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关于做SDS-PAGE的acrylamide

关于做SDS-PAGE的acrylamide# Biology - 生物学

m*d2011-12-05 08:12

1 楼

感兴趣的蛋白大概110KDa，phosphorylated form与unphosphorylated form共存，我用
的antibody两个都识别，SDS-PAGE能看到很近的两条band，上面的是phosphorylated
protein,下面band是unphosphorylated protein。
现在用30% acrylamide（37.5:1）做的8%SDS-PAGE, film看起来有些模糊，想问问如果
改用40%acrylamide (29:1)会有帮助吗？有啥建议能增加对着两个band分辨率的方法么
多谢

c*62011-12-05 08:12

2 楼

以前我是用acrylamide:bisacrylamide=100:1的gel来分离phospholated,
unphosphorylated forms. 给你参考一下

【在 m**********d 的大作中提到】

: 感兴趣的蛋白大概110KDa，phosphorylated form与unphosphorylated form共存，我用
: 的antibody两个都识别，SDS-PAGE能看到很近的两条band，上面的是phosphorylated
: protein,下面band是unphosphorylated protein。
: 现在用30% acrylamide（37.5:1）做的8%SDS-PAGE, film看起来有些模糊，想问问如果
: 改用40%acrylamide (29:1)会有帮助吗？有啥建议能增加对着两个band分辨率的方法么
: 多谢