没区别
: 。。。
C*e
11 楼
用2个以上内参
先选几个candidate
然后分别做你要测试的condition下看他们变化大不大
然后选
有软件帮你做这个的
告诉你这几个里面哪个最稳定
用几个最好，（大于1小于6）
【在 l********s 的大作中提到】
: 最近发现 内参基因有时候换掉了，结果可能会不太变化，有肯会变化很大。
: 请问兄第们如何选内参啊。总不能说那个能得到好结果用那个，，，
: 心里话，觉得qPCR 是个不太靠谱的东西。 怕了
先选几个candidate
然后分别做你要测试的condition下看他们变化大不大
然后选
有软件帮你做这个的
告诉你这几个里面哪个最稳定
用几个最好，（大于1小于6）
【在 l********s 的大作中提到】
: 最近发现 内参基因有时候换掉了，结果可能会不太变化，有肯会变化很大。
: 请问兄第们如何选内参啊。总不能说那个能得到好结果用那个，，，
: 心里话，觉得qPCR 是个不太靠谱的东西。 怕了
d*i
12 楼
这个软件叫啥？
免费吗？
【在 C*******e 的大作中提到】
: 用2个以上内参
: 先选几个candidate
: 然后分别做你要测试的condition下看他们变化大不大
: 然后选
: 有软件帮你做这个的
: 告诉你这几个里面哪个最稳定
: 用几个最好，（大于1小于6）
免费吗？
【在 C*******e 的大作中提到】
: 用2个以上内参
: 先选几个candidate
: 然后分别做你要测试的condition下看他们变化大不大
: 然后选
: 有软件帮你做这个的
: 告诉你这几个里面哪个最稳定
: 用几个最好，（大于1小于6）
d*s
13 楼
我感觉生物学实验压根就没有靠谱的结果。
我做实验有10多年了，可以很自豪地说：除了断头法处死小鼠重复率100%，没有一个实
验的结果是每次都一样的。
因此最后判断结果，大部分都是凭自己的感觉和实验目的的需要。
【在 n****0 的大作中提到】
: 我最近也要开始做，没什么经验，请问为什么不靠谱？
我做实验有10多年了，可以很自豪地说：除了断头法处死小鼠重复率100%，没有一个实
验的结果是每次都一样的。
因此最后判断结果，大部分都是凭自己的感觉和实验目的的需要。
【在 n****0 的大作中提到】
: 我最近也要开始做，没什么经验，请问为什么不靠谱？
h*n
14 楼
RealTime StatMiner
可以帮你选
【在 d****i 的大作中提到】
: 这个软件叫啥？
: 免费吗？
可以帮你选
【在 d****i 的大作中提到】
: 这个软件叫啥？
: 免费吗？
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