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大家碰到过膜蛋白在胞质中染色的吗?
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大家碰到过膜蛋白在胞质中染色的吗?# Biology - 生物学
v*a
1
很多文献所指的膜蛋白,我用其的抗体染细胞,结果大部分都是cytoplasmic/nuclear
的染色很强,cell surface的染色有的甚至都没有,不知道是怎么一回事?大家有碰到
过吗?
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n*w
2
这个蛋白有其他的pool吗? 还是就在膜上?如果是这样,你抗体识别哪个部分?
你怎么处理你样品的?PFA固定还是Methanol?
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s*s
3
你用的和文献上是一种细胞么?

nuclear

【在 v***a 的大作中提到】
: 很多文献所指的膜蛋白,我用其的抗体染细胞,结果大部分都是cytoplasmic/nuclear
: 的染色很强,cell surface的染色有的甚至都没有,不知道是怎么一回事?大家有碰到
: 过吗?

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v*d
4
1 膜蛋白在ER里合成,golgi里修饰 最后运到目的地。
2 细胞内到处都是膜
3 抗体只有少数1部分能用来染色,还有特异性的问题。最好通过比较文献和
overexpress tagged protein 来确定抗体是不是可靠好用

nuclear

【在 v***a 的大作中提到】
: 很多文献所指的膜蛋白,我用其的抗体染细胞,结果大部分都是cytoplasmic/nuclear
: 的染色很强,cell surface的染色有的甚至都没有,不知道是怎么一回事?大家有碰到
: 过吗?

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v*a
5
我做了好几个膜蛋白,都出现类似的情况。抗体有识别cytoplasmic的,也有识别
extracellular的。我用的methanol固定的。是固定剂的缘故吗

【在 n***w 的大作中提到】
: 这个蛋白有其他的pool吗? 还是就在膜上?如果是这样,你抗体识别哪个部分?
: 你怎么处理你样品的?PFA固定还是Methanol?

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v*a
6
不是……但是有一个做的膜蛋白的染色跟一篇JCB的paper上的一样,核周染色很深(但
细胞不是同一种)。这个能算match吗?不知道如果写paper如何解释?

【在 s******s 的大作中提到】
: 你用的和文献上是一种细胞么?
:
: nuclear

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v*a
7
多谢!学习了。

【在 v*********d 的大作中提到】
: 1 膜蛋白在ER里合成,golgi里修饰 最后运到目的地。
: 2 细胞内到处都是膜
: 3 抗体只有少数1部分能用来染色,还有特异性的问题。最好通过比较文献和
: overexpress tagged protein 来确定抗体是不是可靠好用
:
: nuclear

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