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怎么避免细胞培养的支原体污染?
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s*t
2
终于遇到传说中的支原体污染了,郁闷到吐血 。。。
准备养很多很多细胞做蛋白纯化的,养到一半状态越来越差,无数死细胞漂着,细胞瘦
瘦的,很多小泡泡。PCR检测是支原体污染了 。。。。
扔掉了50个15cm的dish的ES细胞 。。。。
浪费了好多试剂和时间啊。
请教到底该怎么避免支原体污染?是不是我操作的时候不小心?要注意哪些事情?
我看实验室还有人不带手套伸进超净台传细胞呢 。。。
我还需要扔掉哪些东西啊?培养基,trypsin,gelatin,都需要扔掉吗?
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p*n
3
谁叫有容啊? ----郭德纲

【在 b***7 的大作中提到】
: 有容乃大
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v*d
4
Plasmocin from Invivogen (ES cell tested)
细节说明书上都有

【在 s*********t 的大作中提到】
: 终于遇到传说中的支原体污染了,郁闷到吐血 。。。
: 准备养很多很多细胞做蛋白纯化的,养到一半状态越来越差,无数死细胞漂着,细胞瘦
: 瘦的,很多小泡泡。PCR检测是支原体污染了 。。。。
: 扔掉了50个15cm的dish的ES细胞 。。。。
: 浪费了好多试剂和时间啊。
: 请教到底该怎么避免支原体污染?是不是我操作的时候不小心?要注意哪些事情?
: 我看实验室还有人不带手套伸进超净台传细胞呢 。。。
: 我还需要扔掉哪些东西啊?培养基,trypsin,gelatin,都需要扔掉吗?

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i*g
5
简单说,用药是杀不光的,无论说明书多好多好
对于要长期使用的细胞系,唯一的办法是不感染mycoplasma
还有,据说某些ATCC的细胞系,时间一长就有myco,虽然开始时候检测不到
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s*t
6
怎么做到避免感染?
一直加预防支原体的抗生素,就像细胞培养基始终要加PEN-STREP双抗一样,可以吗?

【在 i*****g 的大作中提到】
: 简单说,用药是杀不光的,无论说明书多好多好
: 对于要长期使用的细胞系,唯一的办法是不感染mycoplasma
: 还有,据说某些ATCC的细胞系,时间一长就有myco,虽然开始时候检测不到

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i*g
7
以前隔壁一个做iPS的实验室,他们就为这个问题焦头烂额,杀来杀去也搞不定,还买
了几种mycoplasma的药。你想想,从1个细胞最后长到10^7 以上做分析,有mycoplasma
肯定完蛋了
所以,我知道这个事情。
他们后来会议时候问美国这边,据说办法就是,不用任何pen-strep。没有pen-strep,
细胞长得非常快,你一旦发现细胞长慢了,又没有细菌污染,必然就是mycoplasma污染了
污染就扔掉

【在 s*********t 的大作中提到】
: 怎么做到避免感染?
: 一直加预防支原体的抗生素,就像细胞培养基始终要加PEN-STREP双抗一样,可以吗?

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a*d
8
Strategy in our lab:
Put all the suspicious cells in one quarantine incubator,using detection kit
like this to test your cells every month. Then move all myco-negative cells
to decontaminated incubator.
http://www.rndsystems.com/product_detail_objectname_MycoProbeMy
MycoProbe® Mycoplasma Detection Kit
It's always better to prevent spreading of Myco in the first place.
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